一种从动物胎及其胎盘制备活性蛋白肽冻干粉的方法技术

本发明专利技术公开的一种从动物胎(儿)及其动物胎盘制备活性蛋白肽冻干粉的方法，步骤包括新鲜动物胎及其动物胎盘冷冻处理后，再经切碎、浸泡除去血液、磨浆浸提、离心、浓缩、冷冻干燥获得蛋白肽纯品。本发明专利技术方法操作简单，生产成本低廉，适用于大规模工业化生产，实现了从动物胎(儿)及其动物胎盘中高效制备蛋白肽的目的。

【技术实现步骤摘要】
一种从动物胎及其胎盘制备活性蛋白肽冻干粉的方法一、
本专利技术涉及从动物胎(儿)及其胎盘中制备蛋白肽(ProeinandPeptide，PP)冻干粉的方法，是一种从动物胎及其胎盘中得到蛋白肽的方法。二、
技术介绍
动物胎(儿)及其胎盘，例如羊胎及其胎盘富含孕育生命所必需的所有原始生命物质。其中含有丰富的蛋白质、17种氨基酸、14种微量元素、磷脂、脂多糖、维生素，还有与免疫功能和机体正常运转相关的多种活性多肽，其营养成分天然搭配的比例最接近人体的需求。羊胎及其胎盘的功效增强机体免疫功能、调节机体内分泌、维持机体正常功能、增强机体耐力、改善造血功能、养颜美容、延缓衰老等神奇功效。羊胎及其胎盘富含人体免疫系统及各器官需要补充和调整的的极其全面的活性成分。蛋白质含量80％以上、氨基酸含量丰富、种类齐全、配比合理。脂肪含量10％以下。其中含有丰富的卵磷脂、脑磷脂脑细胞营养素、脂多糖、多种维生素和人体必需的常量、微量元素以及多种免疫球蛋白、多种抗体、干扰素、胸腺肽维持细胞免疫功能、抗衰老、活性肽、表皮生长因子维持皮肤弹性、类胰岛素生长因子、血小板衍生因子消除造血障碍、转换生长因子、白细胞元素及抗癌物质并含有体液因子调节人体内分泌、多种活性酶改善消化系统功能促进营养的转化、分解和吸收、歧化酶SOD消除使细胞衰老的氧自由基，将过氧化物还原，防止黑色素沉积，减轻对细胞膜的损伤、透明质酸HA保温润肤、防止皱纹。不同生产方法制备的蛋白肽，其品质和功效差异很大。确切地说，用低温、低酸碱度方法生产的蛋白肽最为理想，完全保持了蛋白肽的原有构象，生物活性最佳。目前，市面上或进口的蛋白肽产品品质参差不齐，一些是用高温熬煮法制备的所谓蛋白肽，其实是变性蛋白混合物，是一些失去活性的混合蛋白，未经任何提取过程，质量极差。使用本工艺生产的蛋白肽保持了原有蛋白的三维构象。在生产过程中，淘汰了使用火碱脱脂方法，在低温(≤18℃)条件下，经去除杂蛋白以及多糖、胆固醇、脂类物质等，制备高级品质蛋白肽。三、
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种成本低廉，从动物胎(儿)及其胎盘高效地制备活性蛋白肽冻干粉的方法。本专利技术的从动物胎及其胎盘中制备蛋白肽冻干粉的方法，包括以下步骤：1)屠宰后的怀孕动物，连同胎盘取出，于进行-20℃冷冻保藏；2)用切碎机切碎冷冻羊胎及其胎盘，加入5-10倍体积的冷水，搅拌后，浸泡过夜，去除血水，再用清水充分冲洗。3)用骨泥磨磨浆，加入3％的醋酸为羊胎及其胎盘重量的20倍，搅拌浸提过夜；4)用高速离心机离心，收集固体沉淀；5)沉淀加入5倍的去离子水搅拌。6)用0.2微米的滤膜板筐过滤，收集穿过夜。7)用纳滤膜浓缩，并反复洗涤蛋白肽。8)用除菌过滤机除菌，冷冻干燥，分装得成品。本专利技术的具体方面是提供一种成本低廉，从羊胎及其胎盘高效地制备活性蛋白肽冻干粉的方法(羊胎及其胎盘蛋白肽生产工艺线路，见图1)。本专利技术的从羊胎及其胎盘中制备蛋白肽冻干粉的方法，包括以下步骤：(1)屠宰后的怀孕母羊，连同胎盘取出，于进行-20℃冷冻保藏；(2)用切碎机切碎冷冻羊胎及其胎盘，加入5-10倍体积的冷水，搅拌后，浸泡过夜，去除血水，再用清水充分冲洗。(3)用骨泥磨磨浆，加入3％的醋酸为羊胎及其胎盘重量的20倍，搅拌浸提过夜；(4)用高速离心机离心，收集固体沉淀；(5)沉淀加入5倍的去离子水搅拌。(7)用0.2微米的滤膜板筐过滤，收集穿过夜。(8)用纳滤膜浓缩，并反复洗涤蛋白肽。(9)用除菌过滤机除菌，冷冻干燥，分装得成品。本专利技术中，羊胎及其胎盘保存在-20℃是预防腐败。本专利技术中，切碎的羊胎及其胎盘组织用冷水浸泡是为了去除羊胎及其胎盘中的血液。本专利技术中，醋酸的作用是使羊胎及其胎盘组织膨胀，浸提蛋白肽。本专利技术中，所说的酸可以是硫酸，盐酸，柠檬酸，甲酸，丁酸等有机酸和无机酸。本专利技术中，步骤7)所说的纳滤包括浓缩和脱盐，步骤如下：先进行纳滤膜浓缩；然后不断加水稀释同时纳滤膜浓缩脱盐；上述的纳滤膜为截留分子量在400-500道尔顿之间的纳滤膜。在本专利技术的另一个方面，提供了通过本专利技术方法制备的活性蛋白肽制品的用途，所述的用途包括将所述的活性蛋白肽用于预防和/或防治受试者老化的药物、食品、保健品或化妆品中的应用，合适地，所述的受试者为哺乳动物，优选地，所述的受试者为人类。在本专利技术的另一个方面，将所述药物、食品、保健品或化妆品制备成口服制剂、外用制剂、吸入制剂、经鼻制剂、经直肠制剂、经皮制剂或注射制剂，优选为外用剂型或注射制剂。本专利技术的优点在于所制备的活性蛋白肽活性高，纯度高。本专利技术的方法操作简单，生产成本低廉，适用于大规模工业化生产，实现了从动物胎盘中高效制备活性蛋白肽。本专利技术的方法操作简单，生产成本低廉，适用于大规模工业化生产，实现了从羊胎及其胎盘中高效制备蛋白肽资源。离心和过滤所得到的滤液由于不合有任何有害物质，不会污染环境。附图说明图1、从动物胎(儿)及其动物胎盘制备活性蛋白肽冻干粉的工艺流程图。图2、从羊胎胎盘制备活性蛋白肽冻干粉的显微镜图。四、具体实施方式：为了提供对本专利技术的实质性理解，在下文中以不同的详细程度描述了本专利技术的某些方面、模式、实施方式、变型和特征。在实施本专利技术的过程中，使用了生物化学、蛋白质生物化学、蛋白质生物化学工程、制药工艺学、医学、病理学、动物实验学等很多传统技术。这些技术是熟知的。在本专利技术的一个实施方式中，本专利技术提供了一种从哺乳动物胎(儿)及其胎盘制备高活性蛋白肽的新型方法。所述方法包括如下步骤：包括新鲜哺乳动物低温保持，切碎，浸泡漂洗，磨浆，抽提，离心，酶解，脱盐，浓缩，冷冻干燥步骤。所述哺乳动物可源自于任何种类的动物，包括陆生的或者水生的哺乳动物，本文的陆生哺乳动物包括但不限于人类、猩猩，猴、牛、水牛、野牛、猪、野猪、羊(例如羊羔、绵羊、山羊)、驴、鹿、骆驼、鼠类、马等，本文的水生哺乳动物包括但不限于鲸鱼、河马、海豹等。因此本文中的哺乳动物是指能够提供胎及其胎盘的一切哺乳动物，并且用该胎及其胎盘制备活性蛋白肽。术语“一”，“一种”和“该”：除非内容清楚指明，否则本说明和所附的权利要求中使用的单数形式“一”，“一种”和“该”包括复数的引用对象。例如，所提及的“一种胎盘”包括单独一种哺乳动物胎及其胎盘，两种不同哺乳动物胎及其胎盘或更多种哺乳动物胎及其胎盘的组合等。在本专利技术的又一实施方式中，提供了哺乳动物胎及其胎盘的低温保持方法。所述胎及其胎盘可以整块冷冻保存，也可以成数个大块甚至切碎保存。本专利技术可以直接使用新鲜的胎及其胎盘组织也可以使用低温保持过的胎及其胎盘组织。术语“低温保持”包括“冷藏保持”和“冷冻保藏”两种方式。在另一个实施方式中，冷藏保持可在低于约10℃的温度下将哺乳动物胎及其胎盘温育，例如在0℃以上至约9℃之间，适合地在约1℃至约8℃，适合地在约2℃至约6℃之间，优选在约2℃至约4℃之间温育。在一个实施方式中，可将哺乳动物胎及其胎盘冷藏保持几十分钟至7天甚至更长时间。有时候出于生产目的需要，如果环境温度比较低，甚至不用专门冷藏保持设备。例如东北的秋季，温度较低时候。如果需要冷藏，有时只需要冷藏保持数十分钟，几个小时，或1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天。但出于微生物腐败和异味等因素考虑，往往不会超过7天。在另一个实本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从动物胎及其动物胎盘制备活性蛋白肽冻干粉的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：1)新鲜冷冻动物胎及其动物胎盘，切碎后加入5‑10倍体积的水，过夜浸泡除去血液成分，骨泥磨磨浆后，加入20‑40倍体积的2‑10％酸浸提6‑12小时，14000转/离心，收集清液得蛋白肽粗品；2)蛋白肽粗品加3‑5重量体积去离子水，搅拌，调pH至中性或微碱性，得蛋白肽粗品中性或微碱性液。3)蛋白肽粗品中性或微碱性液用0.2微米的滤膜过滤，过滤液用400‑500道尔顿的纳滤滤脱盐3‑5次，再浓缩到含蛋白肽4‑10％，除菌过滤，冷冻干燥制备羊胎及其胎盘蛋白肽冻干粉。上述的脱盐、浓缩步骤如下：先纳滤膜浓缩；然后加水稀释到原体积时再进行纳滤膜浓缩以达到脱盐的目的，反复3‑5次；上述的纳滤膜为截留分子量在400‑500之间的纳滤膜。

【技术特征摘要】
2015.09.02 CN 20151055603771.一种从动物胎及其动物胎盘制备活性蛋白肽冻干粉的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：1)新鲜冷冻动物胎及其动物胎盘，切碎后加入5-10倍体积的水，过夜浸泡除去血液成分，骨泥磨磨浆后，加入20-40倍体积的2-10％酸浸提6-12小时，14000转/离心，收集清液得蛋白肽粗品；2)蛋白肽粗品加3-5重量体积去离子水，搅拌，调pH至中性或微碱性，得蛋白肽粗品中性或微碱性液。3)蛋白肽粗品中性或微碱性液用0.2微米的滤膜过滤，过滤液用400-500道尔顿的纳滤滤脱盐3-5次，再浓缩到含蛋白肽4-10％，除菌过滤，冷冻干燥制备羊胎及其胎盘蛋白肽冻干粉。上述的脱盐、浓缩步骤如下：先纳滤膜浓缩；然后加水稀释到原体积时再进行纳滤膜浓缩以达到脱盐的目的，反复3-5次；上述的纳滤膜为截留分子量在400-500之间的纳滤膜。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：1)新鲜冷冻动物胎及其动物胎盘，切碎后加入5-10倍体积的水，过夜浸泡除去血液成分，骨泥磨磨浆后，加入20-40倍体积的2-5％醋酸浸提8-12小时，14000转/离心，收集清液得蛋白肽粗品；2)蛋白肽粗品加3-5重量体积去离子水，搅拌，调pH7-9.0，得蛋白肽粗品中性或微碱性液。3)蛋白肽粗品中性或微碱性液用0.2微米的滤膜过滤，过滤液用400-500道尔顿的纳滤滤脱盐3次，再浓缩到含蛋白肽4-10％，除菌过滤，冷冻干燥制备羊胎及其胎盘蛋白肽冻干粉。上述的脱盐、浓缩步骤如下：先纳滤膜浓缩；然后加水稀释到原体积时再进行纳滤膜浓缩以达到脱盐的目的，反复3次；上述的纳滤膜为截留分子量在400-500之间的纳滤膜。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：1)新鲜冷冻动物胎及其动物胎盘，切碎后加入5-10倍体积的水，过夜浸泡除去血液成分，骨泥磨磨浆后，加入20-40倍体积的2-5％醋酸浸提8-12小时，14000转/离心，收集清液得蛋白肽粗品；2)蛋白肽粗品加3-5重量体积去离子水，搅拌，调pH7-7.5，得蛋白肽粗品中性液。3)蛋白肽粗品中性液用0.2微米的滤膜过滤，过滤液用400-500道尔顿的纳滤滤脱盐3次，再浓缩到含蛋白肽4-10％，除菌过滤，冷冻干燥制备羊胎及其胎盘蛋白肽冻干粉。上述的脱盐、浓缩步骤如下：先纳滤膜浓缩；然后加水稀释到原体积时再进行纳滤膜浓缩以达到脱盐的目的，反复3次；上述的纳滤膜为截留分子量在400-500之间的纳滤膜。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：1)新鲜冷冻动物胎及其动物胎盘，切碎后加入5-10倍体积的水，过夜浸泡除去血液成分，骨泥磨磨浆后，加入20倍体积的3％醋酸浸提8-12小时，14000转/离心，收集清液得蛋白肽粗品；2)蛋白肽粗品加3-5重量体积去离子水，搅拌，调pH7-7.5，得蛋白肽粗品中性液。3)蛋白肽粗品中性液用0.2微米的滤膜过滤，过滤液用400-500道尔顿的纳滤滤脱盐3次，再浓缩到含蛋白肽4-10％，除菌过滤，冷冻干燥制备羊胎及其胎盘蛋白肽冻干粉。上述的脱盐、浓缩步骤如下：先纳滤膜浓缩；然后加水稀释到原体积时再进行纳滤膜浓缩以达到脱盐的目的，反复3次；上述的纳滤膜为截留分子量在400-500之间的纳滤膜。5.如权利要求1-4所述的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：将屠宰后的怀孕动物，连同胎盘取出包裹的胎儿，取新鲜动物胎及其胎盘10kg，切碎，加100升自来水，浸泡过夜，次日用清水反复冲洗3次，充分去除血水，用胶体磨磨浆，加入500升3％醋酸，搅拌浸提过夜。用14000转/分离心，收集清液。调pH7.4，用0.2微米的膜板筐过滤机过滤，穿过液用纳滤机浓缩到10升，再加入去离子水到30升，搅拌后纳滤浓缩，反复4次...

【专利技术属性】
技术研发人员：庞海，刘爽，张鹤青，金家福，张全，
申请(专利权)人：吉林金梓源生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22