微生物感染的治疗制造技术

本发明专利技术涉及新的抗体、药物、药物包装、制备药物的方法和治疗微生物感染的方法，特别是治疗葡萄球菌感染如金黄色葡萄球菌感染的方法，包括ＭＲＳＡ感染。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及人或动物体微生物感染的治疗，如金黄色葡萄球菌，特别是抗生素耐药生物菌株如MRSA。本专利技术提供了治疗微生物如金黄色葡萄球菌感染的药物，制备治疗感染药物的方法，治疗感染的含有药物的药物包装，和治疗由所述微生物所致的感染的人或动物体方法。多药耐药(MDR)在革兰氏阳性细菌中是越来越多的问题(Banergee，S.N.等人.1991，Am.J.Med.91865-895；Shaberg，D.R.等人，1991，Am.J.Med.suppl.，8872-75；Gaynes，R.P.等人，1994，Infect.Dis.Clin.Pract.，6452-455)，特别是在医院内。特别地，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)，特别是耐甲氧西林CNS，由于对所有青霉素类和头孢菌素类耐受，证实是成问题的。对其它药物如喹诺酮类是普遍耐受的(Malabarta，A.等人，1997，Eur.J.Med.Chem.，32459-478；Lewis，K.，1994，TIBS，19119-123；Traub，W.H.等人，1996，Chemotherapy，42118-132)。用万古霉素或替考拉宁治疗通常是有效的。但是，对这些药物的耐受正在不断增加，因此需要新的治疗。例如，Hubert SK等人，(J Clin Microbiol.1999 Nov；37(11)3590-3；PMID10523558)论述了对万古霉素和替考拉宁敏感性下降的金黄色葡萄球菌分离种群。已经发现，某些流行的MRSA菌株包括EMRSA-15(www.phls.org.uk，Public Health Laboratories，Colindale，UK)可以产生对万古霉素耐受性增加的亚克隆(Burnie J等人，Clin Infect Dis.2000 Sep；31(3)684-9；PMID11017816)。曾经希望linezolid能对目前的治疗中提供更需要的选择，但Tsiodras S.等人(Lancet.2001 Jul 21；358(9277)207-8；PMID11476839)报道了在用此抗生素治疗透析相关腹膜炎的患者中临床分离出的一种耐受linezolid的MRSA。此外，为有效治疗感染，特别是对所用的抗生素(类)显示耐受的感染，而给予患者的大剂量这种抗生素，是细胞毒的和肾毒性的，尽管有助于挽救患者的生命，但可以引起严重的副作用。对葡萄球菌感染的治疗和诊断先前在本领域中被广泛地讨论，特别是相关的公开物包括WO98/01154、WO99/50418和EP 0786519。抗生素耐受的原因也在公开物中被讨论，如Allignet J.(Gene 1997 Nov 20；202(1-2)133-8；PMID9427556)。因此，明显的需要对微生物，特别是金黄色葡萄球菌感染的新的和更强的治疗。本专利技术者现在已发现，特殊的联合药剂，即具有新的抗原结合部分的抗体(详述如下)与糖肽抗生素(如万古霉素或替考拉宁)，有非常惊人的协同治疗效果——与单独使用相比，糖肽抗生素的治疗有效性明显地提高了。特别是在被治疗的微生物对糖肽抗生素耐受的情况下。重要地，通过万古霉素与SEQ ID NO2的抗体一起使用，本专利技术能够有效治疗万古霉素完全耐药和万古霉素中度耐药的金黄色葡萄球菌菌株。此前，现有技术中没有提示可能获得此结果。糖肽抗生素通过影响细菌细胞壁发挥作用。其它的抗生素如青霉素类也影响细菌细胞壁。但是，本专利技术者发现，它们的有效性没有通过与SEQ ID NO2的抗体一起使用而改善。特别地，实验显示，与SEQID NO2的抗体一起使用，氟氯青霉素的有效性没有改善。使用SEQ ID NO2的抗体，耐受氟氯青霉素的细菌的耐受性没有下降。按照本专利技术，提供了具有SEQ ID NO2序列的抗体或其抗原结合片段。抗体由SEQ ID NO1的核苷酸序列编码，尽管核苷酸序列当然可以容易地被修饰以，例如，优化用于合成该核苷酸的特定微生物的密码子，或为其它原因所需的密码子。SEQ ID NO2抗体(也称作″Aurograb″RTM)是人的遗传重组体抗体。它与免疫显性细胞表面抗原GrfA结合，后者是葡萄球菌ABC转运子蛋白(WO 99/50418；Burnie JP等人，Infect Immun.2000 Jun；68(6)3200-9；PMID10816464)。最初，它来自金黄色葡萄球菌败血症康复并产生GrfA抗体的患者。它具有内在的抗葡萄球菌活性，并在体外和体内显示与万古霉素和其它糖肽抗生素协同对抗广谱金黄色葡萄球菌菌株，包括MRSA和万古霉素耐药MRSA。SEQ ID NO2抗体的抗菌活性，无论单独还是与糖肽抗生素联合，都显著地有助于金黄色葡萄球菌感染的治疗。人血浆来源的免疫球蛋白(Ramisse F等人，J Infect Dis.1993Oct；168(4)1030-3；PMID8376815)和兔抗GrfA产生的超免疫抗血清，都在葡萄球菌感染模型中有保护作用(见下面的″实验″章节)。对GrfA特异的人重组体抗体在MRSA感染小鼠模型中有保护作用。GrfA的特殊氨基酸序列，即SEQ ID NO3的抗原决定簇，被发现经常地为金黄色葡萄球菌败血症康复患者的体液免疫反应所靶向(Burnie JP等人，2000见上)。但是，现有技术中没有提示采用糖肽抗生素如万古霉素、替考拉宁和达托霉素，与抗GrfA抗体联合应用可有效改善对微生物感染如金黄色葡萄球菌感染的治疗，特别地，没涉及对SEQ ID NO3抗原决定簇特异的抗体，更特别地，没涉及具有SEQ ID NO2序列的抗体。因此，按照本专利技术，提供了含有治疗有效量的糖肽抗生素和特异性抗GrfA的抗体的药物，特别是特异性抗SEQ ID NO3抗原决定簇的抗体。还提供了制备该药物的方法、药物包装和全部包含或使用相同药物的治疗方法。该药物可用于治疗金黄色葡萄球菌感染。如这里所用，术语″治疗″是指设计用来治愈、缓解、去除或减轻这种感染症状的任何治疗，或用来防止或减少其感染的可能性，包括预防。GrfA蛋白，即ABC转运子蛋白，已经从金黄色葡萄球菌中分离和纯化，但在其它生物体中存在具有相同功能的同源物，它们可被用作治疗靶标。因此，可以制备抗非金黄色葡萄球菌微生物产生的GrfA同系物的抗体，并可与糖肽抗生素一起使用以有效治疗患者的微生物感染。治疗可以产生效果的其它微生物实例是其它的葡萄球菌，特别是凝固酶阴性的葡萄球菌，如溶血性葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生性葡萄球菌。也可以治疗肠球菌感染，特别是粪肠球菌和屎肠球菌，如可以治疗棒状杆菌如杰式棒状杆菌和干燥棒状杆菌所致的感染。GrfA同系物与GrfA可具有至少60％的序列同源性，例如至少70、80、85、90、95、96、97、98、99或99.5％的序列同源性。采用NCBIBLASTN(核苷酸序列比较)或BLASTP(多肽比较)程序，2.1.2版，以默认参数可确定GrfA序列同系物。NCBI BLAST程序可见www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/。这里所用的术语序列同一性是指最佳排列序列的氨基酸残基，其在相应的相对位置上正确地匹配。在非金黄色本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有ＳＥＱＩＤＮＯ：２序列的抗体或其抗原结合片段。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：JP伯尼，RC马修斯，
申请(专利权)人：神经技术药物公司，
类型：发明
国别省市：GB[英国]