乙酰基-脒基苯丙氨酰-环己基甘氨酰-吡啶氨基丙酸酰胺的制备方法技术

本发明专利技术涉及式（Ｉ）的乙酰基－脒基苯丙氨酰－环己基甘氨酰－吡啶子氨基丙酸酰胺的制备方法，其中阴离子Ｘ是生理可接受阴离子，和它们的类似物，它们是凝血因子Ｘａ的有效抑制剂并且可以用来例如预防血栓形成。根据本发明专利技术的方法包括将通过不对称氢化作用并且将氰基转化为脒而从２－［２－乙酰基氨基－３－（４－氰基苯基）丙稀酰氨基］－２－环己基乙酸获得的２－［２－乙酰基氨基－３－（４－脒基苯基）丙酰基氨基］－２－环己基乙酸，或者其盐，与３－（２－氨基－２－氨基甲酰基乙基）－１－甲基吡啶鎓盐或者其盐偶联。本发明专利技术还提供用于该方法的起始物和中间体，它们的制备方法，和作为二甲苯磺酸盐的乙酰基－（Ｓ）－４－脒基苯丙氨酰－（Ｓ）－环己基甘氨酰－（Ｓ）－（１－甲基－３－吡啶子）氨基丙酸酰胺。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及式I的乙酰基-脒基苯丙氨酰-环己基甘氨酰-吡啶氨基丙酸酰胺的制备方法， 其中阴离子X是药学可接受阴离子，和它们的类似物，它们是凝血因子Xa的有效抑制剂并且可以用来例如预防形成血栓。本专利技术方法包括将通过不对称氢化作用并且将氰基转化为脒而从2--2-环己基乙酸获得的2--2-环己基乙酸或者其盐，与3-(2-氨基-2-氨基甲酰基乙基)-1-甲基吡啶鎓盐或者其盐偶联。本专利技术还提供用于该方法的起始物和中间体，它们的制备方法，和作为二甲苯磺酸盐的乙酰基-(S)-4-脒基苯丙氨酰-(S)-环己基甘氨酰-(S)-(1-甲基-3-吡啶基)氨基丙酸酰胺。在某些临床情况下，例如，深度静脉血栓、高危心肌梗塞或者稳定的或者不稳定的心绞痛、凝血系统障碍和血栓形成可以导致致命。但是，在防治血栓形成中，不期望过分甚至完全抑制凝血系统，因为这可以导致流血威胁生命。当前使用的血凝抑制剂，例如肝素，阿司匹林或者蛭素，不具备最佳的性质轮廓，因为它们能够导致流血并发症，在提到的某些临床情况下，不能够防止血管堵塞。动物实验证明凝血酶因子Xa的特异性抑制剂可靠地预防血栓形成而不发生出血，当直接使用凝血酶抑制剂时观察到出血现象。式I的化合物及其类似物是静脉内，皮下和口服施用后有效的因子Xa的特异性高效抑制剂。WO-A-95/29189和相应的美国专利No.US-A-5,849,510中描述了式I的化合物及其类似物。根据WO-A-95/29189，通过固相合成使用保护基团技术制备这些化合物，其中使用Knorr连接基团使3-吡啶基丙氨酸与树脂偶联，然后与环己基甘氨酸偶联，吡啶氮原子被季铵化，该二肽与从4-氰基苯丙氨酸制备的乙酰基-4-脒基苯丙氨酸偶联，并且该产物从树脂上裂解下来之后，通过色谱法纯化。这种固相方法不适合制备开发任务要求的多千克量，例如毒理学和临床研究，或者甚至不适合工业规模合成。只有在要求的规模上进行制备并且具有合适的纯度时，一种药学活性化合物可接受为开发产物并且随后用于患者，所谓纯度，在具有不对称中心化合物的情况下，还特别包括立体化学纯度。所述式I的化合物在脒鎓基团和N-甲基吡啶鎓基团中含有携带正电荷的肽二阳离子。在带有不同的阴离子X-例如乙酸根，氯离子，富马酸酸根，苯甲酸根，酒石酸根，马来酸根，三氟乙酸根，甲苯磺酸根，硫酸根或pamoate的式I的化合物中，发现只有三氟乙酸盐(式I的化合物，X-＝CF3CO2-)是结晶体。但是，这种三氟乙酸盐的热稳定性不足够，其保存寿命不令人满意，并且从生理学角度看，这种盐较不优选长期使用。发现化合物I的所有的其它盐的X-射线粉末图都是无定形的。在相对大规模制备式I的化合物中，这种盐的无定形性质是一个相当大的问题，因为这使得不可能重结晶，并且分级沉淀是适合大规模使用的唯一一种纯化方法。但是，沉淀的纯化效率当然比结晶的要低得多，因此必需在尽可能平和进行的反应中制备具有合适的阴离子X的粗式I的化合物，使得通过分级沉淀最后能够获得临床上可接受纯度的产物。但是，该制备方法自然也应具有一些可接受的因素，例如，产率，步骤数目或者有效性及起始物的成本。WO-A-97/22712中描述了不是在固相上进行的式I的化合物的制备方法。在该方法中，以和WO-A-96/29189方法中同样的顺序连接式I的化合物中所包含的三个氨基酸单元。(S)-3-吡啶基丙氨酸，叔丁氧羰基(Boc)保护的氨基，最初转化为酰胺，接着，去除保护基团之后，与(S)-N-Boc-环己基甘氨酸偶联，去除保护基团，该二肽与乙酰基-(S)-4-氰基苯丙氨酸偶联，并且通过与硫化氢，碘甲烷和氨水反应将得到的三肽中的氰基转化为脒，并且将吡啶氮原子季铵化。通过蒸发最后反应步骤获得的反应溶液，加入三氟乙酸溶解残余物，过滤并且冷冻干燥，以三氟乙酸盐的形式分离产物。但是发现通过该方法获得的产物的纯度，包括立体化学纯度，不符合要求，必需要复杂的色谱法纯化，而这涉及大的损失并且当以大规模进行该方法时是不可接受的。从生理学角度看关于三氟乙酸根阴离子为了避免可能的缺点，进一步需要使用离子交换色谱将产物转化为不同的盐。此外，该方法具有相当的技术上的缺点，例如使用溶剂例如乙醚或己烷或者在低温下操作，并且使用昂贵的起始物(式I的化合物中所包含的作为结构单元的少量的三种对映体纯非天然α-氨基酸(S)-3-吡啶基丙氨酸，(S)-环己基甘氨酸和(S)-4-脒基苯丙氨酸(或者(S)-4-氰基苯丙氨酸；脒基可以从氰基形成)可从商业上获得，但是这些化合物非常昂贵)。因此，仍然存在大规模制备具有合适的阴离子X的式I的化合物的平和进行的方法的需要。通过根据本专利技术的式I的化合物的制备方法实现该目的，其包括通过催化氢化作用和氰基向脒基的转化作用将式II的化合物转化为式III的化合物或者其与酸HX的盐，接着使式III的化合物或者其盐与式IV的化合物或者其与酸HX的盐反应，得到其中X是生理可接受阴离子的式I的化合物。 在已知方法中，通过将吡啶基丙氨酸和环己基甘氨酸的C-末端二肽与N-末端氨基酸脒基苯丙氨酸(或者氰基苯丙氨酸)偶联构建式I的分子，在根据本专利技术的方法中，通过使脒基苯丙氨酸和环己基甘氨酸的N-末端二肽与C-末端氨基酸吡啶基丙氨酸偶联来合成该分子。此外，在根据本专利技术的方法中，在用于该偶联的二肽中，和在已知方法中一样在两个手性α-氨基酸的偶联反应中不形成具有两个对差向异构化作用敏感的手性中心的结构单元CH-CO-NH-CH-CO，而是通过不对称氢化作用形成。在根据本专利技术的方法中，肽偶联完全而且定量化，使用廉价的试剂。差向异构化作用程度非常低。通过分级沉淀以高产率和高化学纯度和立体化学纯度获得式I的化合物。获得期望的纯度不需要色谱法纯化或者昂贵并且复杂的技术，例如冷冻干燥。本专利技术还提供了与上述方法相类似的方法，其中使用具有不同构型的起始物制备式I的化合物的立体异构体，例如，其中脒基苯丙氨酸单元中手性中心具有(R)构型和/或环己基甘氨酸单元中手性中心具有(R)构型和/或吡啶基丙氨酸单元中手性中心具有(R)构型的化合物，或者在一个或多个手性中心上以(RS)混合物存在的化合物。本专利技术还提供了与上述方法相类似的方法，其中使用合适的起始物，制备式I的化合物的类似物(和它们的立体异构体)，例如，其中代替脒基苯丙氨酸单元中乙酰基氨基中的甲基，包含(C1-C4)-烷基和/或，代替吡啶季氮原子处的甲基，包含(C1-C4)-烷基的化合物，这样的(C1-C4)-烷基的例子是甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，异丁基和叔丁基。式I和IV的化合物中和酸HX中生理可接受阴离子可以是，例如，氯离子，溴离子，碘离子，甲磺酸根，甲苯-4-磺酸根，乙酸根，苯甲酸根和其它。在多价阴离子例如硫酸根的情况下，X是阴离子等价物。X优选是即使如果以相对高剂量和相对长的时间使用式I的化合物，从生理学角度看也没有缺陷的，和/或给式I的化合物带来药物加工和药理作用方面的有益性能例如在水中的合适的溶解度的，和/或给式I和IV的化合物带来根据本专利技术的方法技术实施方面的有益性能例如容易操作，在使用的溶剂中的合适的溶解度，使得它们容易沉淀和/或容易过滤的事实等的阴离子。在本专利技术一个优选的实施方案中，X是甲苯-4-磺酸根(＝4-甲基本文档来自技高网...

【技术保护点】
制备式Ⅰ的化合物的方法，包括通过催化氢化作用和氰基向脒基的转化作用将式Ⅱ的化合物转化为式Ⅲ的化合物或者其与酸ＨＸ的盐，接着与式Ⅳ的化合物或者其与酸ＨＸ的盐反应，得到其中阴离子Ｘ是生理可接受阴离子的式Ⅰ的化合物。 ＊＊＊。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：G布雷波尔，W霍拉，H詹德里拉，G贝克，
申请(专利权)人：阿文蒂斯药物德国有限公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]