The invention discloses a method for nucleic acid hybridization membrane folate metabolism genotyping, PCR primer and kit, the nucleic acid hybridization membrane comprises a substrate, and a specific fixed on the substrate of the polymorphism detection probe, each of the polymorphism detection probe corresponding to a polymorphism in folate related genes the polymorphic loci, associated gene loci including the following sites in at least one: methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene c.677 locus, c.1298 locus; methionine synthase reductase (MTRR) gene c.56 locus, c.66 locus; methionine synthase (MTR) gene 186 sites, c.2756 sites and +905 sites; cystathionine beta synthase (CBS) gene 551 loci; each of the sequence polymorphism detection probe contains 13 25 bases. The invention has the advantages of high polymorphism, high efficiency, low price, convenient use, etc., and is easy to judge for polymorphism, polymorphism, homozygote, etc..
【技术实现步骤摘要】
用于叶酸代谢基因分型的核酸杂交膜条、PCR引物及试剂盒
本专利技术涉及分子生物学检测,特别涉及一种用于评估叶酸代谢能力的核酸杂交膜条和一种用于扩增待检样品基因片段的聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR)引物;本专利技术还涉及一种用于评估叶酸代谢能力的试剂盒。
技术介绍
叶酸代谢与许多重要的生化过程密切相关,一方面它可以影响核酸的合成,另一方面它参与了DNA、蛋白质的甲基化,此外还直接影响氨基酸的代谢,对细胞分裂、增殖和组织生长具有极其重要的作用。研究表明,叶酸代谢紊乱可影响DNA和氨基酸的合成及甲基化过程,并可导致高同型半胱氨酸血症,与先天性心脏病、神经管畸形等出生缺陷以及反复流产等有密切关系。叶酸代谢紊乱的因素十分复杂,包括饮食中叶酸及甲基供体等缺乏,叶酸代谢相关酶的遗传多态性,酒精和吸烟的影响等等。参与到叶酸代谢途径的酶有多种,包括二甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、甲硫氨酸还原酶(MTR)、甲硫氨酸合成还原酶(MTRR)和胱硫脒β合酶(CBS)等,这些酶的某些核苷酸多态可导致叶酸代谢异常引起疾病或出生缺陷,其中母亲高同型半胱氨酸水平是先天性心脏病的高危因素。MTHFR是叶酸代谢的关键酶,催化5,10-亚甲基四氢叶酸还原为5-甲基四氢叶酸,后者与同型半胱氨酸共同被催化形成蛋氨酸,参与DNA甲基化等生物过程。人类MTHFR基因位于染色体1p36.3,其中有多个与MTHFR活性相关的SNP位点,例如G1965A、A1515C、C894T、以及C677T和A1298C等。MTHFR第677位碱基C>T变异(rs1801 ...
【技术保护点】
一种用于叶酸代谢基因分型的核酸杂交膜条,其特征在于:包括基底,以及在所述基底上固定有特异性的多态检测探针对,每一对多态检测探针包括一条突变探针和一条正常探针,每一对多态检测探针分别对应一个叶酸代谢相关基因多态位点,所述相关基因多态位点包括以下位点中的至少一个:亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因的c.677位点、c.1298位点;甲硫氨酸合成还原酶(MTRR)基因的c.56位点、c.66位点;甲硫氨酸合成酶(MTR)基因的‑186位点、c.2756位点、+905位点;胱硫醚‑β‑合成酶(CBS)基因的‑551位点;每一条所述突变探针和所述正常探针包含13‑25个碱基的序列,在所述序列的中部位置包含其相对应的叶酸代谢相关基因的多态碱基。
【技术特征摘要】
1.一种用于叶酸代谢基因分型的核酸杂交膜条,其特征在于:包括基底,以及在所述基底上固定有特异性的多态检测探针对,每一对多态检测探针包括一条突变探针和一条正常探针,每一对多态检测探针分别对应一个叶酸代谢相关基因多态位点,所述相关基因多态位点包括以下位点中的至少一个:亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因的c.677位点、c.1298位点;甲硫氨酸合成还原酶(MTRR)基因的c.56位点、c.66位点;甲硫氨酸合成酶(MTR)基因的-186位点、c.2756位点、+905位点;胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因的-551位点;每一条所述突变探针和所述正常探针包含13-25个碱基的序列,在所述序列的中部位置包含其相对应的叶酸代谢相关基因的多态碱基。2.根据权利要求1所述的核酸杂交膜条,其特征在于:所述突变探针为SEQIDNO.1,SEQIDNO.3,SEQIDNO.5,SEQIDNO.7,SEQIDNO.9,SEQIDNO.11,SEQIDNO.13,SEQIDNO.15中的至少一个序列或其反向互补序列的DNA;所述正常探针为SEQIDNO.2,SEQIDNO.4,SEQIDNO.6,SEQIDNO.8,SEQIDNO.10,SEQIDNO.12,SEQIDNO.14,SEQIDNO.16中的至少一个序列或其反向互补序列的DNA。3.根据权利要求1所述的核酸杂交膜条,其特征在于:所述多态检测探针的3’或5’端带有氨基标记。4.一种用于扩增待检样品基因片段的PCR引物,其特征在于:所述PCR引物的扩增产物含有权利要求1所述的基因多态位点,所述PCR引物为以下8对中的至少一对:SEQIDNO.17和EQIDNO.18;SEQIDNO.19和SEQIDNO.20;SEQIDNO.21和SEQIDNO.22;SEQ...
【专利技术属性】
技术研发人员:廖生赟,郁俐,蔡车国,冯传欣,邹发林,张静,
申请(专利权)人:深圳市亿立方生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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