针对肿瘤坏死因子的抗体及其用途制造技术

一种与肿瘤坏死因子－α特异性结合的人源单克隆抗体，包括具有氨基酸序列″ＳｅｒＴｙｒＡｓｐＭｅｔＨｉｓ″的重链互补决定区１（ＣＤＲ１）。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及针对抗原肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factoralpha)(以下简称TNFα)的抗体，以及此类抗体的用途。更具体地，本专利技术涉及针对抗原TNFα的完全人源单克隆抗体以及此类抗体的用途。本专利技术还涉及可以表达此类抗体的杂交瘤或其他细胞系。此类抗体可用于诊断和治疗与TNFα的活性和/或过量产生有关的疾病。
技术介绍
TNFα已证明涉及传染性疾病、免疫紊乱、自身免疫病理、移植物抗宿主疾病(GVHD)、瘤形成(neoplasia)/癌症和与癌症有关的恶病质。参见Feldman M.，2002 Nat.Rev.Immunol.，2364。具体而言，TNFα水平在革兰氏阴性败血症(sepsism)、内毒素休克(参见Michie等，1989 Br.J.Surg.76670)、克罗恩氏病和类风湿性关节炎中受到显著诱导。TNFα涉及到如此广泛的适应症，表明开发针对这种炎症细胞因子的特异生物疗法的重要性。几位研究人员报道了针对TNFα的单克隆抗体的特性，所述抗体在体外中和TNFα的活性。参见Liang CM等，1986，Biochem.Biophys Res.Commun.，137847，和Meager A等，1987 Hybridoma6305。这些抗体中的一部分被用作绘制人类TNFα表位图谱，开发酶免疫测定，帮助重组TNFα的纯化。参见Fendly BM等，1987Hybridoma，6359；Hirai M等，1987 J.Immunol Methods，9657；Moller A等，1990 Cytokine，2162；Bringman TS和Aggarwal BB，1987，Hybridoma，6489。遗憾的是，由于这些研究中所生成的抗体来源于非人类物种并且缺乏对TNFα的特异性，所以不能用作治疗人类患者的治疗性中和TNFα的抗体。TNFα的中和抗血清或单克隆抗体已在非人类哺乳动物体中显示出功效即消除不利的病理生理事件，并在实验性内毒素血症中致死测试之后防止死亡。这些效果已在啮齿动物和非人类灵长类模型系统中得到证实。参见Beutler B等，1985 Science，229869；Tracey KJ等，1987 Nature，330662；Mathison JC等，1988 J.Clin.Invest.，811925；Shimamoto Y等，1988，Immunol.Lett.，17311；Opal SM等，1990，J.Infect.Dis.，1611148；Silva AT等，1990，J.Infect.Dis.，162454；Hinshaw LB等，1990，Circ.Shock，30279。目前存在几种形式的中和抗体，Feldman对此作了综述。参见Feldman M，2002，Nat.Rev.Immunol.，2364。如综述中所述，已花费了大量的精力来构建中和抗体，该中和抗体可以产生用于人类长期给药的治疗适用的抗体。目前，抗体/TNFR融合(fclg/TNFR)蛋白(Enbrel)已经显示出一定的实用性，但缺点是在血清中的半衰期短，导致频繁给药(例如，每周两次)。长期治疗用的针对TNFα的中和治疗性抗体只要其本身不具有免疫原性，就会克服半哀期的问题(每3～4周注射一次)。另有人试图构建具有如下所需特性的TNFα的中和抗体即免疫原性低或无免疫原性，并具有其内源对应物(counterpart)特有的半衰期，但未获得成功。所述抗体的例子包括鼠/人嵌合体如英夫利昔单抗(Infliximab，cA2或Remicade)，以及人源化抗体CDP571或阿达木单抗(Adalimumab，D2E7或Humira)。这些代表了为构建与其人类对应物极为相似的中和治疗抗体所作的努力。遗憾的是，由于所述药物固有的潜在免疫原性、较短的半衰期和/或对TNFα较弱的亲合力/亲和力，它们的全部潜能或许并没有实现。这些嵌合抗体引起的宿主免疫应答能够导致将抗体从循环中清除，使得重复给药由于缺少功效而不适于治疗。这些问题最终降低了患者的治疗效果。使用例如上述抗体或其片段还可能在扩增(scale-up)和制造过程中遇到其他问题。因此，由于以上原因，本领域需要为临床指示群体(clinicallyindicated population)中的患者提供其它选择，所述临床指示群体中TNFα是引起某一特定疾病病理生理学的原因。用于长期给药的完全人源、高亲和力、中和单克隆抗体，或其片段，提供非免疫原性治疗方案所需的特性，其半衰期适用于频率较低的给药。
技术实现思路
本专利技术的实施方案涉及与肿瘤坏死因子-α特异性结合的人源单克隆抗体，该抗体具有氨基酸序列为“Ser Tyr Asp Met His”的重链互补决定区1(CDR1)。这里所述的抗体还可以包括氨基酸序列为“Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Ile Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser ValLys Gly”的重链互补决定区2(CDR2)，氨基酸序列为“Glu ValGlu Ser Ala Met Gly Gly Phe Tyr Tyr Asn Gly Met Asp Val”的重链互补决定区3(CDR3)，包括SEQ ID NO70所示的氨基酸序列的重链氨基酸，以及包括SEQ ID NO74所示的氨基酸序列的重链氨基酸。其它的实施方案包括人源单克隆抗体，该抗体具有氨基酸序列为“Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Ile Asp Leu Gly”的轻链互补决定区1(CDR1)。此处所述抗体还可以包括氨基酸序列为“Ala Ala SerThr Leu Gln Ser”的轻链互补决定区2(CDR2)，氨基酸序列为“LeuGln His Lys Ser Tyr Pro Leu Thr”的轻链互补决定区3(CDR3)，包括如SEQ ID NO72所示的氨基酸序列的轻链氨基酸。其他实施方案中，本专利技术提供与肿瘤坏死因子-α特异性结合的人源单克隆抗体，并且包括氨基酸序列为“Arg Ala Ser Gln GlyIle Arg Ile Asp Leu Gly”的轻链互补决定区1(CDR1)，氨基酸序列为“Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser”的轻链互补决定区2(CDR2)，氨基酸序列为“Leu Gln His Lys Ser Tyr Pro Leu Thr”的轻链互补决定区3(CDR3)。另外的实施方案包括人源单克隆抗体，该抗体具有氨基酸序列为“Ser Tyr Asp Met His”的重链互补决定区1(CDR1)，氨基酸序列为“Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Ile Lys Tyr Tyr Ala Asp SerVal Lys Gly”的重链互补决定区2(CDR2)，氨基酸序列为“GluVal Glu Ser Ala Met Gly Gly Phe Tyr Tyr Asn Gly Met Asp Val”的重链互补决定区3(CDR3)。其他实施方案中，本专利技术包括与肿瘤坏死因子-α特异性结合的人源单克隆抗体，并且包括VH3-33重链基因，或其保守性变体。此处所述抗体还可以包括A3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：J·S·巴布科克，J·S·康，O·富尔德，L·格林，X·冯，S·克莱坎普，M·哈克弗兰德肖，P·拉塞纳斯万米，C·皮戈特，M·L·梁，R·李，K·曼丘伦乔，R·法吉尼，G·森诺迪，J·S·巧娟，
申请(专利权)人：阿布格尼克斯公司，
类型：发明
国别省市：