酿酒酵母菌株及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种酿酒酵母菌株，其保藏名称为：Saccharomyces cerevisiae SC‑tri，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉武汉大学；保藏日期：2014年1月12，保藏号：CCTCC NO：M2014019。该酿酒酵母菌株具有抗木霉菌素的抗性，在含有浓度≤10ppm木霉菌素的培养基上保持正常生长。其拥有与原始酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae一致的基因转化和表达功能。

Saccharomyces cerevisiae strain and uses thereof

The invention discloses a Saccharomyces cerevisiae strain, its name: Saccharomyces cerevisiae preservation SC tri preservation unit China typical culture collection, preservation Chinese address: Wuhan University in Wuhan; the preservation date: January 2014 12, docket number: CCTCC NO: M2014019. The Saccharomyces cerevisiae strains with resistance of trichodermin, containing less than 10ppm in concentration of trichodermin culture to maintain normal growth medium. It has identical with the original Saccharomyces cerevisiae Saccharomyces cerevisiae gene transformation and expression function.

【技术实现步骤摘要】
酿酒酵母菌株及其用途
本专利技术涉及微生物领域，具体地说是一种酿酒酵母菌株。
技术介绍
酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)，又称面包酵母或者出芽酵母。酿酒酵母是与人类关系最广泛的一种酵母，在现代分子和细胞生物学中用作真核模式生物，其作用相当于原核的模式生物大肠杆菌。酿酒酵母是发酵中最常用的生物种类。酿酒酵母是第一个完成基因组测序的真核生物，测序工作于1996年完成。酿酒酵母的基因组包含大约1200万碱基对，分成16组染色体，共有6275个基因，其中可能约有5800个真正具有功能。据估计其基因约有23%与人类同源。酵母基因组数据库包含有酵母基因组的详细注释，是研究真核细胞遗传学和生理学的重要工具。另一个重要的酿酒酵母数据库由慕尼黑蛋白质序列信息中心维护。因为酿酒酵母与同为真核生物的动物和植物细胞具有很多相同的结构，又容易培养，酵母被用作研究真核生物的模式生物，也是目前被人们了解最多的生物之一。在人体中重要的蛋白质很多都是在酵母中先被发现其同源物的，其中包括有关细胞周期的蛋白、信号蛋白和蛋白质加工酶。酵母为高等真核生物提供了一个可以检测的实验系统。木霉菌素来源于紫杉木霉(Zhangetal.,2007;Cardozaetal.,2011)。木霉菌素可有效抑制多种植物病原真菌，影响真核生物蛋白质合成的延伸与终止，是蛋白合成抑制剂。紫杉木霉(Trichodermataxi)可产木霉菌素(trichodermin)，来源于江西官山自然保护区的南方红豆杉。木霉菌素可有效抑制灰葡萄孢(Botrytiscinerea)、立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、稻瘟菌(Magnaportheoryzae)、终极腐霉(Pythiumultimum)等病原菌指示菌，也可抑制酵母的正常生长。当培养基中木霉菌素的浓度为10ppm时，酵母就无法正常生长。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种新型的酿酒酵母，该酿酒酵母有抗木霉菌素的抗性，能在含≤10ppm的木霉菌素的培养基上正常生长。为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种酿酒酵母菌株：保藏名称为：SaccharomycescerevisiaeSC-tri，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉武汉大学；保藏日期：2014年1月12，保藏号：CCTCCNO：M2014019。本专利技术的酿酒酵母有抗木霉菌素的抗性，能在含≤10ppm的木霉菌素的培养基上正常生长。本专利技术的酿酒酵母菌株拥有与原始的酿酒酵母Saccharomycescerevisiae一致的基因转化和表达功能。本专利技术的酿酒酵母具有如下技术优势：酿酒酵母SaccharomycescerevisiaeSC-tri能在含有≤10ppm的木霉菌素的培养基上正常生长，具有抗10ppm木霉菌素抗性，并且拥有和原始酿酒酵母菌株一致的基因转化和表达功能。附图说明下面结合附图对本专利技术的具体实施方式作进一步详细说明。图1为酿酒酵母原始菌株Saccharomycescerevisiae对木霉菌素浓度为0.1ppm，1ppm，10ppm的生长临界浓度测定结果，表明酿酒酵母原始菌株Saccharomycescerevisiae在0.1ppm和1ppm浓度下可以正常生长，而在10ppm下则表现为不生长。图2为酿酒酵母原始菌株Saccharomycescerevisiae对木霉菌素浓度为2ppm，4ppm，6ppm，8ppm，10ppm的生长临界浓度测定，表明酿酒酵母原始菌株Saccharomycescerevisiae在2ppm，4ppm，6ppm和8ppm浓度下可以正常生长，而在10ppm下则表现为不生长。图3为酿酒酵母原始菌株Saccharomycescerevisiae（野生型酵母）和突变体酿酒酵母菌株SaccharomycescerevisiaeSC-tri（紫外诱变得到的酵母）在含木霉菌素10ppm以及11ppm的SC平板的生长情况，结果表明，酿酒酵母原始菌株Saccharomycescerevisiae无论在10ppm或者11ppm浓度下均不生长（左上和左下），而突变体酿酒酵母菌株SaccharomycescerevisiaeSC-tri在10ppm浓度下生长旺盛（右上），在11ppm浓度依然可以生长。图4为PCR验证突变体酵母和野生型酵母中tri3基因均已转入的图。图5为显微镜下镜检突变酵母和野生型酵母的生长情况图。图6为在培养基上观察突变酵母SaccharomycescerevisiaeSC-tri和野生型酵母的菌落形态图。具体实施方式实施例1、原始菌种酿酒酵母Saccharomycescerevisiae的活化与扩大培养：SC培养基配方：0.67%酵母氮源yeastnitrogenbase(无氨基酸)，2%葡萄糖glucose，0.01%(腺嘌呤adenine,精氨酸arginine,半胱氨酸cysteine,亮氨酸leuine,赖氨酸lysine,苏氨酸threonine,色氨酸tryptophan,尿嘧啶uracil)，0.005%(天冬氨酸asparticacid,组氨酸histidine,异亮氨酸isoleucine,蛋氨酸methionine,苯丙氨酸phenylalanine,脯氨酸proline,丝氨酸serine,酪氨酸tyrosine,缬氨酸valine)，2%琼脂agar(仅用于固体培养基)。即，每升SC液体培养基中含有6.7g酵母氮源yeastnitrogenbase(无氨基酸)，20g葡萄糖glucose；腺嘌呤adenine,精氨酸arginine,半胱氨酸cysteine,亮氨酸leuine,赖氨酸lysine,苏氨酸threonine,色氨酸tryptophan,尿嘧啶uracil各0.1g；天冬氨酸asparticacid,组氨酸histidine,异亮氨酸isoleucine,蛋氨酸methionine,苯丙氨酸phenylalanine,脯氨酸proline,丝氨酸serine,酪氨酸tyrosine,缬氨酸valine各0.05g；其余为水（即，用水定容至1L）。每升SC固体培养基中含有6.7g酵母氮源yeastnitrogenbase(无氨基酸)，20g葡萄糖glucose；腺嘌呤adenine,精氨酸arginine,半胱氨酸cysteine,亮氨酸leuine,赖氨酸lysine,苏氨酸threonine,色氨酸tryptophan,尿嘧啶uracil各0.1g；天冬氨酸asparticacid,组氨酸histidine,异亮氨酸isoleucine,蛋氨酸methionine,苯丙氨酸phenylalanine,脯氨酸proline,丝氨酸serine,酪氨酸tyrosine,缬氨酸valine各0.05g；20g琼脂agar；其余为水。试验所用酿酒酵母原始菌株Saccharomycescerevisiae（为常规的酿酒酵母）于酵母甘油管-20℃保藏，使用前需要活化。方法是用18mm×180mm试管，装5mL的SC液体培养基，接种10μL～20μL甘油管中的菌液，28℃过夜培养（即培养8h～10h）。实施例2、酿酒酵母原本文档来自技高网...

【技术保护点】
酿酒酵母菌株，其特征是：保藏名称为：Saccharomyces cerevisiae SC‑tri，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉武汉大学；保藏日期：2014年1月12，保藏号：CCTCC NO：M 2014019。

【技术特征摘要】
1.酿酒酵母菌株，其特征是：保藏名称为：SaccharomycescerevisiaeSC-tri，保藏单位：中国典...

【专利技术属性】
技术研发人员：章初龙，林福呈，赵楠，冯晓晓，毛黎娟，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33