酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物制造技术

一种由黄芪，特别是黄芪的根制备的酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物，其中阿拉伯糖∶半乳糖比例小于３．５∶１或小于酸改性前阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物中阿拉伯糖∶半乳糖比例的８０％，可用于重建一种静脉注射用水剂；并且当以静脉注射方式施用于哺乳动物时有利于刺激造血，诱导巨核细胞的增殖或成熟，刺激生成ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、ＧＭ－ＣＳＦ、或Ｇ－ＣＳＦ，刺激嗜中性白细胞生成或作用，治疗嗜中性白细胞减少症、贫血症、或血小板减少症，促进暴露于细胞毒性剂或辐射照射（例如，意外的或非治疗性的暴露，以及治疗性暴露）之后个体复原，治疗恶病质、呕吐、或撤药综合征，或改善生物反应性，或保护乙型肝炎患者的肝脏细胞。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种阿拉伯半乳聚糖。具体地，本专利技术涉及由黄芪，特别是黄芪的根为原料制备的酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物，其中阿拉伯糖∶半乳糖的比例小于3.5∶1或小于酸改性前阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物中阿拉伯糖∶半乳糖的比例的80％。已有人用黄芪煎剂，和由乙醇沉淀的煎剂制备成的溶液注射给药，并且据报道可改善胃和十二指肠溃疡症状和增加慢性白细胞减少症患者的白细胞数(参阅由H.-M.Chang和P.P.-H.But编辑的“Pharmacology and Applications of Chinese Materia Medica”第1041-1046页，题目为“Huangqi”，World Scientific Publishing Co.，Singapore，1987)。黄芪煎剂、纯化的低分子量部分(例如分子量在25,000-35,000的部分)、和含有黄芪的植物药混合物的煎剂，在下述方面也显示出活性恢复局部异种移植反应中的免疫系统(D.-T.Chu等，“Immunotherapy with Chinese medicinal herbs.I...”，J.Clin.Lab.Immunol.，25，119-123(1988))，逆转环磷酰胺诱导的免疫抑制反应(D.-T.Chu等.，“Immunotherapy with Chinese medicinal herbs.II...”，J.Clin.Lab.Immunol.，25，125-129(1988))，加强由rIL-2所致的LAK细胞细胞毒性(D.-T.Chu等，“Fractionated extract ofAstragalus membranaceus”，J.Clin.Lab.Immunol.，25，183-187(1988))，增强免疫抑制小鼠的免疫应答，刺激单核细胞的应答，和刺激小鼠的骨髓造血作用。Liu在美国专利第4,843,067号中披露了一种药物组合物，它含有黄芪多糖(据称可从Astragalus membranaceus Bge.或Astragalusgummifer Labillard中提取得到)和当归多糖。据称该黄芪多糖可通过用水从黄芪根的粉末中提取和乙醇沉淀得到。Verbiscar在美国专利第5,2868,467号中披露了一种来自西黄蓍胶(Astragalustragacantha(tragacanth))植物的免疫调节性多糖部分，其在低温下制备而成，以“使其在化学变化和构象变化下保持多糖的完整性”。Josephson等人在美国专利第5,336,506号中披露了用诸如阿拉伯半乳聚糖(分离自落叶松(Larix occidentalis))和甘露聚糖等植物性多糖和一些药剂形成复合物，以将药剂靶向引导到可引起受体介导内吞作用的细胞受体。Adams等人在美国专利第5,116,969号中披露了一种据说适用于密度梯度分离的超纯化的阿拉伯半乳聚糖产物。Jung等人在美国专利第5,478,576号中披露了纯化的阿拉伯半乳聚糖(同样来自Larix occidentalis)、及其降解产物、和修饰物,同样可用来将药剂传递到能进行受体介导的内吞作用的细胞受体。Lewis在美国专利第5,589,591号中披露了不含内毒素的多糖，例如阿拉伯半乳聚糖、葡聚糖、甘露聚糖、和阿拉伯胶，其由这些多糖的不纯形式经超滤而制成，该超滤的程序为首先通过一低分子量截止膜，保留滞留物，然后通过一高分子量截止膜，保留滤液。然而，这些文献都注重存在于产物中的多糖(如，阿拉伯半乳聚糖)，甚至可使用设计的技术来除去阿拉伯半乳聚糖蛋白。阿拉伯半乳聚糖蛋白也存在于有花植物中，并广泛存在于大多数高等植物中。阿拉伯半乳聚糖蛋白(AGPs)，有时称作阿拉伯半乳聚糖肽，是含有高比例碳水化合物和通常少量蛋白(低于10％)的糖蛋白，虽然已知也有较高蛋白含量的阿拉伯半乳聚糖蛋白。在从植物分离出的富含羟脯氨酸的糖蛋白中，阿拉伯半乳聚糖蛋白的特点是通常较低的蛋白含量和其一般能与β-葡糖基Yariv试剂，即1，3，5-三(4-β-D-吡喃葡糖氧基苯偶氮基(glucopyranosyloxyphenylazo))-2，4，6-三羟基苯结合的能力。阿拉伯半乳聚糖蛋白是阿拉伯胶的成分，所述阿拉伯胶是一种阿拉伯橡胶树(Acacia senegal)的胶质渗出物，其常在食品中用作乳化剂、防止结晶剂、和调料封装剂(flavor encapsulator)。Chen等人在美国专利第5,646,029号中披露了自花烟草(Nicotiana alata)、白花单叶烟草(Nicotianaplumbaginafolia)、和西洋梨(Pyrus communis)中分离出植物AGP基因的方法。有关阿拉伯半乳聚糖蛋白的详细讨论，可参见E.A.Nothnagel的“Proteoglycans and related components in plant cells”，Int.Rev.Cytology，174，195-291(1997)。上述文献及本说明书中提到的其他文献所披露的内容结合于此作为参考。本专利技术的第二方面提供一种水性可供注射的酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白制剂，其包括一种有效治疗剂量的本专利技术第一方面的酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物和一种水性可供注射的赋形剂。本专利技术的第三方面提供一种通过给予本专利技术第一方面的酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物、或本专利技术第二方面的酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白配方来治疗哺乳动物疾病的方法，例如刺激造血，诱导巨核细胞的增殖和成熟，刺激IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ、GM-CSF、或G-CSF的生成，刺激嗜中性白细胞的生成或活化，治疗嗜中性白细胞减少症、贫血症、或血小板减少症，加速因暴露(例如意外或非治疗性的暴露，以及治疗性的暴露)于细胞毒性物质、或辐射照射后的恢复，治疗恶病质、呕吐、或撤药综合征(drugwithdrawal symptomes)，或恢复或激活对病毒、细菌、真菌、及其他感染和在其他免疫抑制情况下的免疫应答，或保护乙型肝炎患者的肝脏细胞，包括在该接受治疗的哺乳动物身上施用有效剂量的本专利技术第一方面的酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物，特别是本专利技术第二方面的一种可供注射的酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白水剂；可选地与至少一种其他药剂(例如能刺激造血的药剂)合用。本专利技术的第四方面提供了制备本专利技术第一方面的酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物和本专利技术第二方面的酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白配方的方法。专利技术详述定义“酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物”是一种“阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物”(如下述所定义的)，该阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物在一定条件下用酸处理从而使得在该组合物中阿拉伯糖∶半乳糖的比例低于3.5∶1，优选低于3.0∶1，或低于酸改性前阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物中阿拉伯糖与半乳糖比例的80％。“阿拉伯半乳聚糖蛋白”或“AGP”是一种通常可以用β-葡糖基亚里夫(Yariv)试剂沉淀、并且高度糖基化的蛋白，其中碳水化合物约占分子量的至少50％，并且其中主要的碳水化合物成分是阿拉伯糖和半乳糖，且阿拉伯糖残基主要位于末端。对于阿拉伯半乳聚糖蛋白，其通常与单克隆抗体MAC207进行特异性的反本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物，其成分中阿拉伯糖／半乳糖的比例小于３．５∶１、或小于在酸改性前所述组合物的阿拉伯半乳聚糖蛋白组分的阿拉伯糖∶半乳糖比例的８０％，所述酸改性的阿拉伯半乳聚糖蛋白组合物是由黄芪、特别是由黄芪的根为原料制备而成。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：安金华，凯伦S刘，爱德恩S里纳克斯，约翰H慕瑟，
申请(专利权)人：法蒙金希公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]