香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法技术

本发明专利技术涉及香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法，首先将香精香料待测样品用溶剂稀释得到待测样品溶液；通过直接进样方式，采用傅立叶变换离子回旋共振质谱分析待测样品溶液，得到待测样品指纹谱图；建立香精香料标准样品的傅立叶变换离子回旋共振质谱标准谱库；根据待测样品指纹谱图和标准谱库，确定共有特征离子峰，根据共有特征离子峰在待测样品指纹谱图中的响应和在标准谱库中的响应，计算香精香料待测样品与香精香料标准样品的相似度匹配得分，判断香精香料待测样品质量的稳定性及差异性，完成香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析。本发明专利技术无需色谱柱分离，直接进样分析，前处理简单；分析快速、准确。

Keywords flavor and flavor; Fu Liye transform; ion cyclotron resonance mass spectrometry; fingerprint analysis method;

The invention relates to a method for analysis of essence of Fu Liye transform ion cyclotron resonance mass spectrometry fingerprint, the perfume sample diluted with a solvent to obtain the sample solution to be measured; through direct injection, using Fu Liye transform ion cyclotron resonance mass spectrometry analysis of test sample solution, obtained the sample fingerprint; establish standard flavor samples of the Fu Liye transform ion cyclotron resonance mass spectrometry standard spectrum library; according to the sample fingerprint and standard spectral library were determined according to the characteristics of ion peak, the common features of ion peaks in the sample fingerprint spectrum response diagram and in response to a library of standard spectra, similarity calculation of flavor sample with the essence of standard sample matching score, to determine the stability and flavor differences in sample quality, complete the flavor from the Fu Liye transform Analysis of fingerprints by proton cyclotron resonance mass spectrometry. The present invention does not need chromatographic column separation, direct sample introduction analysis, simple pretreatment, rapid and accurate analysis.

【技术实现步骤摘要】
香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法
本专利技术涉及香精香料分析领域，尤其涉及香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法。
技术介绍
烟用香精香料具有改善卷烟吸味品质，赋予卷烟特征香气的作用，是构成卷烟品牌风格的重要因素，与卷烟产品的质量稳定性密切相关。目前香精香料的质量主要通过理化指标(乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇、酸值、相对密度、折光指数、挥发性成分总量)和感官指标(外观、溶混度、香气和香味质量)两个环节来控制。上述方法具有检验周期长、仪器设备种类多、允差范围较大及人为判定不确定因素的影响等缺点，致使检验结果的重复性和可比性较差，不能准确反映香精香料的内在质量及其波动，故很难准确把握香精香料质量的变化，需要建立一种科学、准确、快速的质量分析及评价方法。目前用于香精香料质量分析及评价的色谱指纹图谱分析方法有：气相色谱、液相色谱、气质联用、液质联用技术。常用的气相色谱和液相色谱指纹图谱分析具有检验周期长、分析具有选择性，不能全面的表征烟用香精香料的特征组分，且指纹图谱相似度的分析多采用夹角余弦法，夹角余弦法在计算色谱指纹图谱相似度时，对等比例变化和小峰的影响不敏感，存在一定的不足之处，不能准确反映香精香料的差异性。而普通质谱在分析香精香料样品时，需要一定的的样品前处理(萃取、浓缩、SPME等)后，才可以进行分析；需要经过特定的色谱柱，目标物在一定的色谱条件下才能达到分离，而是针对适合该色谱柱分离的物质才能分离，且分析时间一般比较长；样品在普通质谱中的分析，一次最多分析出一百多种物质。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的问题，提供一种香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法，样品前处理过程简单，可以全面有效的表征香精香料的指纹信息。为了达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：包括以下步骤：(1)将香精香料待测样品用溶剂稀释得到待测样品溶液；(2)通过直接进样方式，采用傅立叶变换离子回旋共振质谱分析待测样品溶液，采集表征不同香精香料的分子离子或准分子离子指纹信息，得到待测样品指纹谱图；(3)建立香精香料标准样品的傅立叶变换离子回旋共振质谱标准谱库；(4)根据步骤(2)获得的待测样品指纹谱图和步骤(3)获得的标准谱库，确定共有特征离子峰，根据共有特征离子峰的数量及共有特征离子峰在待测样品指纹谱图中的响应和在标准谱库中的响应，计算香精香料待测样品与香精香料标准样品的相似度匹配得分，根据相似度匹配度得分的高低判断香精香料待测样品质量的稳定性及差异性，完成香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析。进一步地，香精香料为烟用香精香料。进一步地，步骤(1)中的溶剂为甲醇或者体积分数为75～80％的甲醇水溶液。进一步地，步骤(1)中香精香料待测样品用溶剂稀释1000倍。进一步地，步骤(3)具体包括：将香精香料标准样品按步骤(1)和步骤(2)处理后，获得香精香料标准样品谱图，在信噪比阈值为4％，相对响应阈值为0.01％，绝对响应阈值为100的条件下，进行特征离子峰的标记，将经过标记的香精香料标准样品谱图添加到谱库，获得香精香料标准样品的傅立叶变换离子回旋共振质谱标准谱库。进一步地，傅立叶变换离子回旋共振质谱的检测器为ESI源。进一步地，傅立叶变换离子回旋共振质谱的分析条件中，流速：2.0μL/min，干燥气：4.0L/min，干燥气温度：150～180℃，采集模式：宽带采集，质量范围：150～3000。进一步地，步骤(4)中相似度匹配得分计算公式如下：F＝1000×[A2/(T×L)]；R＝1000×[A2/(U×r)]；P＝1000×[A2/(U×L)]；其中：F-正相似度匹配得分；R–反向相似度匹配得分；P–峰纯度得分；A2＝共有特征离子峰在待测样品指纹谱图中的响应与在标准谱库中的响应乘积加和的平方；T＝共有特征离子峰在待测样品指纹谱图中响应平方的加合；L＝标准谱库中所有特征离子峰响应平方的加合；U＝待测样品指纹谱图中所有特征离子峰响应平方的加合；r＝共有特征离子峰在标准谱库中响应平方的加合。进一步地，基准值为1000，在P值、F值和R值均不小于980时，香精香料待测样品质量合格。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果：本专利技术中采用傅立叶变换离子回旋共振质谱分析香精香料，傅立叶变换离子回旋共振质谱(FT-ICR-MS)采用回旋共振方式来同时记录所有离子信号，无需色谱柱分离，只需适当的对样品稀释后，直接进样分析，前处理简单；稀释的样品直接进样，全部样品进入离子源进行分析，一般采集20张叠加谱图的时间小于40秒；一次可以分离出几千种物质，可以全面有效的表征香精香料的指纹信息，同时本专利技术所采用的傅立叶变换离子回旋共振质谱仪的超高分辨能力，避免了色谱峰的重叠现象，分析香精香料更准确。本专利技术对香精香料的指纹分析和质量差异性分析具有快速、准确的特点，对于香精香料的质量稳定性评价具有重要意义，同时对于降低香精香料的采购风险具有重要作用。【附图说明】图1质荷比在381到388之间的放大谱图；图2质荷比为707.18800、707.19941和707.22851的分离效率；图3香料A的FT-ICRMS质谱表征图；图4香料B的FT-ICRMS质谱表征图；图5香精香料FT-ICRMS指纹图谱相似性比较分析。【具体实施方式】下面结合附图对本专利技术做进一步详细说明。1.试验仪器：傅立叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICRMS)，检测器：ESI源。2.试验试剂及耗材：色谱纯甲醇、超纯水、香精A、香料B(标准样品由华宝食用香精香料(上海)有限公司提供，不同批次样品由陕西中烟工业有限责任公司提供)、10mL移液枪、20μL移液枪、一次性移液枪头、20mL螺纹口玻璃小瓶。3.仪器分析条件流速：2.0μL/min，干燥气：4.0L/min，干燥气温度：150～180℃，采集模式：宽带采集，质量范围：150～3000。4.处理步骤(1)用10mL移液枪移取10mL甲醇于20mL螺纹口玻璃小瓶，再用20μL移液枪移取待测香精香料10μL，摇匀待测样品待分析；待测样品在甲醇中有沉淀物生成时，先用2～2.5mL的纯水溶解后，再加入7.5～8mL的甲醇摇匀待测样品待分析，也就是说，当香精香料能够完全溶于甲醇时，采用甲醇将香精香料待测样品稀释1000倍；当香精香料不能完全溶于甲醇时，采用体积分数75～80％的甲醇水溶液将香精香料待测样品稀释1000倍。(2)用250μL注射器移取150～200μL香精香料待测样品溶液装于质谱仪器上，采用直接进样方式，进行傅立叶变换离子回旋共振质谱分析，采集表征不同香精香料的分子离子或准分子离子指纹信息，得到待测样品指纹谱图。(3)指纹标准谱库建立：将厂家提供的香精香料标准样品按步骤(1)进行稀释，然后按照步骤(2)进行傅立叶变换离子回旋共振质谱分析；对于傅立叶变换离子回旋共振质谱采集的香精香料标准样品谱图，应用DataAnalysis处理谱图，打开标准样品的谱图，在信噪比阈值为4％，相对响应阈值为0.01％，绝对响应阈值为100的条件下，进行特征离子峰的标记，应用谱图编辑功能，将经过峰标记的标准样品谱图添加到谱库，建立香精香料标准样品的傅立叶变换离子回旋共振质本文档来自技高网...

【技术保护点】
香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将香精香料待测样品用溶剂稀释得到待测样品溶液；(2)通过直接进样方式，采用傅立叶变换离子回旋共振质谱分析待测样品溶液，采集表征不同香精香料的分子离子或准分子离子指纹信息，得到待测样品指纹谱图；(3)建立香精香料标准样品的傅立叶变换离子回旋共振质谱标准谱库；(4)根据步骤(2)获得的待测样品指纹谱图和步骤(3)获得的标准谱库，确定共有特征离子峰，根据共有特征离子峰的数量及共有特征离子峰在待测样品指纹谱图中的响应和在标准谱库中的响应，计算香精香料待测样品与香精香料标准样品的相似度匹配得分，根据相似度匹配度得分的高低判断香精香料待测样品质量的稳定性及差异性，完成香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析。

【技术特征摘要】
1.香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将香精香料待测样品用溶剂稀释得到待测样品溶液；(2)通过直接进样方式，采用傅立叶变换离子回旋共振质谱分析待测样品溶液，采集表征不同香精香料的分子离子或准分子离子指纹信息，得到待测样品指纹谱图；(3)建立香精香料标准样品的傅立叶变换离子回旋共振质谱标准谱库；(4)根据步骤(2)获得的待测样品指纹谱图和步骤(3)获得的标准谱库，确定共有特征离子峰，根据共有特征离子峰的数量及共有特征离子峰在待测样品指纹谱图中的响应和在标准谱库中的响应，计算香精香料待测样品与香精香料标准样品的相似度匹配得分，根据相似度匹配度得分的高低判断香精香料待测样品质量的稳定性及差异性，完成香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析。2.根据权利要求1所述的香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法，其特征在于，香精香料为烟用香精香料。3.根据权利要求1所述的香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法，其特征在于，步骤(1)中的溶剂为甲醇或者体积分数为75～80％的甲醇水溶液。4.根据权利要求1所述的香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法，其特征在于，步骤(1)中香精香料待测样品用溶剂稀释1000倍。5.根据权利要求1所述的香精香料傅立叶变换离子回旋共振质谱指纹图谱分析方法，其特征在于，步骤(3)具体包括：将香精香料标准样品按步骤(1)和步骤(2)处理后，获得香精香料标准样品谱图，在信噪比阈值为4％，相对响应...

【专利技术属性】
技术研发人员：樊亚玲，彭军仓，李春，何育萍，付瑜，徐磊，李轩，王瑶，何媛，
申请(专利权)人：陕西中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：陕西,61