CRIPTO阻断抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了Ｃｒｉｐｔｏ阻断抗体，或其生物功能片段。本发明专利技术提供了可结合Ｃｒｉｐｔｏ且能调控Ｃｒｉｐｔｏ信号传导的抗体。本发明专利技术提供了可结合Ｃｒｉｐｔｏ且能阻断Ｃｒｉｐｔｏ和ＡＬＫ４间相互作用的抗体。本发明专利技术提供了可结合Ｃｒｉｐｔｏ且能调控肿瘤生长的抗体。本发明专利技术提供了可结合Ｃｒｉｐｔｏ，调控信号传导，且能调控肿瘤生长的抗体。本发明专利技术提供了可结合Ｃｒｉｐｔｏ，阻断Ｃｒｉｐｔｏ和ＡＬＫ４间相互作用，且能调控肿瘤生长的抗体。本发明专利技术还提供了使用这些抗体进行治疗、诊断和研究的方法。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术广义上涉及遗传学、细胞及分子生物学领域。更具体地说，本发 明涉及能结合和调控Cripto信号传导的抗体，含有该抗体的试剂盒以及该抗 体的^f吏用方法。背景4支术Cripto是在对人胚癌文库进行cDNA筛选时偶然分离到的一种188氨基 酸残基的细胞表面蛋白质(Ciccodicola等，1989, EMBO J., vol. 8， no. 7, pp. 1987-1991)。 Cripto蛋白具有至少两个明显的结构域 一个富含半胱氨酸的 结构域和一个最初被认为与表皮生长因子(EGF)家族中发现的结构域近似的 结构域。Cripto最初被归类为EGF家族的一个成员(Ciccodicola等，上述)；但 是，随后的分析表明Cripto不能与任一已知的EGF受体结合，其EGF-样结 构域实际上是从EGF家族分化而来(Bianco等，1999， J. Biol. Chem., 274: 8624-8629)。尽管进行了持续的研究，Cripto信号传导途径仍然让人琢磨不透，出现 了支持下列几种不同激活途径的文献，包括MAP激酶途径(DeSantis等, 1997, Cell Growth Differ" 8: 1257-1266; Kannan等，1997, J. Biol. Chem., 272: 3330-3335)、 TGF-卩途径(Gritsman等，1999, Development, 127:921-932; Schier等，2000， Nature, 403: 385-389)、与Wnt途径间可能的相互 作用(Salomon等，Endocr Relat Cancer. 2000 Dec;7(4): 199-226;以及与 EGF途径的信息交换(Bianco等，1999, J. Biol. Chem.， 274: 8624-8629)。美国专利5, 256， 643及与其相关的两个分案申请(美国专利5,654,140 和5，792，616)公开了人Cripto基因、Cripto蛋白及抗Cripto抗体。美国专利5,264,557及与其相关的三个分案申请(美国专利5,620,866, 5,650,285,和5，854,399)公开了人Cripto-相关基因及蛋白。另外还公开了能 结合Cripto-相关蛋白但不能通过与Cripto蛋白本身结合而发生交叉反应的 抗体。用抗cripto短肽的兔多克隆抗体进行免疫染色表明Cripto蛋白的过表 达与多种肺瘤类型(包括但不限于乳腺、睾丸、结肠、肺、卵巢、膀胱、子 宫、子宫颈、胰腺以及胃)相关。Panico等1996， Int. J. Cancer, 65: 51-56; Byrne 等，1998， J Pathology, 185: 108-111; DeAngelis等，1999， Int J Oncology, 14: 437_440。因此，本领域需要有办法来控制、限制和/或阻止这类过表达，调 控Cripto信号传导，以及调控Cripto的表达结果(即，促进和/或保持细胞转 化)。专利技术概述本专利技术提供了能特异性结合Cripto的新的抗体，以及制备和使用该抗体 的方法。本专利技术还提供了能结合Cripto并能调控Cripto信号传导或蛋白相互 作用的抗体，例如，结合Cripto从而使与Cripto相互作用的蛋白质产生的信 号被下调的抗体。本专利技术还提供了能结合Cripto并能阻断Cripto和ALK4间 相互作用的抗体。本专利技术还提供了能结合Cripto并能调控肿瘤生长的抗体。 本专利技术还提供了能结合Cripto、调控Cripto信号传导以及调控肿瘤生长的抗 体。本专利技术还提供了能结合Cripto、阻断Cripto和ALK4间相互作用以及调 控肿瘤生长的抗体。本专利技术的一个方面，本专利技术所述抗体能特异性地结合选自与下列抗体结 合的表位的表位A6C12.11， A6F8.6 (ATCC保藏号PTA-3318), A7H1.19, A8F1.30, A8G3.5 (ATCC保藏号PTA-3317), A8H3.1 (ATCC保藏号 PTA-3315), A8H3.2, A19A10.30, A10B2.18 (ATCC保藏号PTA-3311), A27F6.1 (ATCC保藏号PTA-3310), A40G12.8 (ATCC保藏号PTA-3316), A2D3.23, A7A10.29, A9G9.9, A15C12.10， A15E4.14, A17A2.16, A17C12.28，A17G12.1 (ATCC保藏号PTA-3314), A17H6.1， A18B3.11 (ATCC保藏号 PTA-3312), A19E2.7, B3F6.17 (ATCC保藏号PTA-3319), B6G7.10 (ATCC保 藏号PTA-3313),B11H8,4。本专利技术的另一方面，本专利技术所述的抗体特异性地结合Cripto配体/受体 结合结构域中的表位。Cripto可选自CR-1 (SEQ ID NO: 1)或CR-3 (SEQ ID NO: 2)。在一个更具体的实施方案中，与配体/受体结合结构域中表位特异 性结合的抗体包括例如A6C12.11， A6F8.6(ATCC保藏号PTA-3318)， A8G3.5 (ATCC保藏号PTA-3317), A19A10.30, A8H3.1 (ATCC保藏号PTA-3315), A27F6.1 (ATCC保藏号PTA-3310), A40G12.8 (ATCC保藏号PTA-3316), A17G12.1 (ATCC保藏号PTA-3314), A18B3.11 (ATCC保藏号PTA-3312)和 B6G7.10(ATCC保藏号PTA-3313)。一个实施方案中，本专利技术所述抗体结合的表位在EGF-样结构域中。特 异性结合EGF-样结构域中表位的抗体包括但不限于A40G12.8 (ATCC保藏 号PTA-3316), A8H3.1 (ATCC保藏号PTA-3315), A27F6.1 (ATCC保藏号 PTA-3310), B6G7.10 (ATCC保藏号PTA-3313), A17G12.1 (ATCC保藏号 PTA-3314)和A18B3.11 (ATCC保藏号PTA-3312).另一个实施方案中，本专利技术所述抗体特异性结合的表位在富含cys的结 构域中。特异性结合富含cys的结构域中表位的抗体包括包括但不限于 A19A10.30, A8G3.5 (ATCC保藏号PTA-3317), A6F8.6 (ATCC保藏号 PTA-3318)和A6C12.1L另 一实施方案中，本专利技术所述抗体结合的表位位于跨越Cripto第46-62 位氨基酸残基的结构域内。特异性结合跨越Cripto第46-62位氨基酸残基的 结构域内表位的抗体包括但不限于A10B2.18 (ATCC保藏号PTA-3311), B3F6.17 (ATCC保藏号PTA-3319)和A17A2.16。本专利技术还涉及特异性结合Cripto且能调控Cripto信号传导的抗体。特异 性结合Cripto且能调控Cripto信号传导的抗体，包括但不限于，A40G12.8 (ATCC保本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异性结合Ｃｒｉｐｔｏ配体／受体结合结构域中的表位的抗体。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：米歇尔萨尼科拉内德尔，凯文威廉斯，苏珊希弗，保罗雷霍恩，
申请(专利权)人：比奥根艾迪克MA公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]