低苦味阿胶低聚肽及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种低苦味阿胶低聚肽及其制备方法与应用。其制备方法包括：将阿胶酶解产生的酶解液进行柱层析，收集洗脱液得到所述阿胶低聚肽。所用洗脱剂为乙醇的水溶液；所述乙醇的水溶液的体积百分浓度具体为15‑30％。本发明专利技术采用未添加任何辅料的阿胶块或阿胶汁为酶解原料，显著降低了阿胶低聚肽的苦味，提高了消费者对产品的接受度，对阿胶低聚肽产品的开发具有十分重要的意义。

Low bitter taste donkey hide gelatin oligopeptide and preparation method and application thereof

The invention discloses a low bitter taste donkey hide gelatin oligopeptide, a preparation method and an application thereof. The preparation method comprises the following steps: carrying out column chromatography on the enzymolysis liquid produced by the enzymolysis of the donkey hide gelatin and collecting the eluent to obtain the donkey hide gelatin oligopeptide. The ethanol water solution as eluent; volume concentration of an aqueous solution of ethanol for 15 specific 30%. The invention adopts not add any accessories or juice gelatin gelatin block solution of raw materials for the enzyme, significantly reduced the Ejiao oligopeptide bitterness, improve consumer acceptance of the product, has very important significance to the development of gelatin oligopeptide products.

【技术实现步骤摘要】
低苦味阿胶低聚肽及其制备方法与应用
本专利技术属于食品生物
，涉及一种低苦味阿胶低聚肽及其制备方法与应用。
技术介绍
阿胶作为我国传统滋补类良药，已经有2000多年的生产和食用历史，在我国多部中药名著中均有记载，被誉为“补血圣药”、“滋补国宝”等，与人参、鹿茸一起誉为“中药三宝”。阿胶含有丰富的蛋白质、氨基酸和矿物质，具有明显的补气养血、滋阴润燥、化痰清肺、调经安胎、改善睡眠、强筋壮骨、延缓衰老、美容养颜、增强免疫力、提高耐缺氧、抗疲劳、抗休克、升高白细胞、抑制肿瘤等多重功效。但是阿胶中的胶原蛋白分子量较大(几万到十几万)，对于脾胃虚弱的人群，吸收较难，导致阿胶的功效无法得到充分发挥，通过酶水解技术得到阿胶低聚肽可以大幅提高产品的生物利用度，但是在实际生产过程中发现阿胶低聚肽产品具有较强的苦味，严重影响了消费者对产品的接受度。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种低苦味阿胶低聚肽及其制备方法与应用。本专利技术提供的制备阿胶低聚肽的方法，包括如下步骤：将阿胶酶解产生的酶解液进行柱层析，收集洗脱液得到所述阿胶低聚肽。上述方法的柱层析步骤中，所用洗脱剂为乙醇的水溶液；所述乙醇的水溶液的体积百分浓度具体为15-30％。所用柱层析填料为大孔吸附树脂；所述大孔吸附树脂具体为AB-8型、D101型或DA201-C型大孔吸附树脂；洗脱剂的用量为2-4倍的柱体积。所述柱层析步骤所用柱层析柱可按照各种常规方法在柱层析步骤之前以及在柱层析完成之后对其进行活化。如可按照如下方法进行活化：将柱层析柱用95％乙醇、水、2％HCl、水、2％NaOH、水依次进行洗脱，使色谱柱进行活化，活化后浸泡在95％乙醇中进行保存。所述酶解液为将阿胶利用复合蛋白酶酶解而得，具体为将阿胶用水配置成固形物的质量百分浓度为20-50％的溶液后，再利用复合蛋白酶酶解而得。所述复合蛋白酶选自菠萝蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶中的至少一种。所述复合蛋白酶所用酶不止一种时，所用酶之间的酶量比具体可为等比例；更具体的，所述复合蛋白酶可为由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶组成的复合蛋白酶a或由木瓜蛋白酶与胃蛋白酶组成的复合蛋白酶b；其中，所述复合蛋白酶a和复合蛋白酶b中，各个酶之间的酶量比为等比例，也即：所述复合蛋白酶a中，木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶的酶量比为1:1:1:1；所述复合蛋白酶b中，木瓜蛋白酶与胃蛋白酶的酶量比为1:1；所述酶量均以U计；所述酶解步骤中，温度为30℃-55℃；pH值为5-8；时间为0.5-2h；所述菠萝蛋白酶的酶活为50-120万U/g，具体可为80万U/g；所述中性蛋白酶的酶活为5-20万U/g，具体可为15万U/g；所述胃蛋白酶的酶活为10-50万U/g；所述木瓜蛋白酶的酶活为40-100万U/g；所述阿胶与复合蛋白酶的用量比为1g：2500-5500U。所述方法还包括如下步骤：在所述酶解步骤之后，所述柱层析步骤之前，将所述酶解液灭酶；具体的，所述灭酶步骤中，温度为95-105℃，具体为100℃；时间为3-10min。另外，在所述灭酶步骤之后，所述柱层析步骤之前，还可对灭酶后的酶解液进行过滤，以除去酶解液中的颗粒性杂质。过滤的方式可为各种常用的过滤方法，如可通过板框压滤机进行过滤。所述方法还包括如下步骤：在所述柱层析步骤之后，将所得洗脱液进行浓缩和干燥；具体的，所述浓缩步骤中，浓缩的方式为真空浓缩；温度为75-95℃；浓缩后固形物的质量百分含量不小于65％；所述干燥步骤中，干燥的方式为真空干燥或喷雾干燥；干燥后产品中的水分含量不大于13％。上述方法中，所用阿胶为不含辅料的阿胶胶汁或阿胶块。另外，按照上述方法制备得到的阿胶低聚肽及含有该阿胶低聚肽的产品，也属于本专利技术的保护范围。其中，所述阿胶低聚肽的分子量具体为200-3000Da；所述产品具体为食品或保健品。本专利技术基于普通阿胶中的胶原蛋白分子量较大(几万到十几万)，对于脾胃虚弱的人群，吸收较难，导致阿胶的功效无法得到充分发挥，通过酶水解技术得到阿胶低聚肽可以大幅提高产品的生物利用度，但是又存在产品具有较强的苦味，严重影响了消费者对产品的接受度等问题的基础上，通过大量的多年研究和探索，采用复合酶酶解工艺并结合大孔吸附树脂柱层析分离去除阿胶低聚肽中苦味极强的成分，制得低苦味阿胶低聚肽，从而在提高产品的生物利用度的同时，显著降低了阿胶低聚肽的苦味，提高了消费者对产品的接受度，对阿胶低聚肽产品的开发具有十分重要的意义。本专利技术的优点在于，本专利技术通过应用复合蛋白酶对阿胶进行酶解，并将酶解液进行柱层析后，得到分子量主要分布介于200-3000Da的低苦味阿胶低聚肽，从而在提高产品的生物利用度的同时，显著降低了阿胶低聚肽的苦味，提高了消费者对产品的接受度，对阿胶低聚肽产品的开发具有十分重要的意义。附图说明图1为标准样品分子量与保留时间的关系图。图2为实施例1和2所得低苦味阿胶低聚肽的色谱图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径获得。本专利技术具体实施例中所涉及的实验材料来源：1、阿胶购置东阿阿胶股份有限公司；2、所用中性蛋白酶的酶活为15万U/g；菠萝蛋白酶的酶活为80万U/g，均购自广西南宁庞博生物工程有限公司；木瓜蛋白酶的酶活为100万U/g，胃蛋白酶的酶活为50万U/g，均购自山海柯原实业有限公司。实施例1、(1)将不含辅料的阿胶块溶解后配置成固形物的质量百分浓度为20％，温度30℃，pH控制在5。(2)将包括木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶按照酶量(以U计)等量混合得到复合蛋白酶后，按阿胶与复合蛋白酶的用量比为1g：2500U的比例加入阿胶胶汁中进行水解2h后100℃保持3-10min灭酶，得到阿胶低聚肽酶解液。(3)将阿胶低聚肽酶解液通过板框压滤机进行过滤，除去酶解液中的颗粒性杂质。(4)将过滤后的阿胶低聚肽酶解液应用DA201-C型大孔吸附树脂进行吸附和洗脱，洗脱溶剂为体积百分浓度为15％的乙醇水溶液，洗脱剂用量为2倍柱体积，收集洗脱液即得到低苦味阿胶低聚肽组分。(5)低苦味阿胶低聚肽组分通过真空浓缩装置进行浓缩，所用温度为75℃，浓缩至固形物含量≥65％。(6)浓缩后低苦味阿胶低聚肽组分采用真空干燥设备进行干燥，使产品最终水分含量≤13％，粉碎后得到本专利技术提供的低苦味阿胶低聚肽产品。实施例2、(1)将不含辅料的阿胶胶汁或阿胶块溶解后配置成固形物浓度50％，温度55℃，pH控制在8。(2)将木瓜蛋白酶与胃蛋白酶按照酶量(以U计)等量混合得到复合蛋白酶后，按照阿胶与复合蛋白酶的用量比为1g：5500U，加入阿胶胶汁中进行水解2h后100℃保持10min灭酶，得到阿胶低聚肽酶解液。(3)将阿胶低聚肽酶解液通过板框压滤机进行过滤，除去酶解液中的颗粒性杂质。(4)将过滤后的阿胶低聚肽酶解液应用AB-8型大孔吸附树脂进行吸附和洗脱，洗脱溶剂为体积百分浓度为30％的乙醇水溶液，洗脱剂用量为4倍柱体积，收集洗脱液即得到低苦味阿胶低聚肽组分。(5)低苦味阿胶低聚肽组分通过真空浓缩装置进行浓缩，所用温度为95℃，浓缩至固形物含量≥65本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备阿胶低聚肽的方法，包括如下步骤：将阿胶酶解产生的酶解液进行柱层析，收集洗脱液得到所述阿胶低聚肽。

【技术特征摘要】
1.一种制备阿胶低聚肽的方法，包括如下步骤：将阿胶酶解产生的酶解液进行柱层析，收集洗脱液得到所述阿胶低聚肽。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述柱层析步骤中，所用洗脱剂为乙醇的水溶液；所述乙醇的水溶液的体积百分浓度具体为15-30％；所述柱层析步骤中，所用柱层析填料为大孔吸附树脂；所述大孔吸附树脂具体为AB-8型、D101型或DA201-C型大孔吸附树脂；洗脱剂的用量为2-4倍的柱体积。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述酶解液为将阿胶利用复合蛋白酶酶解而得，具体为将阿胶用水配置成固形物的质量百分浓度为20-50％的溶液后，再利用复合蛋白酶酶解而得。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述复合蛋白酶选自菠萝蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶中的至少一种。5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述复合蛋白酶中，所用酶不止一种时，所用酶之间的酶量比为等比例；所述复合蛋白酶具体为由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶组成的复合蛋白酶a或由木瓜蛋白酶与胃蛋白酶组成的复合蛋白酶b；所述复合蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭兴峰，周祥山，田守生，刘海峰，张建岭，
申请(专利权)人：东阿阿胶股份有限公司，聊城大学，
类型：发明
国别省市：山东,37