抗Aβ抗体制剂制造技术

本发明专利技术提供了用于维持Ａβ结合多肽，例如Ａβ抗体稳定性的制剂。示例性的制剂包括紧张剂，例如甘露醇和缓冲剂或氨基酸，例如组氨酸。其他的示例性制剂包括存在量足以抑制副产物，例如高分子量多肽聚集物，低分子量多肽降解片段，及其混合物的形成的抗氧化剂。本发明专利技术的制剂还可任选含有紧张剂，例如甘露醇，以及缓冲剂或氨基酸，例如组氨酸。所述制剂适用于若干不同的给药途径。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗A/3抗体制剂相关申请本申请要求题为"抗A/3抗体制剂"的美国临时专利申请60/648,631 号(递交日为2005年1月28日)的优先权。在此将以上所引用申请的全 部内容包括在内以作参考。专利技术背景阿尔茨海默氏病("AD")是一种以出现淀粉状蛋白斑、神经纤维结 节和明显神经元损失为特征的神经退行性病症。已有文献认为/5-淀粉 状蛋白质(也称为A]3肽)，即老年斑的主要成分，与阿尔茨海默氏病的 发病机理有关(Selkoe (1989) Cell 58:611-612; Hardy (1997) Trends Neurosci. 20:154-159)。已经显示|3淀粉状蛋白对培养的神经元具有直 接毒性(Lorenzo和Yankner (1996) Ann. NY Acad. Sci. 777:89-95)并通过 多种介导物具有间接毒性(Koh等(1990) Brain Research 533:315-320; Mattson et al. (1992) J. Neurosciences 12:376-389)。此夕卜，在包括PDAPP 小鼠和大鼠模型的体内模型中，都将^淀粉状蛋白与学习缺陷、认知 功能的改变，以及长期海马趾增强作用相关联(Chen等，(2000) Nature 408:975-985; Walsh等，(2002) Nature 416:535-539)。因此，已有众多 兴趣致力于通过改变/5淀粉状蛋白水平来有效地降低疾病严重程度或 甚至消除疾病本身的治疗。随着在PDAPP小鼠和大鼠试验模型中的成功研究，近来出现了一 种AD治疗策略，该策略是通过对个体进行免疫从而提供免疫球蛋白例 如抗体(在被动免疫的情况下，对患者进行治疗性免疫球蛋白给药)或产 生对^淀粉状蛋白具有特异性的免疫球蛋白(主动免疫，其中患者的免 疫系统被活化从而产生了针对于给药抗原的免疫球蛋白)而实现的。这 些抗体可通过防止)S淀粉状蛋白聚集(Solomon等，(1997) Neurobiology1294:4109-4112)或刺激小神经胶质细胞进行吞噬作用和去除斑(Bard et al. (2000) Nature Medicine 6: 916-919)而来减轻斑负担。还例如，人源化抗 A/3肽IgGl单克隆抗体(人源化3D6抗体)也通过选择性地结合于人A/3 肽而有效地治疗AD。对蛋白，特别是抗体而言，要保持其生物学活性，所用制剂就必 须能够保持该蛋白氨基酸中至少核心序列的构象完整性不被破坏，并 同时保护该蛋白的多个官能团不被降解。蛋白的降解途径可涉及化学 不稳定性(即，涉及通过键形成或断裂产生新化学实体的任意过程)或物 理不稳定性(即，蛋白高级结构的改变)。化学不稳定性可由脱酰胺作用， 外消旋作用，水解，氧化，/ 消除或二硫键交换引起。物理不稳定性可 由变性，聚集，沉淀或者吸附引起，譬如。关于蛋白质药物稳定性的 一般性综述，请参见，例如，Manning, et al. (1989) Pharmaceutical Research 6:903-918。此外，还希望在所述制剂不含有载体多肽时依然 保持其稳定性。虽然，可能出现的蛋白质不稳定性是被广泛接受的，但是，对特 定的蛋白质而言，仍然不可能对其特定的不稳定性进行预测。任意的 这种不稳定性都可能潜在地导致多肽副产物的产生或具有活性降低、 毒性升高、和/或免疫原性升高的衍生物的形成。事实上，多肽沉淀可 导致血栓形成，剂型的非均匀性以及免疫反应。所以，任意多肽药物 制剂的安全性和有效性都与其稳定性直接相关。因此，对那些在储存和运输过程中既能够保持生物多肽，例如，A/3 结合多肽的稳定性和生物学活性，又能够适合于多种治疗给药方式制 剂的需要与日倶增。专利技术概述本专利技术提供了旨在为所含的具有生物学活性的蛋白质，特别是A/3 结合蛋白或多肽，例如，A/3抗体或其片段或部分提供稳定性以及保持供了多肽制剂，例如，能够防止不 希望多肽副产物形成的稳定液体多肽制剂。抗原结合多肽的完整性对治疗用途而言是极其重要的，因为如果 该多肽形成了副产物，例如在保存过程中出现了聚集体或降解片段， 其生物学活性就可能丧失，从而危及每单位剂量分子的治疗活性。此 外，也亟需对旨在用于特定功能，用于运输和在某些生物学适应症中 使用，例如，治疗神经退行性疾病，其中多肽必须穿过血脑屏障(BBB) 并与靶抗原结合的治疗性多肽进行稳定。在一方面，本专利技术提供了稳定制剂，其包括至少一种A/3结合多肽， 至少一种紧张剂(tonicity agent)，其中所述紧张剂的存在量足以使得 该制剂适用于给药，以及存在量足以维持生理学适合pH的至少一种缓 冲剂。所述制剂可以是冻干的或者是液体制剂。某些制剂包括至少一 种抗氧化剂，例如氨基酸抗氧化剂，例如，甲硫氨酸。在一些制剂中， 所述紧张剂是甘露醇或NaCl。在一些制剂中，至少一种缓冲剂是琥珀 酸盐，磷酸钠，或者氨基酸，例如组氨酸。优选制剂还包括至少一种 稳定剂，例如聚山梨醇酯80。在一些制剂中，所述稳定剂是聚山梨醇 酯80，所述抗氧化剂是甲硫氨酸，所述紧张剂是甘露醇，山梨醇或NaCl， 而所述缓冲剂则是组氨酸。在一些制剂中，至少有一种A/5结合多肽选 自抗A^抗体，抗A/3抗体Fv片段，抗A/3抗体Fab片段，抗A/3抗体 Fab'(2)片段，抗A0抗体Fd片段，单链抗A^抗体(scFv)，单结构域抗 A/3抗体片段(Dab)，包括来自于抗A/3抗体的至少一种抗体互补决定区 (CDR)的P-折叠片多肽，以及包括来自抗A/3抗体的至少一种抗体CDR 的非球状多肽。在一些制剂中，至少一种A/5结合多肽是抗A/3抗体， 例如，其可特异性地结合于A/3的1-7， 1-5， 3-7， 3-6， 13-28， 15-24， 16-24, 16-21， 19-22， 33-40， 33-42残基内的表位，或其Fab， Fab'(2) 或Fv片段。示例性的抗A/3抗体特异性地结合于A/3的残基1-10内的 表位，例如，A/3的残基l-7， 1-5， 3-7或3-6内的表位。其他示例性的 抗A/3抗体特异性的结合于A/3的残基13-28内的表位上，例如，的残基16-21或19-22内的表位。而其他的示例性A/3抗体还可特异性地 结合于A/3的C末端表位，例如，A/3的残基33-40或33-42。优选的A/5 抗体包括人源化抗A0抗体，例如，人源化3D6抗体，人源化10D5抗 体，人源化12B4抗体，人源化266抗体，人源化12A11抗体，或人源 化15C11抗体。在一些制剂中，所述抗A/3抗体结合于包括在的1-7和13-28 残基内的不连续表位。在一些这样的制剂中，所述抗体是双特异性抗 体或根据国际专利公开第WO03/070760号所述方法制备的抗体。在一 些这样的制剂中，所述表位是不连续的表位。在优选制剂中，所述抗A/3 抗体是人源化3D6抗体，人源化10D5抗体，人源化12B4抗体，人源 化266抗体，人源化12A11抗体，或人源化15C11抗体。抗体的同种型可以是IgM， IgGl， IgG2， IgG3， IgG4或任意其他 药物可接受的同种型。在优选制剂中，所述同种型是人I本文档来自技高网...

【技术保护点】
稳定制剂，其含有至少一种Ａβ结合多肽，至少一种紧张剂，以及存在量足以维持生理学适合ｐＨ的至少一种缓冲剂，其中所述紧张剂的存在量足以使该制剂适于给药。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：多纳路易斯，尼古拉斯W韦尔纳，安哥拉坎特，
申请(专利权)人：艾兰制药国际有限公司，惠氏公司，
类型：发明
国别省市：IE[爱尔兰]