肝细胞生长因子的特异性结合物制造技术

本发明专利技术描述与肝细胞生长因子（ＨＧＦ）相互作用的特异性结合物。本发明专利技术还描述通过给予药物有效量的ＨＧＦ特异性结合物治疗癌症的方法。本发明专利技术描述还描述用ＨＧｆ特异性结合物检测样品中ＨＧＦ的量的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肝细胞生长因子的特异性结合物〖001]本申请要求2003年7月18日提交的美国临时申请号 60/488,681的权利，对于任何目的其通过引用结合到本文中。专利
本专利技术涉及结合肝细胞生长因子(HGF)的特异性结合物。本 专利技术还描述了组合物、所述组合物的生产方法以及治疗各种病症的方 法，所述病症例如某些类型的癌症，包括但不限于实体瘤和血液恶性 癌症(hematologic malignancies)。专利技术背景肝细胞生长因子(HGF)已被鉴定为肝细胞的有效促分裂 原。HGF还被鉴定为成纤维细胞和平滑肌的分泌性蛋白，其诱导上皮 细胞的运动性。HGF在文献中也称为分散因子(SF)。 HGF是主要由间充质细胞产生的多功能异源二聚体多肽， 其充当Met受体酪氨酸激酶(Met)的配体。人Met受体也称为"c-met，，。 已显示通过Met受体酪氨酸激酶-HGF (Met-HGF)途径的信号转导导致 一系列细胞应答，包括但不限于增殖(有丝分裂)、分散(运动性)、通过 基质刺激细胞运动(侵袭)和分支形态发生。体内Met-HGF信号转导途 径(Met-HGF)在例如神经诱生、肝再生、伤口愈合、血管生成、生长、 侵袭、形态分化和正常胚胎发育中起到作用。除这些功能之外，Met-HGF对在人类癌症中也起到作用。已显示异常Met-HGF信号转导参与 肿瘤发生，特别是参与侵袭性和转移性表型的发展。已发现某些病原 体如疟疾利用异常Met-HGF信号转导。参见Carrolo等，Nat Med. 2003 9(11):1363-9(2003年10月12日)，对于任何目的其内容通过引用结合到本文中。此外， 一些研究小组报告说，HGF在血管生成和在血管生 成相关疾病(如增殖性糖尿病性视网膜病)中起到作用。参见例如Grant, D. S.等，Proc. Nat Acad. Sci. U.S.A. 90(5) 1937-41 (1993); Bussolino等， J. Cell Biol" 119(3):629-641 (1992); Montesano等，Cell, 67:901-908 (1991); Canon等，Br. J. Ophthalmol. 84 (7):732國5 (2000)。 HGF在凋亡 或者说程序性细胞死亡中也可能起到作用。当正常调节机制未能维持 增殖和凋亡之间的平衡，从而导致细胞过量积累时，即可产生肿瘤。 取决于生物背景，HGF不但可实现增殖，而且可实现凋亡。因为HGF参与许多生理过程，在某些情况下，拥有能调节 其活性的分子是有益的。例如，在某些情况下，这种分子可用于治疗 各种不同类型的癌症。专利技术概述在某些实施方案中，本专利技术提供包含至少一个选自 CDRla、 CDR2a和CDR3a的互补决定区(CDR)的分离多肽。其中CDRla包含^tJ^酸序列abcdefghijklmnopq,其中 氛基酸a选自赖氨酸、精氨酸或谷氨酰胺；氨基酸b选自丝氨酸或丙 氨酸；氨基酸c是丝氨酸；氨基酸d是谷氨酰胺；氨基酸e选自丝氨 酸、甘氨酸或天冬氨酸；氨基酸f选自缬氨酸或异亮氨酸或者不存在； 氨基酸g选自亮氨酸或苯丙氨酸或者不存在；氨基酸h选自苯丙氨酸 或酪氨酸或者不存在；氨基酸i是丝氨酸或者不存在；氨基酸j是丝氨 酸或者不存在；氨基酸k选自天冬酰胺、苏氨酸或者不存在；氨基酸l 选自天冬酰胺、异亮氨酸或缬氨酸；氨基酸m选自赖氨酸、精氨酸、 天冬酰胺或天冬氨酸；氨基酸n选自天冬酰胺或丝氨酸；氨基酸o选 自酪氨酸、天冬氨酸、色氨酸或天冬酰胺；氨基酸p是亮氨酸；氨基 酸q选自丙氨酸、甘氨酸或天冬酰胺；其中CDR2a包含氨基酸序列r s t u v w x,其中氨基酸r选自色 氨酸、丙氨酸、缬氨酸、谷氨酸或甘氨酸；氨基酸s是丙氨酸；氨基 酸t是丝氨酸；氨基酸u选自苏氨酸、丝氨酸或天冬氨酸；氨基酸v 选自精氨酸或亮氨酸；氨基酸w选自谷氨酸、谷氨酰胺或丙氨酸；氨 基酸x选自丝氨酸、天冬酰胺或苏氨酸；其中CDR3a包含氨基酸序列y z a' b' c' d' e' f g' h',其中氨基酸y 选自谷氨酰胺或亮氨酸；氨基酸z选自谷氨酰胺、天冬酰胺或精氨酸； 氨基酸a'选自酪氨酸、组氨酸、丙氨酸或丝氨酸；氨基酸b'选自苯丙 氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺或异亮氨酸；氨基酸c'选自丝氨 酸、甘氨酸或天冬酰胺；氨基酸d'选自脯氨酸、酪氨酸、苏氨酸、苯 丙氨酸、天冬氨酸、亮氨酸或色氨酸；氨基酸e'是脯氨酸；氨基酸f 是脯氨酸或者不存在；氨基酸g'是色氨酸、亮氨酸、脯氨酸、酪氨酸 或异亮氨酸；氨基酸h'是苏氨酸或天冬酰胺；其中所述多肽与抗体重链联合，能够结合肝细胞生长因子 (HGF)。在某些实施方案中，本专利技术提供包含至少一个选自 CDRlb、 CDR2b和CDR3b的互补决定区(CDR)的分离多肽其中CDRlb包含氨基酸序列abcdefg，其中氨基酸a是丝氨酸 或者不存在；氨基酸b选自天冬氨酸或甘氨酸或者不存在；氛基酸c 选自天冬氨酸、甘氨酸、丝氨酸、缬氨酸、苏氨酸或异亮氨酸；氨基 酸d是酪氨酸；氨基酸e选自酪氨酸或甘氨酸；氨基酸f选自异亮氨 酸、曱硫氨酸或色氨酸；氨基酸g选自组氨酸、天冬酰胺或丝氨酸；其中CDR2b包含氨基酸序列hijklmnopqrstuvwx,其中 氨基酸h选自色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、天冬酰胺或谷氨酸；氨基酸i 选自异亮氨酸、苯丙氨酸或缬氨酸；氨基酸j选自天冬酰胺、丝氨酸、 色氨酸或酪氨酸；氨基酸k选自脯氨酸、丝氨酸、酪氨酸或组氨酸； 氨基酸l选自天冬酰胺、丝氨酸或天冬氨酸；氨基酸m选自丝氨酸或 甘氨酸；氮基酸n选自甘氨酸或丝氨酸或者不存在；氨基酸o选自甘 氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、异亮氨酸或天冬酰胺；氨基酸p 选自苏氨酸、异亮氨酸或赖氨酸；氨基酸q选自天冬酰胺或酪氨酸； 氨基酸r选自酪氨酸或组氨酸；氨基酸s选自丙氨酸或天冬酰胺；氨 基酸t选自谷氨酰胺、天冬氨酸或脯氨酸；氨基酸u选自赖氨酸或丝 氨酸；氨基酸v选自苯丙氨酸、缬氨酸或亮氨酸；氨基酸w选自谷氨 酰胺或赖氨酸；氨基酸x选自甘氨酸或丝氨酸；其中CDR3b包含絲酸序列y z a' b' c' d' e' f g' h' i' j' k' 1' m' n' o' p' q' r',其中氨基酸y选自谷氨酸、天冬氨酸、丝氨酸或甘氨酸或者不存在； 氨基酸z选自亮氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、组氨酸、脯氨酸或甘氨酸 或者不存在；氨基酸a'选自谷氨酸、酪氨酸或亮氨酸或者不存在；氨 基酸b'选自亮氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、组氨酸、酪氨酸或色氨酸或 者不存在；氨基酸c'选自精氨酸、丝氨酸、谷氨酸、酪氨酸、甘氨酸 或苯丙氨酸或者不存在；氨基酸d'是甘氨酸或者不存在；氛基酸e'选 自色氨酸或酪氨酸或者不存在；氨基酸f是天冬氨酸或者不存在；氨 基酸g'选自丝氨酸或精氨酸或者不存在；氨基酸h'是丝氨酸或者不存 在；氨基酸i'选自甘氨酸或酪氨酸或者不存在；氨基酸j'选自酪氨酸、 谷氨酸或天冬氨酸或者不存在；氨基酸k'选自酪氨酸、苯丙氨酸或天 冬氨酸或者不存在；氨基酸l'选自酪氨酸、天冬氨酸、组氨酸或色氨 酸或者不存在；M酸m'选自酪氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、脯氨酸或 丝氨酸或者不存在；氨基酸n本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽，所述多肽包含至少一个选自ＣＤＲ１ａ、ＣＤＲ２ａ和ＣＤＲ３ａ的互补决定区（ＣＤＲ）　　　　其中ＣＤＲ１ａ包含氨基酸序列ａｂｃｄｅｆｇｈｉｊｋｌｍｎｏｐｑ，其中氨基酸ａ选自赖氨酸、精氨酸或谷氨酰胺；氨基酸ｂ选自丝氨酸或丙氨酸；氨基酸ｃ是丝氨酸；氨基酸ｄ是谷氨酰胺；氨基酸ｅ选自丝氨酸、甘氨酸或天冬氨酸；氨基酸ｆ选自缬氨酸或异亮氨酸或者不存在；氨基酸ｇ选自亮氨酸或苯丙氨酸或者不存在；氨基酸ｈ选自苯丙氨酸或酪氨酸或者不存在；氨基酸ｉ是丝氨酸或者不存在；氨基酸ｊ是丝氨酸或者不存在；氨基酸ｋ选自天冬酰胺、苏氨酸或者不存在；氨基酸ｌ选自天冬酰胺、异亮氨酸或缬氨酸；氨基酸ｍ选自赖氨酸、精氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸；氨基酸ｎ选自天冬酰胺或丝氨酸；氨基酸ｏ选自酪氨酸、天冬氨酸、色氨酸或天冬酰胺；氨基酸ｐ是亮氨酸；氨基酸ｑ选自丙氨酸、甘氨酸或天冬酰胺；　　　　其中ＣＤＲ２ａ包含氨基酸序列ｒｓｔｕｖｗｘ，其中氨基酸ｒ选自色氨酸、丙氨酸、缬氨酸、谷氨酸或甘氨酸；氨基酸ｓ是丙氨酸；氨基酸ｔ是丝氨酸；氨基酸ｕ选自苏氨酸、丝氨酸或天冬氨酸；氨基酸ｖ选自精氨酸或亮氨酸；氨基酸ｗ选自谷氨酸、谷氨酰胺或丙氨酸；氨基酸ｘ选自丝氨酸、天冬酰胺或苏氨酸；　　　　其中ＣＤＲ３ａ包含氨基酸序列ｙｚａ′ｂ′ｃ′ｄ′ｅ′ｆ′ｇ′ｈ′，其中氨基酸ｙ选自谷氨酰胺或亮氨酸；氨基酸ｚ选自谷氨酰胺、天冬酰胺或精氨酸；氨基酸ａ′选自酪氨酸、组氨酸、丙氨酸或丝氨酸；氨基酸ｂ′选自苯丙氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺或异亮氨酸；氨基酸ｃ′选自丝氨酸、甘氨酸或天冬酰胺；氨基酸ｄ′选自脯氨酸、酪氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、天冬氨酸、亮氨酸或色氨酸；氨基酸ｅ′是脯氨酸；氨基酸ｆ′是脯氨酸或者不存在；氨基酸ｇ′是色氨酸、亮氨酸、脯氨酸、酪氨酸或异亮氨酸；氨基酸ｈ′是苏氨酸或天冬酰胺；　　　　其中所述多肽与抗体重链联合，能够结合肝细胞生长因子（ＨＧＦ）。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：TL伯吉斯，A考克森，LL格林，K张，
申请(专利权)人：安姆根有限公司，阿布格尼克斯公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]