含有抗-FC受体结合剂的治疗化合物制造技术

公开了诱导效应细胞介导的靶细胞杀伤的多特异性分子。该分子是“多特异性的”，因为这些分子与多个（两个或两个以上）不同的靶结合，其中一个靶是免疫细胞表面上的Ｆｃ受体。本发明专利技术的多特异性分子包括下述的分子，这些分子包含至少一个与Ｆｃ受体，例如Ｆｃγ受体（例如，Ｆｃγ ＲＩ），结合的部分，以及至少另一个与不同的靶，例如肿瘤细胞或病原体上的抗原，结合的部分。本发明专利技术的多特异性分子还包括抗原“多聚体复合物”，它包含多个（即２个或２个以上）与抗原递呈细胞（ＡＰＣ）上的分子，例如Ｆｃ受体，结合、并与一个或一个以上抗原连接的部分。这些多聚体复合物将抗原，例如自身抗原，导向ＡＰＣ，以诱导和／或增强ＡＰＣ对该抗原的内在化（胞吞作用）、加工和／或递呈。因此，这些分子可以用于在体内或在体外诱导或增强对正常非免疫原性的蛋白，例如自身抗原，的免疫应答。在特定的实施方案中，至少该多特异性分子的一个部分包含人源化的或人的抗体或抗体片段（例如，ＳｃＦｖ或Ｆａｂ′），该抗体或抗体片段与Ｆｃ受体或靶细胞上的受体（例如ＥＧＦ－Ｒ或ＨＥＲ２）结合。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
有关的申请以下是与本申请有关的专利申请(1)顺序号为08/484,172，题为“含有抗/Fc受体抗体的治疗化合物”，1995年6月7日提出；(2)美国顺序号为08/661,052，1996年6月7日提出，现已颂发证书的美国专利NO.5,837,243，该专利是(1)的部分继续；(3)美国顺序号为09/188,082，1998年11月6月日提出的美国专利申请，它是(2)的部分继续；(4)美国顺序号为09/364,088，1999年7月30日提出的美国专利申请，它是(3)的部分继续，本申请是(4)的部分继续。前述每项申请的全部内容，及此处列举的所有参考文献、颂布的专利，以及公布的申请专利均在此引入，作为参考。
技术介绍
免疫球蛋白(Igs)由二条重链和二条轻链组成，每条链包含对抗体效应物功能起作用的NH2末端抗原结合的可变区，和COOH末端恒定区。Ig重链COOH末端区形成Fc区，并通过与特定的受体，皆知为Fc受体(FcRs)的相互作用，参与触发细胞的活性。所有类别的Ig，或同种型，的Fc受体(例如，IgG(FcγR)、IgE(FcεR)、IgA(FcαR)、IgM(FcμR)、IgD(FcδR))，都已鉴定。不同的同种型抗体的生物活性不同，它部分取决于其与不同FcR的结合能力，这些不同的FcR在不同的免疫(效应)细胞上表达。(Fridman，W.H.(1991年9月)FASEB杂志Vol.5.2684-2690)。直接抗FcRs的鼠抗体已有制备(参见例如，美国专利No.4,954,617，题为人单核吞噬细胞免疫球蛋白G上的Fc受体的单克隆抗体，和国际专利申请公布号WO91/0587，题为对IgA受体特异的单克隆抗体)。鼠单克隆抗体可用于人的治疗，而且已能生产出无人的病原体，例如肝炎或人免疫缺陷病毒，污染的鼠单克隆抗体。但是，鼠单克隆抗体用于某些人的治疗时，会诱发出对“外源”鼠蛋白的免疫应答。该应答称为人抗鼠抗体，或HAMA应答(Schroff，R.等(1985)，CancerRes.，45，879-885)，而且这种情况会引起血清疾病，并造成鼠抗体从个体的循环中迅速排出。已表明，人体的这种免疫应答可以抗鼠免疫球蛋白的可变区和恒定区。重组DNA技术已用于抗体的改变中，例如，一个种的特定免疫球蛋白区可被另一个种的免疫球蛋白区所取代。Neuberger等(PCT专利申请号PCT/GB85/00392)描述了某种方法，按此方法，一个种的Ig分子的互补重链和轻链的可变区，可以与另一个种的互补重链和轻链的Ig恒定区相结合。该方法可用来取代鼠的恒定区，产生“嵌合”抗体，该抗体可用于人的治疗。用Neuberger等所述方法生产的嵌合抗体中，含有人的Fc区，它可有效地刺激抗体介导的效应因子功能，例如补体结合功能，但仍然可能在人体内引起抗鼠(外源)可变区的免疫应答。Winter(英国专利申请号GB2188538A)描述了一种改变抗体的方法，该方法是用来源于另一个种的互补决定区取代该抗体的互补决定区(CDR)。该方法可以用来将鼠单克隆抗体可变区的CDR代入人的重链和轻链的Ig可变区域中，该CDR具有所需的结合性能(例如与人的病源体结合)。然后，这些改变后的Ig可变区与人的Ig恒定区结合而产生抗体，该抗体的组成中，除了代入的鼠CDR以外，其余全部是人的。由于鼠的组分相当少，Winter所述的“重构的”或“人源化的”抗体与“嵌合”抗体相比，大大降低了在人体内引起的免疫应答。而且，改变的抗体在循环中的半衰期应可达到天然的人抗体的水平。但是，如Winter所称，仅用对某种抗原，例如病毒或细菌蛋白特异的另一种抗体的互补CDR，来取代某种抗体的CDR，所产生的改变抗体并不总能保持其所需的结合能力。实际上，在抗体可变区框架中的某些氨基酸与构成CDR的氨基酸残基相互作用，以致于要恢复其与抗原结合的能力，有可能需要取代人的Ig可变区中的氨基酸。含有抗Fc受体部分和抗靶部分的双特异性分子，(例如异源抗体)，已制成制剂并用于治疗上，例如治疗癌症(例如乳癌或卵巢癌)或病原体感染(如HIV)(参见，例如，国际专利申请公布号W091/00360，题为具有双效应因子功能的双特异性异源抗体；以及国际专利申请公布号WO91/05793，题为治疗爱滋病的双特异性试剂)。此外，识别抗原和抗原呈递细胞的双特异性分子可施予治疗对象，以刺激其免疫应答(参见，例如国际专利申请公布号WO92/05793，题为用双特异试剂导向的免疫刺激)。专利技术简述本专利技术提供导向免疫细胞的重组和化学合成的多特异性分子。该分子是“多特异性的”，因为这些分子与多个(2个或2个以上)不同的靶结合，其中一个靶是免疫细胞表面上的分子，例如效应细胞和/或抗原递呈细胞(APC)。优选的免疫细胞靶包括Fc受体，特别是FcδRI和FcαR。在一个实施方案中，本专利技术的多特异性分子包括至少一个与效应细胞上的分子，例如Fc受体，结合的部分，以及至少一个(例如，2、3、4个或4个以上)与不同的靶，例如在肿瘤细胞或病原体上的抗原，结合的部分。因此，这些分子可以用于诱导效应细胞介导的靶清除。在一个优选的实施方案中，上述多特异性分子包含作为结合特异性的人或人源化的抗体(或抗体片段)。在另一个实施方案中，本专利技术的多特异性分子包括抗原“多聚体复合物”，该复合物由多个部份(即2个或2个以上)组成，这些部分与抗原递呈细胞(APC)上的分子，例如Fc受体结合、并与一种或一种以上抗原连接。这些多聚体复合物将抗原，例如自身抗原，导向APC，以通过APC诱导和/或增强对抗原的内在化(胞吞作用)、加工和/或递呈。因此，这些分子可以用于在体内或体外诱导或增强对正常非免疫原性的蛋白，例如自身抗原，的免疫应答。另一方面，多特异性分子是本专利技术的特征，该分子最低限度包括抗Fc受体部分、抗靶部分、以及可包括或不包括的直接抗第三种靶的第三部分。该第三部分，此处亦称为“抗增强因子”(抗EF)部分，例如，可以是抗体或抗体片段，或是细胞受体的配体。在优选的实施方案中，该多特异性分子包含作为结合特异性的人或人源化的抗体(或抗体片段)。另一方面，产生多特异性分子的方法也是本专利技术的特征。在一个实施方案中，两种特异性都在同一载体中编码，并在宿主细胞中表达和装配成双特异性分子或融合蛋白。在另一实施方案中，先分别产生每种特异性(例如用重组方法)，然后，在抗体的场合，用化学法通过重链C末端的铰链区的巯基结合相互联结在一起。还有另一方面，本专利技术的特征是，多特异性分子，此处亦称为“抗原多聚体复合物”，该复合物含有2种或2种以上与至少一种抗原连接的结合特异性。该结合特异性物结合到抗原递呈细胞表面的组分上，例如Fc受体，该受体在与结合特异性结合时，可以介导分子复合物的内在化。在优选的实施方案中，该分子复合物包括3种或3种以上的结合特异性，而且其中至少一种特异性是对Fc受体(例如FcγRI或FcαR)特异的。在特别优选的实施方案中，该抗原在非复合物形式施用时是非免疫原性的。诱导或增强对目的抗原免疫反应的方法也是本专利技术的特征，该方法是对治疗对象施予本专利技术的抗原多聚体复合物。本专利技术进一步还包括对治疗对象免疫接种的方法，该方法是将本专利技术的抗原多聚体复合物施予治疗对象。基于其可引本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种双特异性分子，它包含对Ｆｃα受体的第一结合特异性和对ＥＧＦ受体的第二结合特异性。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：YM德奥，J戈德斯坦，R戈拉齐尔诺，T凯勒，
申请(专利权)人：米德列斯公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]