CRIPTO阻断抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了Ｃｒｉｐｔｏ阻断抗体，或其生物功能片段。本发明专利技术提供了可结合Ｃｒｉｐｔｏ且能调控Ｃｒｉｐｔｏ信号传导的抗体。本发明专利技术提供了可结合Ｃｒｉｐｔｏ且能阻断Ｃｒｉｐｔｏ和ＡＬＫ４间相互作用的抗体。本发明专利技术提供了可结合Ｃｒｉｐｔｏ且能调控肿瘤生长的抗体。本发明专利技术提供了可结合Ｃｒｉｐｔｏ，调控信号传导，且能调控肿瘤生长的抗体。本发明专利技术提供了可结合Ｃｒｉｐｔｏ，阻断Ｃｒｉｐｔｏ和ＡＬＫ４间相互作用，且能调控肿瘤生长的抗体。本发明专利技术还提供了使用这些抗体进行治疗、诊断和研究的方法。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术广义上涉及遗传学、细胞及分子生物学领域。更具体地说，本专利技术涉及能结合和调控Cripto信号传导的抗体，含有该抗体的试剂盒以及该抗体的使用方法。
技术介绍
Cripto是在对人胚癌文库进行cDNA筛选时偶然分离到的一种188氨基酸残基的细胞表面蛋白质(Ciccodicola等，1989，EMBO J.，vol.8，no.7，pp.1987-1991)。Cripto蛋白具有至少两个明显的结构域一个富含半胱氨酸的结构域和一个最初被认为与表皮生长因子(EGF)家族中发现的结构域近似的结构域。Cripto最初被归类为EGF家族的一个成员(Ciccodicola等，上述)；但是，随后的分析表明Cripto不能与任一已知的EGF受体结合，其EGF-样结构域实际上是从EGF家族分化而来(Bianco等，1999，J.Biol.Chem.，2748624-8629)。尽管进行了持续的研究，Cripto信号传导途径仍然让人琢磨不透，出现了支持下列几种不同激活途径的文献，包括MAP激酶途径(DeSantis等，1997，Cell Growth Differ.，81257-1266；Kannan等，1997，J.Biol.Chem.，2723330-3335)、TGF-β途径(Gritsman等，1999，Development，127921-932；Schier等，2000，Nature，403385-389)、与Wnt途径间可能的相互作用(Salomon等，Endocr Relat Cancer.2000 Dec；7(4)199-226；以及与EGF途径的信息交换(Bianco等，1999，J.Biol.Chem.，2748624-8629)。美国专利5,256,643及与其相关的两个分案申请(美国专利5,654,140和5,792,616)公开了人Cripto基因、Cripto蛋白及抗Cripto抗体。美国专利5,264,557及与其相关的三个分案申请(美国专利5,620,866，5,650,285,和5,854,399)公开了人Cripto-相关基因及蛋白。另外还公开了能结合Cripto-相关蛋白但不能通过与Cripto蛋白本身结合而发生交叉反应的抗体。用抗cripto短肽的兔多克隆抗体进行免疫染色表明Cripto蛋白的过表达与多种肿瘤类型(包括但不限于乳腺、睾丸、结肠、肺、卵巢、膀胱、子宫、子宫颈、胰腺以及胃)相关。Panico等1996，Int.J.Cancer，6551-56；Byme等，1998，J Pathology，185108-111；DeAngelis等，1999，Int J Oncology，14437-440。因此，本领域需要有办法来控制、限制和/或阻止这类过表达，调控Cripto信号传导，以及调控Cripto的表达结果(即，促进和/或保持细胞转化)。专利技术概述本专利技术提供了能特异性结合Cripto的新的抗体，以及制备和使用该抗体的方法。本专利技术还提供了能结合Cripto并能调控Cripto信号传导或蛋白相互作用的抗体，例如，结合Cripto从而使与Cripto相互作用的蛋白质产生的信号被下调的抗体。本专利技术还提供了能结合Cripto并能阻断Cripto和ALK4间相互作用的抗体。本专利技术还提供了能结合Cripto并能调控肿瘤生长的抗体。本专利技术还提供了能结合Cripto、调控Cripto信号传导以及调控肿瘤生长的抗体。本专利技术还提供了能结合Cripto、阻断Cripto和ALK4间相互作用以及调控肿瘤生长的抗体。本专利技术的一个方面，本专利技术所述抗体能特异性地结合选自与下列抗体结合的表位的表位A6C12.11，A6F8.6(ATCC保藏号PTA-3318)，A7H1.19，A8F1.30，A8G3.5(ATCC保藏号PTA-3317)，A8H3.1(ATCC保藏号PTA-3315)，A8H3.2，A19A10.30，A10B2.18(ATCC保藏号PTA-3311)，A27F6.1(ATCC保藏号PTA-3310)，A40G12.8(ATCC保藏号PTA-3316)，A2D3.23，A7A10.29，A9G9.9，A15C12.10，A15E4.14，A17A2.16，A17C12.28，A17G12.1(ATCC保藏号PTA-3314)，A17H6.1，A18B3.11(ATCC保藏号PTA-3312)，A19E2.7，B3F6.17(ATCC保藏号PTA-3319)，B6G7.10(ATCC保藏号PTA-3313)，B11H8.4。本专利技术的另一方面，本专利技术所述的抗体特异性地结合Cripto配体/受体结合结构域中的表位。Cripto可选自CR-1(SEQ ID NO1)或CR-3(SEQID NO2)。在一个更具体的实施方案中，与配体/受体结合结构域中表位特异性结合的抗体包括例如A6C12.11，A6F8.6(ATCC保藏号PTA-3318)，A8G3.5(ATCC保藏号PTA-3317)，A19A10.30，A8H3.1(ATCC保藏号PTA-3315)，A27F6.1(ATCC保藏号PTA-3310)，A40G12.8(ATCC保藏号PTA-3316)，A17G12.1(ATCC保藏号PTA-3314)，A18B3.11(ATCC保藏号PTA-3312)和B6G7.10(ATCC保藏号PTA-3313)。一个实施方案中，本专利技术所述抗体结合的表位在EGF-样结构域中。特异性结合EGF-样结构域中表位的抗体包括但不限于A40G12.8(ATCC保藏号PTA-3316)，A8H3.1(ATCC保藏号PTA-3315)，A27F6.1(ATCC保藏号PTA-3310)，B6G7.10(ATCC保藏号PTA-3313)，A17G12.1(ATCC保藏号PTA-3314)和A18B3.11(ATCC保藏号PTA-3312). 另一个实施方案中，本专利技术所述抗体特异性结合的表位在富含cys的结构域中。特异性结合富含cys的结构域中表位的抗体包括包括但不限于A19A10.30，A8G3.5(ATCC保藏号PTA-3317)，A6F8.6(ATCC保藏号PTA-3318)和A6C12.11。另一实施方案中，本专利技术所述抗体结合的表位位于跨越Cripto第46-62位氨基酸残基的结构域内。特异性结合跨越Cripto第46-62位氨基酸残基的结构域内表位的抗体包括但不限于A10B2.18(ATCC保藏号PTA-3311)，B3F6.17(ATCC保藏号PTA-3319)和A17A2.16。本专利技术还涉及特异性结合Cripto且能调控Cripto信号传导的抗体。特异性结合Cripto且能调控Cripto信号传导的抗体，包括但不限于，A40G12.8(ATCC保藏号PTA-3316)，A8H3.1(ATCC保藏号PTA-3315)，A27F6.1(ATCC保藏号PTA-3310)，和A6C12.11。一个实施方案中，特异性结合Cripto且能调控Cripto信号传导的本专利技术所述抗体能够结合Cripto的EGF-样结构域或富含cys的结构域中的表位。本专利技术还涉及特异性结合Cripto且能阻断Cripto和ALK4本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异性结合Ｃｒｉｐｔｏ配体／受体结合结构域中的表位的抗体。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：米歇尔萨尼科拉内德尔，凯文威廉斯，苏珊希弗，保罗雷霍恩，
申请(专利权)人：比奥根艾迪克MA公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]