一种适于桑黄液体发酵生产用培养基制造技术

本发明专利技术特别涉及一种适于桑黄液体发酵生产用培养基。其特殊之处在于：由以下重量的原料制成：麦麸6‑8%，玉米粉2‑4%，蛋白胨1‑3%，MgSO

【技术实现步骤摘要】
一种适于桑黄液体发酵生产用培养基（一）
本专利技术涉及桑黄，特别涉及一种适于桑黄液体发酵生产用培养基。（二）
技术介绍
药用真菌桑黄具有抗癌、抗氧化、增强免疫调节、抗炎、降血脂和抗病毒等作用，在传统中药中，其被用于治疗伤口、腹痛和淋病。最近的研究强调了其抗癌和肝脏保护功能。其含有三萜、黄酮、多糖等活性成分。当前，桑黄产品大部分依赖于桑黄子实体，桑黄子实体生长对环境的依赖性很高，生长周期长，产量不稳定。利用液体培养可以较容易地对各种生长影响因素进行控制和优化，获得稳定高产。有研究报道：利用液体培养基（土豆/葡萄糖肉汤24%，麦芽提取物10%，蛋白胨1%）获得的菌丝体产量为1.42g/100mL，这种培养基缺乏矿物质元素，不利于菌丝体的生长。另有研究指出使用液体培养基（玉米粉50g/L，麦麸50g/L，KH2PO42g/L，MgSO41g/L，维生素B1300µg/L和维生素B2400µg/L）获得菌丝体产量为0.356g/100mL，这个配方含氮量较低，不利于菌丝体的生长，另外，维生素的使用会增加其生产成本。对桑黄的液体培养，目前技术显示，普遍产量较低，或者原料成本较高。为了获得稳定的液体发酵高产，同时降低成本，本专利进行了桑黄液体发酵培养基的优化。本研究旨在利用成本较低的农产品下脚料和矿物质成分，对它们进行适宜的配比，利用合适的方法进行煮制，来获得桑黄液体培养产物（菌丝体及活性物质）的高产。本研究结果会对桑黄的扩大生产及工业化生产具有一定的指导意义。（三）
技术实现思路
本专利技术为了弥补现有技术的不足，提供了一种适于桑黄液体发酵生产用培养基，原料易得，产量高。本专利技术是通过如下技术方案实现的：一种适于桑黄液体发酵生产用培养基，其特殊之处在于：由以下重量的原料制成：麦麸6-8%，玉米粉2-4%，蛋白胨1-3%，MgSO4·7H2O0.05-0.15%，KH2PO40.10-0.15%，K2HPO4·3H2O0.02-0.04%，其余为水。所述的适于桑黄液体发酵生产用培养基，由以下重量的原料制成：麦麸7%，玉米粉3%，蛋白胨2%，MgSO4·7H2O0.1%，KH2PO40.12%，K2HPO4·3H2O0.03%，其余为水。其中，麦麸放入足量的水中，煮沸45-55min，四层纱布过滤，向滤液中依次加入玉米粉、蛋白胨、MgSO4·7H2O、KH2PO4和K2HPO4·3H2O，调pH值为6，配制培养基。培养第10天，菌浓达到最大，为30%，菌丝体产量最高，为4.6217g/100mL（46.217mg/mL）。远远高于KimDH等的菌丝体产量1.42g/100mL和李翠翠等的菌丝体产量0.356g/100mL。培养第10天，胞外黄酮产量达到最大，为16.198mg/mL。培养第5天，胞外三萜类化合物产量达到最大，为5.736mg/mL。本专利技术的有益效果是：本专利技术原料选取方便，成本低，利用研究所得配方可以获得桑黄菌丝体及胞外活性物质的高产，菌丝体产量达到4.6217g/100mL（46.217mg/mL）。远远高于KimDH等的菌丝体产量1.42g/100mL和李翠翠等的菌丝体产量0.356g/100mL。胞外黄酮产量达到16.198mg/mL。胞外三萜类化合物产量达到5.736mg/mL。菌丝体产量达到4.6217g/100mL（46.217mg/mL）。（四）具体实施方式实施例11.配制培养基：按照配方组成（麦麸7%，玉米粉3%，蛋白胨2%，MgSO4·7H2O0.1%，KH2PO40.12%，K2HPO4·3H2O0.03%）2.配制方法（麦麸放入足量的水中，煮沸50min，四层纱布过滤，向滤液中依次加入玉米粉、蛋白胨、MgSO4·7H2O、KH2PO4和K2HPO4·3H2O，调pH值为6）配制6L培养基。3.装罐：将培养基装入10L的发酵罐（生产厂家：扬州新亚；容积：10L；电机配置：200w，50Hz，1300rpm；搅拌：两层圆盘直叶搅拌，一层搅拌桨；空气喷管：多孔圆环下喷式喷管）。4.灭菌：在搅拌状态下，夹层蒸汽加热到110℃；关闭搅拌，改为直接进蒸汽升温至119℃-124℃，压力0.1±0.05Mpa，保温20min灭菌。5.接种：火焰圈保护接种。向灭菌后的培养基中以10%的比例接入处于迅速生长期的培养8d的桑黄液体菌种。6.培养：提供条件，开始培养（T：28±0.5℃；罐压：0.05±0.005Mpa；空气流量：0-92h，0.20m³/h,93-358h,0.30m³/h，359-422h，0.20m³/h阶段性调节；搅拌：0-62h，20Hz，63-160h，30Hz，161-332h，20Hz，333-422h，10Hz）。实施例21.配制培养基：按照配方组成（麦麸6%，玉米粉4%，蛋白胨3%，MgSO4·7H2O0.05%，KH2PO40.10%，K2HPO4·3H2O0.04%）麦麸6-8%，玉米粉2-4%，蛋白胨1-3%，MgSO4·7H2O0.05-0.15%，KH2PO40.10-0.15%，K2HPO4·3H2O0.02-0.04%2.配制方法（麦麸放入足量的水中，煮沸55min，四层纱布过滤，向滤液中依次加入玉米粉、蛋白胨、MgSO4·7H2O、KH2PO4和K2HPO4·3H2O，调pH值为6）配制6L培养基。3.装罐：将培养基装入10L的发酵罐（生产厂家：扬州新亚；容积：10L；电机配置：200w，50Hz，1300rpm；搅拌：两层圆盘直叶搅拌，一层搅拌桨；空气喷管：多孔圆环下喷式喷管）。4.灭菌：在搅拌状态下，夹层蒸汽加热到110℃；关闭搅拌，改为直接进蒸汽升温至119℃—124℃，压力0.1±0.05Mpa，保温20min灭菌。5.接种：火焰圈保护接种。向灭菌后的培养基中以10%的比例接入处于迅速生长期的培养8d的桑黄液体菌种。6.培养：提供条件，开始培养（T：28±0.5℃；罐压：0.05±0.005Mpa；空气流量：0-92h，0.20m³/h,93-358h,0.30m³/h，359-422h，0.20m³/h阶段性调节；搅拌：0-62h，20Hz，63-160h，30Hz，161-332h，20Hz，333-422h，10Hz）。实施例31.配制培养基：按照配方组成（麦麸8%，玉米粉2%，蛋白胨1%，MgSO4·7H2O0.15%，KH2PO40.13%，K2HPO4·3H2O0.02%）2.配制方法（麦麸放入足量的水中，煮沸45min，四层纱布过滤，向滤液中依次加入玉米粉、蛋白胨、MgSO4·7H2O、KH2PO4和K2HPO4·3H2O，调pH值为6）配制6L培养基。3.装罐：将培养基装入10L的发酵罐（生产厂家：扬州新亚；容积：10L；电机配置：200w，50Hz，1300rpm；搅拌：两层圆盘直叶搅拌，一层搅拌桨；空气喷管：多孔圆环下喷式喷管）。4.灭菌：在搅拌状态下，夹层蒸汽加热到110℃；关闭搅拌，改为直接进蒸汽升温至119℃-124℃，压力0.1±0.05Mpa，保温20min灭菌。5.接种：火焰圈保护接种。向灭菌后的培养基中以10%的比例接入处于迅速生长期的培养8d的桑黄液体菌种。6.培养：提供条件，开始培养（T：28±0.5℃；罐本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种适于桑黄液体发酵生产用培养基，其特征在于：由以下重量的原料制成：麦麸6‑8%，玉米粉2‑4%，蛋白胨1‑3%，MgSO4·7H

【技术特征摘要】
1.一种适于桑黄液体发酵生产用培养基，其特征在于：由以下重量的原料制成：麦麸6-8%，玉米粉2-4%，蛋白胨1-3%，MgSO4·7H2O0.05-0.15%，KH2PO40.10-0.15%，K2HPO4·3H2O0.02-0.04%，其余为水。2.根据权利要求1所述的适于桑黄液体发酵生产用培养基，其特征在于：由以下重量的原料制成：麦麸7%，玉米粉3%...

【专利技术属性】
技术研发人员：许谦，杜睿绮，
申请(专利权)人：菏泽学院，
类型：发明
国别省市：山东,37