一种极光激酶A抑制剂及其制备与应用制造技术

本发明专利技术公开一种新型稳定氮氧自由基标记的极光激酶A抑制剂，以及这种抑制剂的制备方法和用途。本发明专利技术的抑制剂是N-(5-氟-4-邻氯苯胺-嘧啶-2)-氨基苯甲酸4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧化物酰胺，或N-{5-氟-4-氨基-(苯甲酰邻氯苯胺)-嘧啶-2}-氨基苯甲酸4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧化物酰胺。本发明专利技术的方法是由2,4-二氯-5-取代-嘧啶依次与苯胺，或对氨基苯甲酰苯胺，和4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧化物发生取代反应制备目标化合物。本发明专利技术的用途是将所述的化合物用于制备抗癌药物。

Aurora kinase A inhibitor, preparation and application thereof

The present invention discloses a novel stable nitrogen and oxygen free radical labeled Aurora kinase A inhibitor, and a preparation method and use of the inhibitor. The inhibitors of this invention is N- (5- fluoro -4- o-chloroaniline pyrimidine -2) - amino benzoic acid 4- amino -2,2,6,6- four methyl piperidine amide nitrogen oxide, or N-{5- fluoride -4- amino - (benzoyl o-chloroaniline) - pyrimidine -2}- amino benzoic acid 4- amino -2,2,6,6- four methyl piperidine amide nitrogen oxide. The method of the invention is that the target compound is prepared by substituting reaction of 2,4- two chloro -5- substituted pyrimidine with aniline, or para aniline, and 4- amino -2,2,6,6- four piperidine nitrogen oxide in turn. The present invention is directed to the use of said compounds in the preparation of anti-cancer drugs.

【技术实现步骤摘要】
一种极光激酶A抑制剂及其制备与应用
本专利技术涉及有机化学和药物化学领域，具体为一种稳定氮氧自由基标记的2,4-二胺基嘧啶类极光激酶A抑制剂，以及这种抑制剂的制备方法和用途。
技术介绍
激光激酶(Aurorakinase)是一类新型的苏氨酸/丝氨酸蛋白激酶，在中心体复制、两极纺锤体形成、染色体重排和染色体检查点监测等重要的有丝分裂过程中发挥着至关重要的作用(CancerMetastasisRev.2003,22,451)。Aurora激酶家族有三种结构和功能高度相关的亚群:即Aurora-A、Aurora-B和Aurora-C。它们的蛋白质一级结构均含有一个N-端调控区和一个C-端催化区，且酶结构域序列相似度达71％，ATP腺嘌呤环结合位点的残基也相同；但在细胞分裂中它们具有完全不同且互不重叠的功能。AuroraA从有丝分裂的S期末至下一个分裂周期的G期开始，影响中心体的分离、成熟以及两极纺锤体的形成(Nat.Rev.Cancer2005,5,42)。AuroraB在有丝分裂早期位于染色体的着丝粒区域，分裂后期则从着丝粒移动到微管。目前对AuroraC功能的研究相对较少。1998年，美国学者Bischoff等首次发现Aurora激酶在多种癌细胞中过度表达，且与染色体的不稳定性、癌变、肿瘤增殖和化学抗性等过程密切相关(EMBOJ.1998,17,3052)。由于Aurora激酶独特的药理作用机制，以Aurora激酶为靶点的药物开发已成为抗癌药物研究的热点之一(ExpertOpin.DrugDiscovery2011,6,291)。迄今为止，还没有Aurora激酶抑制剂用于临床治疗，仅有数个Aurora激酶抑制剂在进行临床试验，如VX-680、PHA-739358、AZD-1152、MLN8054、SNS-314、ENMD-2076等(药学进展2008,32,337；中国抗生素杂志2010,35(9),641)。但是，这些小分子都存在着不同程度的毒副作用，尽管药物治疗前景光明，还有待进一步化学修饰研究，减少其副作用。相对于Aurora-B而言，Aurora-A在结肠癌、卵巢癌、胃癌以及乳腺癌等许多肿瘤中均过量表达。Aurora-A的过度表达使细胞有丝分裂检测点的监测功能失控，导致分裂异常，癌基因扩增，正常细胞转化为癌细胞(J.CellSci.2007,120,2987)。Aurora-A能更加有效地引起细胞有丝分裂停滞并快速诱导细胞凋亡，因而，以Aurora-A为靶点的抗肿瘤药物治疗在一定程度上将优于Aurora-B(Curr.Opin.Invest.Drugs2006,7,1044)。就报道的选择性Aurora-A激酶抑制剂而言，目前只有加拿大Millennium公司研制的MLN8237在进行Ⅰ期临床试验(Proc.Natl.Acad.Sci.USA2007,104,4106)。最近，美国学者Cochran和Lwerence分别报道了一类2,4-二苯环取代的单嘧啶环类化合物，有些化合物对Aurora-A的选择性较Aurora-B高达1000倍，但由于它们的溶解性和/或膜穿透能力较差，致使其抗肿瘤活性较低，失去了进一步开发的价值(J.Med.Chem.2012,55,7392)。另外，挪威学者PrimeM.E.报道的一类新型吡唑取代的酞嗪酮类化合物，对Aurora-A激酶抑制的选择性大于1000，目前是否进入临床前研究尚不清楚(J.Med.Chem.2011,54,312)。考虑到稳定氮氧自由基作为有效的药物转运体，能提高药物的溶解性，并促使药物优先穿过癌变细胞膜(Science2001,291,266；J.Med.Chem.2005,48,6393)。本专利技术设计合成一种稳定氮氧自由基标记的嘧啶类化合物，体外实验表明这种化合物对癌细胞具有较好的细胞毒性，且对AuroraA较AuroraB有选择性抑制作用，同时这种化合物具有适当的脂水分配系数，是一种具有开发为新型抗癌药物的化合物；在制备方法上，本专利技术通过简单方法高效地合成了关键中间体及其目标化合物。
技术实现思路
本专利技术的目的在于利用稳定氮氧自由基作为有效的药物转运体，期望提高化合物的溶解性，并促使化合物优先穿过癌变细胞膜，发挥抗癌效果。细胞毒性实验发现本专利技术化合物对多种癌细胞具有较强的体外抑制作用，同时对AuroraA较AuroraB有选择性抑制作用。一种具有抗癌活性的结构如式Ⅰ的稳定氮氧自由基标记的极光激酶A抑制剂，其中：R为邻位氯，或间位氯，或对位氯，或邻位羟基，或间位羟基，或对位羟基。X为硝基，或氟，或氯，或溴。一种具有抗癌活性的结构如式Ⅱ的稳定氮氧自由基标记的极光激酶A抑制剂，其中：R为邻位氯，或间位氯，或对位氯。X为硝基，或氟，或氯，或溴。本专利技术中式Ⅰ所示化合物的制备方法，其特征是以2,4-二氯-5-硝基嘧啶，或2,4-二氯-5-氟嘧啶，或2,4,5-三氯嘧啶，或2,4-二氯-5-溴嘧啶为原料，首先和邻氯苯胺，或间氯苯胺，或对氯苯胺，或邻羟基苯胺，或间羟基苯胺，或对羟基苯胺反应生成2-氯-4-邻氯苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-间氯苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-对氯苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-邻羟基苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-间羟基苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-对羟基苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-邻氯苯胺-5-氟嘧啶，或2,5-二氯-4-邻氯苯胺嘧啶，或2-氯-4-邻氯苯胺-5-溴嘧啶(J.Med.Chem.2012,55,7392)；同时以叔丁氧羰基保护的对氨基苯甲酸为原料，在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)和1-羟基苯并三唑(HOBT)存在的条件下与4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧化物(TMPO)缩合，再在三氟乙酸的二氯甲烷溶液中脱除保护基即得对氨基苯甲酰4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧化物(J.Med.Chem.2001,44,441)；最后上述制得的两种化合物在强酸催化下在嘧啶环的2-位发生取代反应得到式Ⅰ所代表的目标化合物。本专利技术中式Ⅱ所示化合物的制备方法，其特征是以2,4-二氯-5-硝基嘧啶，或2,4-二氯-5-氟嘧啶为原料，首先和对氨基苯甲酰邻氯苯胺，或对氨基苯甲酰间氯苯胺，或对氨基苯甲酰对氯苯胺反应生成N-(2-氯-5-硝基-嘧啶-4)-氨基苯甲酰邻氯苯胺，或N-(2-氯-5-硝基-嘧啶-4)-氨基苯甲酰间氯苯胺，或N-(2-氯-5-硝基-嘧啶-4)-氨基苯甲酰对氯苯胺，或N-(2-氯-5-氟-嘧啶-4)-氨基苯甲酰邻氯苯胺(J.Med.Chem.2012,55,7392)；同时以叔丁氧羰基保护的对氨基苯甲酸为原料，在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)和1-羟基苯并三唑(HOBT)存在的条件下与4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧化物(TMPO)缩合，再在三氟乙酸的二氯甲烷溶液中脱除保护基即得对氨基苯甲酰4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧化物(J.Med.Chem.2001,44,441)；最后上述制得的两种化合物在强酸催化下在嘧啶环的2-位发生取代反应得到式Ⅱ所代表的目标化合物。本专利技术中式Ⅰ、Ⅱ所述的化合物的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有抗癌活性的结构如式Ⅰ的稳定氮氧自由基标记的极光激酶A抑制剂，

【技术特征摘要】
1.一种具有抗癌活性的结构如式Ⅰ的稳定氮氧自由基标记的极光激酶A抑制剂，其中：R为邻位氯，或间位氯，或对位氯，或邻位羟基，或间位羟基，或对位羟基。X为硝基，或氟，或氯，或溴。2.一种具有抗癌活性的结构如式Ⅱ的稳定氮氧自由基标记的极光激酶A抑制剂，其中：R为邻位氯，或间位氯，或对位氯。X为硝基，或氟，或氯，或溴。3.权利要求1所述化合物的制备方法，其特征是以2,4-二氯-5-硝基嘧啶，或2,4-二氯-5-氟嘧啶，或2,4,5-三氯嘧啶，或2,4-二氯-5-溴嘧啶为原料，首先和邻氯苯胺，或间氯苯胺，或对氯苯胺，或邻羟基苯胺，或间羟基苯胺，或对羟基苯胺反应生成2-氯-4-邻氯苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-间氯苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-对氯苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-邻羟基苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-间羟基苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-对羟基苯胺-5-硝基嘧啶，或2-氯-4-邻氯苯胺-5-氟嘧啶，或2,5-二氯-4-邻氯苯胺嘧啶，或2-氯-4-邻氯苯胺-5-溴嘧啶；同时以叔丁氧羰基保护的对氨基苯甲酸为原料，在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和1-羟基苯并三唑存在的条件下与4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧化物缩合，再在三氟...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈世武，惠玲，秦雯雯，关霄文，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：甘肃,62