一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的测定方法技术

本发明专利技术涉及一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的木质纤维素含量测定方法，包括：(1)将杏鲍菇工厂化生产中的菌渣经中性洗涤剂和无水亚硫酸钠煮沸处理，离心收集残渣即中性洗涤纤维，上清液采用苯酚硫酸法测定总糖；(2)中性洗涤后的菌渣经酸性洗涤剂和无水亚硫酸钠处理，离心收集残渣即酸性洗涤纤维，上清液采用苯酚硫酸法测定总糖；(3)酸性洗涤后的菌渣经硫酸溶液消化后，离心收集残渣干燥灰化得出木质素含量，离心上清液采用苯酚硫酸法测定总糖。本发明专利技术能够准确定量木质纤维素的含量，大大减小误差，能够得到食用菌生长过程中短期内培养料中木质纤维素含量的微小变化。

A method for the determination of residue of Pleurotus eryngii in factory production

Method for determination of lignocellulose content, the invention relates to a mushroom factory production residue includes: (1) the mushroom factory production of mushroom residue by neutral detergent and sodium sulfite anhydrous boiling treatment, centrifuged residue namely neutral detergent fiber, the supernatant of total sugar was determined by phenol sulfuric acid method; (2) after washing the residue by neutral acidic detergent and anhydrous sodium sulfite treatment, namely acid detergent fiber residue collected by centrifugation, supernatant of total sugar was determined by phenol sulfuric acid method; (3) residue after washing with sulfuric acid solution after digestion, dry ashing residue collected by centrifugation that lignin content, centrifugal supernatant of total sugar was determined by phenol sulfuric acid method. The invention can accurately quantify lignocellulose content, greatly reducing the error, can get small changes during the growth of edible fungi in short-term culture food lignocellulose content.

【技术实现步骤摘要】
一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的测定方法
本专利技术属于杏鲍菇工厂化生产领域，特别涉及一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的测定方法。
技术介绍
食用菌工厂化瓶栽业务主要是指用塑料瓶子在空调设施内常年栽培，通过栽培的机械化和标准化，来实现食用菌在工厂内常年稳定的生产。由于工厂内菇房环境不受季节影响，实现了食用菌的周年供应，满足了消费者对新鲜食用菌产品的需求。鉴于食用菌瓶栽技术的优势，目前诸如真姬菇、灰树花、白灵菇、金针菇、杏鲍菇、滑子菇、茶树菇、猴头菇等的瓶栽生产已经在产业上得到广泛的应用。杏鲍菇(PleurotuseryngiiQuel)，又名剌芹侧耳。隶属于真菌门、担子菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属。杏鲍菇菌肉肥厚，质地脆嫩，特别是菌柄组织致密、结实、乳白，可全部食用，且菌柄比菌盖更脆滑、爽口，被称为“平菇王”、“干贝菇”，具有愉快的杏仁香味和如鲍鱼的口感，适合保鲜、加工，深得人们的喜爱。杏鲍菇的子实体单生或群生，菌盖宽2-12cm，初呈拱圆形，后逐渐平展，成熟时中央浅凹至漏斗形，表面有丝状光泽，平滑、干燥、细纤维状，幼时盖缘内卷，成熟后呈波浪状或深裂；菌肉白色，具有杏仁味，无乳汁分泌；菌褶延生，密集，略宽，乳白色，边缘及两侧平，有小菌褶；菌柄2-8cm至0.5-3cm，偏心生或侧生。杏鲍菇属于中低温结实性菌类，子实体发育适宜温度围10-15℃。目前能够用于菌渣的测定方法普遍采用传统的范氏洗涤法，样品抽滤烘干转移的过程对结果造成很大的误差，不能得到杏鲍菇生长过程中短期内培养料中木质纤维素含量的微小变化，限制了对于杏鲍菇生长过程中对木质纤维素利用过程的研究，因此不能深入的进行杏鲍菇工厂化生产的配方筛选研究，阻碍了杏鲍菇的工业化发展。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的测定方法，该方法能够准确定量木质纤维素的含量，大大减小误差，能够得到食用菌生长过程中短期内培养料中木质纤维素含量的微小变化。本专利技术的一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的测定方法，包括：(1)将杏鲍菇工厂化生产中的菌渣经中性洗涤剂和无水亚硫酸钠(用于脱除木质素)煮沸处理，离心，收集残渣，得到中性洗涤纤维；上清液采用苯酚硫酸法测定总糖；(2)中性洗涤后的菌渣经酸性洗涤剂和无水亚硫酸钠处理，离心，收集残渣，得到酸性洗涤纤维；上清液采用苯酚硫酸法测定总糖；(3)酸性洗涤后的菌渣经硫酸溶液消化后，离心，干燥，灰化，得到木质素含量；离心后的上清液采用苯酚硫酸法测定总糖。所述步骤(1)中的中性洗涤剂的组成为：EDTA0.0186g/ml，硼酸钠0.0068g/ml，十二烷基硫酸钠0.03g/ml，无水磷酸氢二钠0.00456g/ml，乙二醇乙醚1％，pH值为6.9～7.1。所述步骤(1)中的中性洗涤纤维的成分包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。所述步骤(2)中的酸性洗涤剂的组成为：1mol/L含有十六烷三甲基溴化铵的硫酸溶液。所述步骤(2)中的酸性洗涤纤维的成分包括纤维素、木质素和硅酸盐。所述无水亚硫酸钠与中性洗涤剂或酸性洗涤剂的质量体积比为1g:200ml。所述步骤(3)中的硫酸溶液体积百分数为72％。所述步骤(3)中的消化温度为30℃，消化时间为3h。所述步骤(3)中的灰化温度为550℃，灰化时间为3h。所述步骤(1)、(2)和(3)中的苯酚硫酸法测定总糖具体为：多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，再以比色法测定。有益效果(1)本专利技术采用苯酚硫酸法对消化后消化液中的多糖进行定量测定，然后换算成木质纤维素的含量，达到准确定量，大大减小误差，能够得到食用菌生长过程中短期内培养料中木质纤维素含量的微小变化；(2)本专利技术采用高速离心的方法，分离时间缩短、效率大大提高；因此对于蛋白含量较高的食用菌的菌渣更有优势，且误差小，可对样品中木质纤维素含量的微小变化进行跟踪，具有良好的应用前景。附图说明图1为实施例1中苯酚硫酸法测定总糖的标准曲线。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。实施例1一、溶液配制(1)中性洗涤液准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠(EDTA，C10H14O8Na2·2H2O，分析纯)和6.8g硼酸钠(Na2B4O7·10H2O，分析纯)放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠(C12H25NaO4S，分析纯)和10ml乙二醇乙醚(C4H10O2，分析纯)，4.56g无水磷酸氢二钠(Na2HPO4，分析纯)，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH值约为6.9～7.1(pH值一般勿需调整)。(2)酸性洗涤液量取约27.87ml浓硫酸(分析纯，比重1.84，98％)，徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；称取20g十六烷三甲基溴化铵(CTAB，分析纯)溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤。(3)72％硫酸配制称取433.53g去离子水于1L玻璃烧杯中，置于磁力搅拌器上，不断搅拌，沿玻璃棒贴壁缓缓倒入1199.68g98％浓硫酸。(4)5％苯酚配制80克苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。临用前以80％苯酚配制5％苯酚。(每次测定均需现配)。二、方法(1)工厂化栽培杏鲍菇流程配料、装瓶、灭菌、冷却、接种、预培养、培养、搔菌、菌丝恢复、催蕾子实体、发育、采收、削菇、包装、挖瓶，分别在灭菌后，搔菌后，出菇后各取三瓶样品，称湿重，烘干，称干重，记录含水量，三瓶混匀取样，打粉，过筛，测定木质纤维素含量。(2)标准曲线制备取葡萄糖(105℃，干燥制恒重)0.0100g(AR)，用蒸馏水溶解定容至100mL，取干净干燥试管1-7，用移液枪加葡萄糖溶液0mL，0.1mL，0.2mL，0.3mL，0.4mL，0.5mL，0.6mL，分别加蒸馏水至1mL，然后加5％苯酚0.5mL，再加入2.5mL98％浓硫酸。震荡混匀，沸水浴15min，流动水冷却，490nm处检测吸光度，绘制标准曲线。(每次测定时均绘制标准曲线)。(3)中性洗涤液洗涤1.0g样品，加入100mL中性洗涤液，0.5g无水亚硫酸钠，置于100℃水浴锅中，保持微沸60min，取2mL洗涤液12000rpm离心5min，上清液苯酚硫酸法测定总糖，剩余部分10000rpm离心10min，弃上清收集残渣。成分包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。(4)酸性洗涤液洗涤将中性洗涤残渣至于100ml容量瓶中，加入100mL酸性洗涤液，0.5g无水亚硫酸钠，置于100℃水浴锅中，保持微沸60min，取2mL洗涤液12000rpm离心5min，上清液苯酚硫酸法测定总糖，剩余部分10000rpm离心10min，弃上清收集残渣。成分包括纤维素、木质素和硅酸盐。(5)72％硫酸消化将酸性洗涤残渣至于100ml容量瓶中，加入10mL72％硫酸，30℃下消化3h，稀释定容到100L，取2mL消化液12000rpm离心5min，上清液苯酚硫酸法测定总糖，剩余部本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的木质纤维素含量测定方法，包括：(1)将杏鲍菇工厂化生产中的菌渣经中性洗涤剂和无水亚硫酸钠煮沸处理，离心，收集残渣，得到中性洗涤纤维；上清液采用苯酚硫酸法测定总糖；(2)中性洗涤后的菌渣经酸性洗涤剂和无水亚硫酸钠处理，离心，收集残渣，得到酸性洗涤纤维；上清液采用苯酚硫酸法测定总糖；(3)酸性洗涤后的菌渣经硫酸溶液消化后，离心，干燥，灰化，得到木质素含量；离心后的上清液采用苯酚硫酸法测定总糖。

【技术特征摘要】
1.一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的木质纤维素含量测定方法，包括：(1)将杏鲍菇工厂化生产中的菌渣经中性洗涤剂和无水亚硫酸钠煮沸处理，离心，收集残渣，得到中性洗涤纤维；上清液采用苯酚硫酸法测定总糖；(2)中性洗涤后的菌渣经酸性洗涤剂和无水亚硫酸钠处理，离心，收集残渣，得到酸性洗涤纤维；上清液采用苯酚硫酸法测定总糖；(3)酸性洗涤后的菌渣经硫酸溶液消化后，离心，干燥，灰化，得到木质素含量；离心后的上清液采用苯酚硫酸法测定总糖。2.根据权利要求1所述的一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的测定方法，其特征在于：所述步骤(1)中的中性洗涤剂的组成为：EDTA0.0186g/ml，硼酸钠0.0068g/ml，十二烷基硫酸钠0.03g/ml，无水磷酸氢二钠0.00456g/ml，乙二醇乙醚1％，pH值为6.9～7.1。3.根据权利要求1所述的一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的测定方法，其特征在于：所述步骤(1)中的中性洗涤纤维的成分包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。4.根据权利要求1所述的一种杏鲍菇工厂化生产中菌渣的测定方法，其特征在于：所述步骤(2)中的酸性洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋春艳，张文升，章炉军，周帅，尚晓冬，谭琦，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：上海,31