神经保护肽制造技术

公开了通过给予具有人红细胞生成素的神经学治疗活性的组合物治疗神经系统疾病的方法被公开。这些组合物包括具有人红细胞生成素全部生物活性或只具有红细胞生成素某些生物活性的治疗剂，例如肽、肽二聚体、多肽和蛋白。也提供其中红细胞生成素以低于刺激血细胞生成所需要的浓度给予的改良治疗方案。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及通过给予具有人红细胞生成素的治疗活性的组合物治疗涉及神经系统的疾病和病症的方法。这些组合物包括具有人红细胞生成素所有生物活性或只具有红细胞生成素某些生物活性的治疗剂，例如肽、肽二聚体、多肽和蛋白。本专利技术还提供了改良的治疗方案，其中所述治疗剂以低于刺激红细胞生成所需要的浓度给予。
技术介绍
红细胞生成素(EPO)是由肾脏对组织缺氧应答而产生的糖蛋白激素，在骨髓中刺激血红细胞的生成。如美国专利号4,703,008中所描述的，红细胞生成素的基因已经被克隆并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中表达。重组人红细胞生成素(rHuEPO或Epoetin α)具有与人尿红细胞生成素相同的氨基酸序列，它们在化学检测、物理检测和免疫检测上无法区分。重组人红细胞生成素通过增加能够分化成为成熟红细胞的细胞数量、触发它们的分化和增加发育中成红细胞的血红蛋白的合成来起作用(Krantz SB.Blood(1991)77419-434，Beckman BS，Mason-Garcia M.The Faseb Journal(1991)52958-2964)。Epoetinα在迄今为止进行的研究中可以被很好的耐受。在用Epoetinα治疗的透析患者中偶尔会有高血压性脑病和癫痫发作的记述，详细地讲是在治疗的早期当血细胞比容升高时(Eschbach JW，EgrieJC，Downing MR，Browne JK，Adamson JW.New Engl J Med(1987)31673-78，Winearls CG，Oliver DO，Pippard MJ等，Lancet(1986)2(8517)1175-1177)。这类报告会因为逐渐获得使用所述化合物的经验而变得更加罕见。偶尔地，Epoetinα治疗的癌症患者会经历一个与血细胞比容明显升高有关的血压升高。然而，所述风险实际上显示出低于慢性肾衰竭患者。在用Epoetinα治疗达到2年的患者中不能够例证和确证抗Epoetinα抗体的效价，这表明缺乏对Epoetinα的免疫敏感性。皮疹和风疹很少被观察到，当有报道时实际上已经是轻微和短暂的，但这些事件暗示了对Epoetinα制剂中某些组分的超过敏性。Epoetinα在许多国家批准上市用于治疗慢性肾衰竭贫血症(透析和透析前)、齐多夫定治疗HTV阳性患者的贫血症(US)、接受基于铂化疗的癌症患者的贫血症，作为自体捐血前的促进剂和在进行整形手术的患者中作为围手术辅助剂以减少要求异源输血的可能性。EPO也许在胚胎发育过程中、以及可能在体外分化实验中影响神经元干细胞(Juul等Pediatr Dev Pathol(1999)2(2)148-158，Juul等Pediatr Res(1998)43(1)40-49)。此外，遭受由于低氧、脑膜炎和心室内出血而导致的CNS损伤的新生儿和婴儿显示出EPO诱导的神经保护作用(Juul等Ped Res(1999)46(5)543-547)。一旦损伤导致低氧，EPO可以帮助防止神经组织的细胞凋亡。这有可能是星形胶质细胞局部产生EPO的结果(Morishita等Neuroscience(1996)76(1)105-116)。神经保护已经在沙土鼠海马组织和大鼠大脑皮质组织中得到例证(Sakanaka等PNAS(1998)95(8)4635-4640，Sadamoto等Biochem Biophys Res Commun(1998)253(1)26-32)。EPO诱导PC12细胞的生物效应，包括Ca2+的变化、跨膜电位的变化和促进神经元存活。这被解释为EPO可以刺激神经功能和存活能力(Koshimura等J.Neurochem(1999)72(6)2565-2572。Tabria等Int JDev Neurosci(1995)13(3/4)241-252)。O′Brien等提出，EPO的一个17个氨基酸肽序列可以通过EPO-R(红细胞生成素受体)在NS20Y、SK-N-MC和PC12细胞中诱发生物活性，包括出芽、分化和神经保护。令人惊奇的是，这种肽并不促进血细胞的增殖，因此它看来在熟知对于EPO活性敏感的细胞系中无活性。(Campana等Int J Mol Med(1998)1(1)235-241和O′Brien等的于12/23/1999授予的美国专利号5,700,909、于11/5/1996授予的美国专利号5,571,787、于2/3/1998授予5,714,459和于12/9/1997授予的美国专利号5,696,080)。EPO可以影响神经元干细胞定型从而促进神经元不向星形胶质细胞或少突胶质细胞分化。这与EPO促进造血干细胞定型产生红细胞(RBC)的类似活性相比拟。在CNS低氧性损伤导致从星形胶质细胞产生EPO促进神经元干细胞分化为神经元、以及同时还对存在的神经元发挥神经保护作用之间明显有关联(WIPO公布号WO99/21966，于5/6/1999公布，Weiss等)。专利技术概述本专利技术涉及通过给予具有人红细胞生成素神经治疗活性的组合物来治疗涉及神经系统的疾病和病症的方法。在第一个实施方案中，本专利技术涉及一种用于治疗患有特征为神经毒性、神经变性或神经损伤的病症的患者的方法，所述方法包括对所述患者给予治疗有效量的肽，该肽含有一个或多个长8到约40个氨基酸并与EPO受体结合的单体肽，每一个单体肽包含一个氨基酸序列X4X5XaXbX6XcXdX7(SEQ ID NO47)，其中Xa是G或A；Xb是P或A；Xc是T或A；Xd选自W、A和F；X4选自R、H、Y、L和W，或者X4不存在；X5选自F、M和I；X6独立选自20种遗传编码的L-氨基酸或立体异构的D-氨基酸；和X7选自D、V、E、I和L。详细地讲，所述序列是X3X4X5GPX6TWX7X8(SEQ ID NO1)，其中X3选自C、E、A、α-氨基-γ-溴丁酸和高半胱氨酸(Hoc)；和X8选自C、K、A、α-氨基-γ-溴丁酸和高半胱氨酸(Hoc)。在第二个实施方案中，本专利技术涉及做为细胞表面受体的激动剂和拮抗剂的肽，以及显现出结合生长因子类受体并且启动生长因子类受体信号的这类肽的二聚体和多聚体。在一个实施方案中，本专利技术提供了做为EPO激动剂的肽。这些肽可以是这类肽的二聚体或多聚体，优选长14至约20个残基，包含一个X3X4X5GPX6TWX7X8(SEQ ID NO1)的核心氨基酸序列，其中每一个氨基酸通过标准单字母缩写来表示；X3可以是C、E、A、α-氨基-γ-溴丁酸或Hoc，其中Hoc是高半胱氨酸；X4可以是R、H、Y、L或W，或者X4不存在；X5可以是M、F或I；X6独立地是20种遗传编码的L-氨基酸或立体异构D-氨基酸中的任何一种；X7可以是D、E、I、L或V；和X8可以是C、K、A、α-氨基-γ-溴丁酸或Hoc，其中Hoc是高半胱氨酸。优选所述二聚体或多聚体的单体肽单位包含一个YX2X3X4X5GPX6TWX7X8(SEQ ID NO2)氨基酸核心序列，其中X2和X6中的每一个独立地是20种遗传编码的L-氨基酸中的任何一种；X3是C；和X8是C。优选所述二聚体的单体肽单位包含一个X1YX2X3X4X5GPX6TWX7X8X9X10X11(SEQ ID本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于治疗患有由神经毒性、神经变性或神经病学损伤介导的病症的患者的方法，所述方法包括对所述患者给予治疗有效量的肽，所述肽包含一个或多个长８到约４０个氨基酸并与ＥＰＯ受体结合的单体肽，每一个单体肽包含一个氨基酸序列Ｘ↓［４］Ｘ↓［５］Ｘ↓［ａ］Ｘ↓［ｂ］Ｘ↓［６］Ｘ↓［ｃ］Ｘ↓［ｄ］Ｘ↓［７］（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７），其中Ｘ↓［ａ］是Ｇ或Ａ；Ｘ↓［ｂ］是Ｐ或Ａ；Ｘ↓［ｃ］是Ｔ或Ａ；Ｘ↓［ｄ］选自Ｗ、Ａ和Ｆ；Ｘ↓［４］选自Ｒ、Ｈ、Ｙ、Ｌ和Ｗ，或者Ｘ↓［４ ］不存在；Ｘ↓［５］选自Ｆ、Ｍ和Ｉ；Ｘ↓［６］独立选自２０种遗传编码的Ｌ－氨基酸或立体异构的Ｄ－氨基酸；和Ｘ↓［７］选自Ｄ、Ｖ、Ｅ、Ｉ和Ｌ。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：V史密斯斯文托斯基，M伦兹，C普拉塔萨拉曼，L乔利菲，F法雷尔，DL约翰森，
申请(专利权)人：奥索麦克尼尔药品公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]