HSDL1在诊治骨肉瘤中的应用制造技术

本发明专利技术公开了HSDL1在诊治骨肉瘤中的应用，具体为HSDL1基因及其表达产物在制备骨肉瘤的诊治工具中的应用。本发明专利技术利用高通量测序和RT‑PCR实验证明HSDL1基因在癌旁组织中的表达与肿瘤组织中的表达存在差异，HSDL1基因在肿瘤组织中的表达明显降低。因此HSDL1基因可以作为诊断骨肉瘤的分子标志物。进一步，进行了扩大样本检测发现HSDL1与骨肉瘤具有很好的相关性，可用于制备骨肉瘤辅助诊疗制剂。可以通过构建基因的过表达载体达到促进基因表达的目的，进而达到治疗癌症的目的。

【技术实现步骤摘要】
HSDL1在诊治骨肉瘤中的应用
本专利技术涉及生物医药
，尤其涉及骨肉瘤早期诊断及治疗的
，具体地涉及HSDL1在诊治骨肉瘤中的应用。
技术介绍
骨肉瘤(是一种最常见的恶性骨原发性肿瘤(除装细胞瘤以外)，起源于间叶组织，主要特征以能产生骨样组织的梭形基质细胞为主。在临床发病特征上，骨肉瘤往往好发于青少年，起病时隐匿，症状不典型，恶性程度极高，在疾病发现早期往往已发生远处转移，其中肺脏转移率高达，因此，骨肉瘤的危害性大且死亡率很高严重影响着青少年患者的健康和生命。尽管自上世纪年代化疗的出现，对恶性骨肉瘤的治疗起到了重要的作用，但其转移及复发率的控制还令人不甚满意。因此需要在早期通过一定的手段来诊断出骨肉瘤，而目前分子标记物在早期诊断肿瘤方面有非常重要的意义，如果能找出一个或者多个诊断骨肉瘤的分子标志物，并利用分子标志物的情况治疗骨肉瘤，可以最大程度的提高骨肉瘤的诊出率及存活率。另外随着高通量技术的发展，发现分子标志物与疾病的相关性变得可行。通过对癌旁组织与骨肉瘤肿瘤组织的基因或蛋白的表达差异的比对，可以找到骨肉瘤与相关基因或蛋白因子异常表达的关系，进而通过检查相关基因或蛋白的表达情况，可以为实现对骨肉瘤的早期诊断提供可能或者提供借鉴。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种可用于骨肉瘤诊治的分子标志物。使用基因标志物来诊断骨肉瘤的具有及时性、特异性和灵敏性，从而使患者在患病早期就能知晓患病风险，并针对风险高低，采取相应的预防和治疗措施，并通过基因标志物的表达调节达到治疗骨肉瘤的目的。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测HSDL1基因表达的产品在制备诊断骨肉瘤的工具中的应用。进一步，所述检测HSDL1基因表达的产品包括检测HSDL1基因mRNA水平的产品、和/或检测HSDL1蛋白水平的产品。进一步，所述检测HSDL1基因表达的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测HSDL1基因表达以诊断骨肉瘤的产品。进一步，所述用RT-PCR诊断骨肉瘤的产品至少包括一对特异扩增HSDL1基因的引物；所述用实时定量PCR诊断骨肉瘤的产品至少包括一对特异扩增HSDL1基因的引物；所述用免疫检测诊断骨肉瘤的产品包括：与HSDL1蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断骨肉瘤的产品包括：与HSDL1基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断骨肉瘤的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与HSDL1蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与HSDL1基因的核酸序列杂交的探针。所述用实时定量PCR诊断骨肉瘤的产品至少包括的一对特异扩增HSDL1基因的引物如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。所述检测HSDL1基因表达的产品可以是检测HSDL1基因表达的试剂、也可以是包含所述试剂的试剂盒、芯片、试纸等，也可以是使用所述试剂的高通量测序平台。所述诊断骨肉瘤的工具包括但不限于芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台；高通量测序平台是一种特殊的诊断骨肉瘤的工具，随着高通量测序技术的发展，对一个人的基因表达谱的构建将成为十分便捷的工作。通过对比疾病患者和正常人群的基因表达谱，容易分析出哪个基因的异常与疾病相关。因此，在高通量测序中获知HSDL1基因的异常与骨肉瘤相关也属于HSDL1基因的用途，同样在本专利技术的保护范围之内。本专利技术还提供了一种诊断骨肉瘤的工具，所述工具包括检测HSDL1基因表达的试剂；所述试剂包括检测HSDL1基因mRNA的引物和/或探针、检测HSDL1蛋白的抗体。所述工具包括但不限于芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测HSDL1基因转录水平的针对HSDL1基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的HSDL1蛋白的特异性抗体；所述基因芯片可用于检测包括HSDL1基因在内的多个基因(例如，与骨肉瘤相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括HSDL1蛋白在内的多个蛋白质(例如与骨肉瘤相关的多个蛋白质)的表达水平。通过将多个与骨肉瘤的标志物同时检测，可大大提高骨肉瘤诊断的准确率。其中，所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测HSDL1基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括HSDL1蛋白的特异性抗体。进一步，所述试剂包括使用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片方法检测HSDL1基因表达水平过程中所需的试剂。优选地，所述试剂包括针对HSDL1基因的引物和/或探针。根据HSDL1基因的核苷酸序列信息容易设计出可以用于检测HSDL1基因表达水平的引物和探针。所述试纸包括检测HSDL1基因表达的试剂。所述高通量测序平台包括检测HSDL1基因表达的试剂。与HSDL1基因的核酸序列杂交的探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述探针的长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最长一般不超过30个碱基对，与目的核苷酸序列互补的长度以15-25个碱基对最佳。所述探针自身互补序列最好少于4个碱基对，以免影响杂交效率。进一步，所述HSDL1蛋白的特异性抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体。所述HSDL1蛋白的特异性抗体包括完整的抗体分子、抗体的任何片段或修饰(例如，，嵌合抗体、scFv、Fab、F(ab’)2、Fv等。只要所述片段能够保留与HSDL1蛋白的结合能力即可。用于蛋白质水平的抗体的制备时本领域技术人员公知的，并且本专利技术可以使用任何方法来制备所述抗体。在本专利技术的具体实施方案中，所述检测HSDL1基因mRNA的引物包括SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示的引物对。在本专利技术的上下文中，“HSDL1基因”包括HSDL1基因以及HSDL1基因的任何功能等同物的多核苷酸。HSDL1基因包括与目前国际公共核酸序列数据库GeneBank中HSDL1基因(NC_000001.11)DNA序列具有70％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列；优选地，HSDL1基因的编码序列包括以下任一一种DNA分子：(1)序列表中SEQIDNO.1所示的DNA序列；(2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码相同功能蛋白质的DNA序列；(3)与(1)或(2)限定的DNA序列具有70％、优选地，90％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA分子。在本专利技术的具体实施方案中，所述HSDL1基因的编码序列是SEQIDNO.1所示的DNA序列。在本专利技术的上下文中，HSDL1基因表达产物包括HSDL1蛋白以及HSDL1蛋白的部分肽。所述HSDL1蛋白的部分肽含有与骨肉瘤相关的功能域。“HSDL1蛋白”包括HSDL1蛋白以及HSDL1蛋白的任何功能等同物。所述功能等同物包括HS本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测HSDL1基因表达的产品在制备诊断骨肉瘤的工具中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测HSDL1基因表达的产品在制备诊断骨肉瘤的工具中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测HSDL1基因表达以诊断骨肉瘤的产品；所述用RT-PCR诊断骨肉瘤的产品至少包括一对特异扩增HSDL1基因的引物；所述用实时定量PCR诊断骨肉瘤的产品至少包括一对特异扩增HSDL1基因的引物；所述用免疫检测诊断骨肉瘤的产品包括：与HSDL1蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断骨肉瘤的产品包括：与HSDL1基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断骨肉瘤的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与HSDL1蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与HSDL1基因的核酸序列杂交的探针。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述用实时定量PCR诊断骨肉瘤的产品至少包括的一对特异扩增HSDL1基因的引物如S...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙耀兰，任静，边洋，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11