可有效对抗C型肝炎病毒的巨环肽制造技术

本发明专利技术包括在体外和细胞测定中对抗Ｃ型肝炎病毒的ＮＳ３蛋白酶的式Ⅰ化合物。式中Ｗ为ＣＨ或Ｎ；Ｒ↑［２１］为Ｈ、卤素、Ｃ↓［１－６］（卤）烷基、Ｃ↓［３－６］环烷（氧）基、Ｃ↓［１－６］烷氧基、羟基或Ｎ（Ｒ↑［２３］）↓［２］；Ｒ↑［２２］为Ｈ、卤素、Ｃ↓［１－６］（卤）（硫）烷基、Ｃ↓［３－６］环烷（氧）基、Ｃ↓［１－６］烷氧基、Ｃ↓［２－７］烷氧烷基、Ｃ↓［６或１０］芳基或Ｈｅｔ；以Ｒ↑［２４］取代环烷基、芳基或Ｈｅｔ；Ｒ↑［３］为羟基、ＮＨ↓［２］或－ＮＨ－Ｒ↑［３１］；Ｄ为５至１０元任选饱和的亚烷基，任选有１至３个选自Ｏ、Ｓ或Ｎ－Ｒ↑［４１］的杂原子；Ｒ↑［４］为Ｈ或在Ｄ中碳上的一至三个取代基，选自Ｃ↓［１－６］（卤）（硫）烷基、Ｃ↓［１－６］烷氧基、羟基、卤素、氨基、桥氧或硫代，Ａ为－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－Ｒ↑［５］或羧酸；Ｒ↑［２３］、Ｒ↑［２４］、Ｒ↑［３１］、Ｒ↑［４１］、Ｒ↑［５］、Ｈｅｔ如说明书所定义，或其药用盐或酯。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是关于治疗C型肝炎病毒(HCV)感染的化合物、组合物、这类化合物的制剂，以及方法。特别是，本专利技术提供新颖的肽类似物、含有这类类似物的药物组合物，以及使用这些类似物治疗HCV感染的方法。
技术介绍
C型肝炎病毒(HCV)是遍及全世界的输血后和社会-后天性非-A非-B型肝炎的主要病原。估计全世界超过1亿7千万的人被该病毒感染。高百分比的带源者变成慢性感染，且有许多进展至慢性肝病，所谓的慢性C型肝炎。这群转而成为一严重肝病的高危险群，如肝硬变、肝细胞癌，及导致死亡的最终的肝病。尚未彻底阐明HCV形成病毒持久性并引起高比率的慢性肝病的机制。不知道HCV如何与宿主的免疫系统相互作用并回避它。此外，也未建立细胞和体液的免疫反应在对抗HCV感染和疾病的保护作用中所起的作用。已有报导预防与输血有关的病毒性肝炎的免疫球蛋白，然而，疾病控制中心(Center for Disease Control)目前并不建议适合该目的的免疫球蛋白治疗。缺乏有效的保护性免疫反应，阻碍了疫苗或适当的接触后的预防措施的发展，所以在短期内，希望坚定地寄托在抗病毒的干涉上。为了确认能够在患有慢性C型肝炎的患者中，有效地治疗HCV感染的药学制剂，已经进行了各种临床的研究。这些研究涉及单独和与其他的抗病毒制剂混合使用的干扰素-α。这类研究表明，相当多的参与者对该治疗没有反应，且产生有利反应的那些，发现大部分在终止治疗后有复发。直到数年前，干扰素(IFN)是唯一证实有利并核准在临床上用于慢性C型肝炎患者的有用治疗。然而，持续的反应率低，且干扰素治疗也引起严重的副作用(也就是视网膜病变、甲状腺炎、急性胰腺炎、抑郁)，减少受治疗的患者的生活品质。最初对于对单独干扰素无反应的患者，核准干扰素与三唑核苷(ribavirin)的组合。目前已经核准供先天患者使用，且目前被选定在HCV治疗中的黄金标准。然而，使用该组合治疗并未减轻由IFN引起的副作用。因此，需要发展可用来治疗HCV感染，并克服现有药物治疗的限制的有效的抗病毒制剂。HCV是在黄热病毒科中有被膜的正股RNA病毒。单股的HCV RNA基因的长度约为9500个核苷酸，并具有单一的可读框(ORF)，编码一个约3000个氨基酸的单独的大的多蛋白。在被感染的细胞中，该多蛋白在多处被细胞和病毒的蛋白酶切开，产生结构和非-结构(NS)的蛋白质。在HCV的情况中，通过两个病毒的蛋白酶完成成熟非结构蛋白质(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)的产生。第一个，到现在为止尚未完全地表征，在NS2-NS3接合处切开；第二个包含在NS3的N-终端区内的丝氨酸蛋白酶(下面称为NS3蛋白酶)，并以顺式，在NS3-NS4A切割位置，和反式，剩下的NS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B位置，调节NS3下游所有后续的切开作用。NS4A蛋白质似乎担任多种功能，作为NS3蛋白酶的辅因子，并可能有助于NS3和其他病毒复制酶(replicase)成份在膜上定位。NS3蛋白质与NS4A的复合物形成，似乎对于使事件进行是必要的，在所有的位置上促进了蛋白水解的效力。NS3蛋白质也显示出核苷三磷酸酶和RNA解旋酶的活性。NS5B是RNA-依赖性RNA聚合酶，它涉及HCV的复制。专利申请案WO 97/06804描述核苷类似物胞嘧啶-1，3-噁噻烷(oxathiolane)(亦称为3TC)的(-)对映体，具有对抗HCV的活性。虽然在先前对抗HIV和HBV的临床试验中报导该化合物是安全的，但在临床上尚未证实对HCV具有活性，且尚未报导其对抗病毒的作用机制。发展抗病毒制剂的一般策略为使复制病毒所必需的病毒编码的酶失活。在这种性情下，极为努力地发现抑制HCV的NS3蛋白酶或RNA解旋酶的化合物，导致下列的发现美国专利5,633,388描述了具有对抗HCV的活性的杂环-取代的羧酰胺和类似物。这些化合物针对病毒的NS3蛋白质的解旋酶活性，但尚未报导临床测试。已经由Chu等人(Tet.Lett.，(1996)，7229-7232)报导了菲醌具有在体外对抗HCV NS3蛋白酶的活性。但并未报导该化合物的进一步的发展。在第九次抗病毒研究的国际会议(Ninth International Conference on AntiviralResearch)，Urabandai，Fukyshima，日本(1996)(Antiviral Research，(1996)，30，1，A23(摘要19))中提供的论文，报导噻唑烷衍生物是HCV蛋白酶的抑制剂。几个研究已经报导了抑制其他丝氨酸蛋白酶的化合物，如人类白血球弹性蛋白酶。在WO 95/33764(Hoechst Marion Roussel，1995)中报导了一组这些化合物。在该申请案中公开的肽为吗啉基羰基-苯甲酰基-肽类似物，其在结构上与本专利技术的肽不同。得自Vertex Pharmaceuticals Inc.的WO 98/17679公开了丝氨酸蛋白酶的抑制剂，特别是对C型肝炎病毒NS3蛋白酶的抑制剂。Hoffman LaRoche(WO 98/22496；美国专利5,866,684和美国专利6,018,020)亦已经报导了六肽，它可用于作为治疗HCV感染的抗病毒剂的蛋白酶抑制剂。Steinkuhler等人和Ingallinella等人已经发表了对NS4A-4B产物的抑制作用(Biochemistry(1998)，37，8899-8905和8906-8914)。Schering Corporation的WO 97/43310揭示了具有对抗HCVNS3蛋白酶的活性的20和21个氨基酸的肽序列。Emory University的WO 98/46597揭示了在体外具有对抗丝氨酸蛋白酶的活性的肽和肽类似物。Peptide Therapeutics Limited的WO 98/46630揭示缩肽(depsipeptide)基质抑制了HCV NS3蛋白酶。最后，美国专利5,869,253揭示抑制HCV NS3蛋白酶的酶促PNA分子。上述的现有专利申请案中，没有任何一个提出环肽具有对抗C型肝炎病毒NS3蛋白酶的活性和选择性。WO 99/07733、WO 99/07734、WO 00/09543和WO 00/09558揭示抑制NS3蛋白酶的六至四-肽和三肽类似物。然而，这些公开内容并未提出或引导设计出本专利技术的巨环类似物。Institute de Richerche di Biologia Moleculare(IRBM)在1999年8月5日发表的WO 99/38888，揭示HCV NS3蛋白酶的小肽抑制剂。在该公开内容中并没有提出或指出本专利技术的肽的环状性质。此外，该PCT申请案在本专利技术的优先日期之后发表。IRBM的WO 99/64442也在本专利技术的优先日期之后发表，揭示在PI处带有酮酸的低聚肽。Vertex Pharmaceuticals(在1999年10月7日发表)的WO 99/50230，也在本专利技术的优先日期之后发表。甚至以后，该出版物并未轻微地暗示本专利技术的任何环肽。本专利技术的一个优点为其提供的巨环肽，可抑制C型肝炎病毒的NS3蛋白酶。本专利技术的一个观点的另一个优点，在于这些肽本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有以下式（Ａ）的化合物：＊＊＊（Ａ）其中，Ｘ是ＰＧ或Ｒ↑［２］；ＰＧ为保护基，或者吡咯烷酮上的ＰＧ为Ｈ，Ｒ↑［２］为＊＊＊；Ｗ为ＣＨ或Ｎ；Ｒ↑［２１］为Ｈ、卤素、Ｃ↓［１－６］烷 基、Ｃ↓［３－６］环烷基、Ｃ↓［１－６］卤代烷基、Ｃ↓［１－６］烷氧基、Ｃ↓［３－６］环烷氧基、羟基或Ｎ（Ｒ↑［２３］）↓［２］，其中每个Ｒ↑［２３］分别为Ｈ、Ｃ↓［１－６］烷基或Ｃ↓［３－６］环烷基；Ｒ↑［２２］为Ｈ、卤素、Ｃ↓［ １－６］烷基、Ｃ↓［３－６］环烷基、Ｃ↓［１－６］卤烷基、Ｃ↓［１－６］硫烷基、Ｃ↓［１－６］烷氧基、Ｃ↓［３－６］环烷氧基、Ｃ↓［２－７］烷氧烷基、Ｃ↓［３－６］环烷基、Ｃ↓［６或１０］芳基或Ｈｅｔ，其中Ｈｅｔ为五－、六－或七－员的饱和或不饱和的杂环，含有一至四个选自氮、氧和硫的杂原子；所述环烷基、芳基或Ｈｅｔ被Ｒ↑［２４］取代，其中Ｒ↑［２４］为Ｈ、卤素、Ｃ↓［１－６］烷基、Ｃ↓［３－６］环烷基、Ｃ↓［１－６］烷氧基、Ｃ↓［３－６］环烷氧基、ＮＯ↓［２］、Ｎ（Ｒ↑［２５］）↓［２］、ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ↑［２５］；或ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－Ｒ↑［２５］，其中每个Ｒ↑［２５］分别为Ｈ、Ｃ↓［１－６］烷基或Ｃ↓［３－６］环烷基；或Ｒ↑［２４］为ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ↑［２６］，其中Ｒ↑［２６］为Ｃ↓［１－６］烷基或Ｃ↓［３－６］环烷基；Ａ′是保护的羧酸；ｎ是２。...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：尤拉S桑特里佐斯，戴尔R卡梅伦，安妮玛丽福彻，埃莉斯吉罗，纳撒利古德鲁，特迪哈尔莫斯，蒙西利纳斯布鲁内特，
申请(专利权)人：贝林格尔英格海姆加拿大有限公司，
类型：发明
国别省市：CA[加拿大]