具有抗微生物活性的模板固定化肽模拟物制造技术

具有通式（Ⅰ）和（Ⅱ）的模板固定化β－发夹肽模拟物及其盐其中Ｚ、Ｚ↑［１］和Ｚ↑［２］是８－１６个α－氨基酸残基的模板固定化链，根据这些氨基酸残基在链中的位置（从Ｎ－末端氨基酸开始数），它们是Ｇｌｙ或Ｐｒｏ或某些类型，上式中的剩余符号，定义如本说明书和权利要求书中所述，该肽模拟物及其盐具有抑制微生物和癌细胞生长或将其杀死的性能。它们可用作食品、化妆品、药品或其它含营养素的物品的消毒剂，或者作为治疗或预防感染或与这些感染和／或癌症有关的疾病的药物。这此β－发夹肽模拟物可以通过一种基于混合固体－和溶液相协同的方法生产。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供了模板固定化β-发夹肽模拟物，它掺入8-16个α-氨基酸残基或本文后面定义的某些类型的模板固定化链，所述氨基酸残基根据其在链中的位置是Gly或Pro。这些模板固定化β-发夹模拟物具有广谱抗微生物和抗癌活性。此外，本专利技术提供了一种有效的合成方法，如果需要的话，通过该方法可以平行程序文库格式(parallellibrary-format)制备这些化合物。这些β-发夹肽模拟物显示提高的功效、生物利用率、半衰期，另一方面最重要地显示了抗微生物和抗癌活性之间显著提高的比率，以及另一方面溶血红血球。微生物对已有的抗生素的抗性的日益严重的问题已在开发具有新型作用模式的新抗微生物剂方面产生浓厚的兴趣(H.Breithaupt，Nat.Biotechnol.1999，17，1165-1169)。一类新出现的抗生素基于天然存在的阳离子肽(T.Ganz，R.I.Lehrer，Mol.Medicine Today 1999，5，292-297；R.M.Epand、H.J.Vogel，Biochim.Biophys.Acta1999，1462，11-28)。这些包括二硫化物桥接的β-发夹和β-片肽(例如protegrins、tachyplesins和defensins、两亲α-螺旋肽(例如杀菌肽、皮抑菌肽、爪蟾抗菌肽、和布鲁菌素(mellitins))、以及其它线性和环-结构的肽。尽管抗微生物阳离子肽的作用机理还不完全清楚，但是它们相互作用的主要位点是微生物细胞膜(H.W.Huang，Biochemistry 2000，39，8347-8352)。经过与这些试剂接触，细胞膜经受渗透化，接着细胞快速死亡。然而，更复杂的作用机理，例如，包括受体介导的信号，目前还不能排除(M.Wu，E.Maier，R.Benz，R.E.Hancock，Biochemistry 1999，38，7235-7242)。大量这些阳离子肽的抗微生物活性经常与它们优选的次级结构有关，这些次级结构在水溶液或膜状环境中可观察到(N.Sitaram，R.Nagaraj，Biochim.Biophys.Acta1999，1462，29-54)。通过核磁共振(NMR)光谱术的结构研究显示，阳离子肽如protegrin 1(A.Aumelas，M.Mangoni，C.Roumestand，L.Chiche，E.Despaux，G.Grassy，B.Calas，A.Chavanieu，A.Eur.J.Biochem.1996，237，575-583；R.L.Fahrner，T.Dieckmann，S.S.L.Harwig，R.I.Lehrer，D.Eisenberg，J.Feigon，J.Chem.Biol.1996，3，543-550)和tachyplesin I(K.Kawano，T.Yoneya，T.Miyata，K.Yoshikawa，F.Tokunaga，Y.Terada，S.J.Iwanaga，S.J.Biol.Chem.1990，265，15365-15367)充分利用定义的β-发夹构型，这是因为两个二硫化物桥的强制效果。在缺少一个或两个这些二硫键的protegrin类似物中，该β-发夹构型的稳定性降低，并且抗微生物活性降低(J.Chen，T.J.Falla，H.J.Liu，M.A.Hurst，C.A.Fujii，D.A.Mosca，J.R.EmbreeD.J.Loury，P.A.Radel，C.C.Chang，L.Gu，J.C.Fiddes，Biopolymers 2000，55，88-98；S.L.Harwig，A.Waring，H.J.Yang，Y.Cho，L.Tan，R.I.Lehrer，R.J.Eur.J.Biochem.1996，244，352-357；M.E.Mangoni，A.Aumelas，P.Charnet，C.Roumestand，L.Chiche，E.Despaux，G.Grassy，B.Calas，A.Chavanieu，FEBSLett.1996，383，93-98；H.Tamamura，T.Murakami，S.Noriuchi，K.Sugihara，A.Otaka，W.Takada，T.Ibuka，M.Waki，N.Tamamoto，N.Fujii，Chem.Pharm.Bull.1995，43，853-858)。在tachyplesin I的类似物中已进行了类似观察(H.Tamamura，R.Ikoma，M.Niwa，S.Funakoshi，T.Murakami，N.Fujii，Chem.Pharm.Bull.1993，41，978-980)并且在兔防御素NP-2的发夹-环模拟物中也进行了类似观察(S.Thennarasu，R.Nagaraj，Biochem.Biophys.Res.Comm.1999，254，281-283)。这些结果显示了β-发夹结构在抗微生物活性和这些protegrin-样肽的稳定性方面起着重要作用。在阳离子肽优选α-螺旋结构的情况下，螺旋的两亲结构显示在决定抗微生物活性方面起着关键作用(A.Tossi，L.Sandri，A.Giangaspero，A.Biopolymers 2000，55，4-30)。短杆菌肽S是具有定义明确的β-发夹结构的主链-环肽(S.E.Hull，R.Karl sson，P.Main，M.M.Woolfson，E.J.Dodson，Nature 1978，275，206-275)，它显示出对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抗微生物活性(L.H.Kondejewski，S.W.Farmer，D.S.Wi shart，R.E.Hancock，R.S.Hodges，Int.J.Peptide Prot.Res.1996，47，460-466)。然而，这些短杆菌肽S的高度溶血活性阻碍其作为抗生素的广泛用途。最近通过NMR的结构研究显示，高溶血活性显然与该环状β-发夹-状分子的高两亲性能有关，但是可以通过调节该构型和两亲性来分离抗微生物和溶血活性(L.H.Kondejewski，M.Jelokhani-Niaraki，S.W.Farmer，B.Lix，M.Kay，B.D.Sykes，R.E.Hancock，R.S.Hodges，J.Biol.Chem.1999，274，13181-13192；C.McInnesL.H.Kondejewski，R.S.Hodges，B.D.Sykes，J.Biol.Chem.2000，275，14287-14294)。最近报道了一种来自灵长目动物白细胞的新的环状抗微生物肽RTD-1(Y.-Q.Tang，J.Yuan，G._sapay，K._sapay，D.Tran，C.J.Miller，A.J.Oellette，M.E.Selsted，Science 1999，286，498-502)。这种肽含有3个二硫化物桥，它们起到使环肽主链成为发夹几何的作用。这3个二硫键裂解导致抗微生物活性显著丧失。还报道了含有环肽主链以及多个二硫化物桥以具有两亲发夹结构的protegrins(J.P.Tam，C.Wu，J.-L.Yang，Eur.J.本文档来自技高网...

【技术保护点】
下面通式的化合物及其药用中接受的盐　　　　＊＊＊和＊＊＊　　　　其中　　　　＊＊＊　　　　是下式基团之一　　　　＊＊＊　　　　其中　　　　＊＊＊　　　　是Ｂ是式－ＮＲ↑［２０］ＣＨ（Ｒ↑［７１］）－或本文后面定义的基团Ａ１－Ａ６９之一的对映异构体的残基的Ｌ－α－氨基酸的残基；　　　　是以下基团之一　　　　＊＊＊　　　　Ｒ↑［１］是Ｈ；低级烷基或芳基－低级烷基；　　　　Ｒ↑［２］是Ｈ；烷基；链烯基；－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＯＲ↑［５５］；　　　　－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＳＲ↑［５６］；－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＮＲ↑［３３］Ｒ↑［３４］；　　　　－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＯＣＯＮＲ↑［３３］Ｒ↑［７５］；－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＮＲ↑［２０］ＣＯＮＲ↑［３３］Ｒ↑［８２］；　　　　－（ＣＨ↓［２］）↓［ｏ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＣＯＯＲ↑［５７］；－（ＣＨ↓［２］）↓［ｏ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＣＯＮＲ↑［５８］Ｒ↑［５９］；　　　　－（ＣＨ↓［２］）↓［ｏ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＰＯ（ＯＲ↑［６０］）↓［２］；－（ＣＨ↓［２］）↓［ｏ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＳＯ↓［２］Ｒ↑［６２］或　　　　－（ＣＨ↓［２］）↓［ｏ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］Ｃ↓［６］Ｈ↓［４］Ｒ↑［８］；　　　　Ｒ↑［３］是Ｈ；烷基；链烯基；－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＯＲ↑［５５］；　　　　－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＳＲ↑［５６］；－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＮＲ↑［３３］Ｒ↑［３４］；　　　　－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＯＣＯＮＲ↑［３３］Ｒ↑［７５］；－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＮＲ↑［２０］ＣＯＮＲ↑［３３］Ｒ↑［８２］；　　　　－（ＣＨ↓［２］）↓［ｏ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＣＯＯＲ↑［５７］；－（ＣＨ↓［２］）↓［ｏ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＣＯＮＲ↑［５８］Ｒ↑［５９］；　　　　－（ＣＨ↓［２］）↓［ｏ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＰＯ（ＯＲ↑［６０］）↓［２］；－（ＣＨ↓［２］）↓［ｏ］（ＣＨＲ↑［６１］）↓［ｓ］ＳＯ↓...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：D奥伯里克特，JA鲁宾逊，JW维里布罗德，
申请(专利权)人：波利弗尔有限公司，苏黎士大学，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]