一种苜蓿提取物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种苜蓿提取物，当苜蓿提取物是皂苷粗提取物时，它的苜蓿总皂苷含量在５－１０％；当得到的苜蓿提取物是苜蓿醇沉提取物时，它的苜蓿总皂苷含量在２０－３０％；当得到的苜蓿提取物是苜蓿上柱提取物时，它的苜蓿总皂苷含量在５０－６０％。该苜蓿提取物包含的皂苷成分为：常春藤甙元（ｈｅｄｅｒａｇｅｎｉｎ）－３－Ｏ－［α－Ｌ－阿拉伯吡喃糖（１→２）－β－Ｄ－葡萄吡喃糖－（１→２）α－Ｌ－阿拉伯吡喃糖］－２８－Ｏ－β－Ｄ－葡萄吡喃糖甙和皂苷化合物Ⅰ、皂苷化合物Ⅱ、皂苷化合物Ⅲ。本发明专利技术还公开了苜蓿提取物的制备方法以及它在制备降血脂与抗动脉粥样硬化的药物方面用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种苜蓿提取物，该提取物具有降血脂与抗动脉粥样硬化作用，本专利技术还涉及该提取物的制备方法和它的用途，尤其是在降血脂方面的用途。
技术介绍
苜蓿，学名紫花苜蓿，为多年生草本植物。一直作为牧草使用。近年发现其对高胆固醇血症、动脉粥样硬化和高血脂等有良好疗效。药物化学研究还表明，起上述作用的主要成分为苜蓿皂甙。但是，专利技术人经过大量试验研究发现，含苜蓿皂甙的苜蓿提取物的在保健和治疗方面功效更加明显。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是提供一种苜蓿提取物。本专利技术的另一目的是提供该提取物的制备方法。本专利技术的又一目的是提供该提取物的用途。本专利技术的苜蓿提取物制备方法的技术方案为一种苜蓿提取物的制备方法，它包括下列步骤取苜蓿干草、切碎，用浓度0～65％的乙醇回流提取1～3次，每次使用原料与溶剂的重量比为苜蓿∶乙醇＝1∶4～12；合并提取液，过滤，滤液回收溶剂，浓缩，得一次浓缩液；将一次浓缩液分别按下述步骤之一或组合进行处理(a).将一次浓缩液喷雾或真空干燥，过筛，得苜蓿粗提取物；(b).一次浓缩液加入乙醇至乙醇浓度达65％～85％，搅匀，静置12～48小时，弃沉淀，上清液回收乙醇，得二次浓缩液，将经醇沉提取的二次浓缩液喷雾或真空干燥，过筛，得苜蓿醇沉提取物；(c).一次浓缩液加入大孔树脂上柱中吸附，用水和55％～95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，得二次浓缩液，将经上柱提取的二次浓缩液喷雾或真空干燥，过筛，得苜蓿上柱提取物。其中乙醇回流的优选浓度为50％，优选提取次数是2次，加入乙醇静置的优选乙醇浓度为80％，静置36小时，大孔树脂上柱吸附，优选的是AB-8型弱极性大孔树脂。乙醇洗脱的优选浓度为70％。为了了解苜蓿提取物中苜蓿总皂苷的含量，我们对苜蓿提取物中皂苷成分进行了研究，分离并鉴定出一种皂苷成分(M1)，其结构确定为常春藤甙元(hederagenin)-3-O--28-O-β-D-葡萄吡喃糖甙。苜蓿提取物的皂苷成分还包括皂苷化合物I、皂苷化合物II、皂苷化合物III，它们的结构式如下皂苷化合物I 皂苷化合物II 皂苷化合物III 用确定结构的皂苷成分(M1)为对照品建立了比色法测定苜蓿提取物中总皂苷含量的方法，结果分别是苜蓿粗提取物中苜蓿总皂苷的含量为5-10％，苜蓿醇沉提取物中苜蓿总皂苷的含量为20-30％和苜蓿上柱提取物中苜蓿总皂苷的含量为50-60％。本专利技术中三种苜蓿提取物均具有降血脂与抗动脉粥样硬化的活性作用。家兔胃肠给药时，该提取物的的治疗指数远远大于对照药物安妥明的治疗指数。动物药效学试验各项主要指标的治疗指数见表1。表1 苜蓿醇沉提取物中苜蓿皂苷的治疗指数(TI) 用上述方法制得的三种苜蓿提取物可以作为活性成分与药学上可接受的赋形剂一起用于制备药物组合物，该药物组合物可以采用本领域的常规方法制备成各种剂型，如胶囊、片剂、颗粒剂和口服液等剂型。根据剂型的不同，该药物组合物使用的赋型剂也不同，常用赋型剂包括稀释剂、湿润剂、润滑剂、填充剂、防腐剂等。其中稀释剂为乳糖、淀粉、糊精、微晶纤维素、微粉硅胶等。含有本专利技术苜蓿提取物的药物组合物的优选剂型是口服制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服剂。具体实施例方式以下通过实施例和试验例来详细地说明本专利技术。实施例1苜蓿粗提取物的制备取苜蓿干草1kg，切碎，用50％乙醇回流提取二次，第一次乙醇用量8kg，时间2h，第二次乙醇用量7kg，时间1.5h，合并提取液，过滤，弃渣。滤液回收乙醇得一次浓缩液。真空干燥，过筛，得苜蓿粗提取物。实施例2苜蓿醇沉提取物的制备取苜蓿干草1kg，切碎，用50％乙醇回流提取二次，第一次乙醇用量8kg，时间2h，第二次乙醇用量7kg，时间1.5h，合并提取液，过滤，弃渣。滤液回收乙醇得一次浓缩液。再加95％的乙醇，至乙醇浓度约80％，搅匀，静置过夜(约36小时)，弃沉淀。上清液回收乙醇，得二次浓缩液。真空干燥，过筛，得苜蓿醇沉提取物。实施例3苜蓿上柱提取物的制备取苜蓿干草1kg，切碎，用50％乙醇回流提取二次，第一次乙醇用量8kg，时间2h，第二次乙醇用量7kg，时间1.5h，合并提取液，过滤，弃渣。滤液回收乙醇得一次浓缩液。加入大孔树脂柱中吸附，用水和70％乙醇依次洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，得二次浓缩液。真空干燥，过筛，得苜蓿上柱提取物。实施例4苜蓿皂苷片及其制备方法取苜蓿粗提取物粉500g、微晶纤维素317g、硬脂酸镁8g、微粉硅胶8g，混匀，加工成胶囊1000粒。用于治疗高胆固醇血症和混合型高血脂症，每天3次，每次3粒。45天为一疗程。实施例5苜蓿皂苷胶囊及其制备方法取苜蓿上柱提取物粉100g、微晶纤维素137.6g、微粉硅胶2.4g，混匀，加工成胶囊1000粒。用于治疗高胆固醇血症和混合型高血脂症，每天3次，每次2粒。45天为一疗程。试验例1本专利技术苜蓿皂苷醇沉提取物对降低血清胆固醇及甘油三脂的作用。实验动物均采用日本大耳白雄兔，体重2.0kg左右，检疫两周后，喂以高胆固醇及高热量饮料，形成家兔高脂血症病理模型。给药组第一批实验剂量苜蓿提取物(以苜蓿总皂苷含量计)为84及168mg/兔/天(以比色法计量)，每组7-15只，给药3.5月。第二批实验剂量为7、28、112、448mg/kg/d(以比色法计量)，每组7-9只，给药3.5月。药效学的显著性试验，均用t检验，比较给药组与对照组之间的差异。结果苜蓿提取物降低TC幅度大于安妥明(56％对40％)。安妥明未能测得ED50，只是以外推法求得表观ED50。降低TG作用，苜蓿提取物具有明显疗效，最大降低TG的幅度大于安妥明(71％对59％)。提高HDL-C/TC作用，苜蓿提取物的药效明显(P＜0.05＝，提高的幅度为造型组的1倍。而安妥明未显示药效。结果见表2、表3表2 苜蓿皂苷醇沉提取物对实验性高脂血症家兔清脂质值的影响(mg/L，X±SD) ()内的数字系动物只数表3 苜蓿皂苷醇沉提取物与安妥明治疗高脂血症家兔对降低血清TC、TG的ED50比较(X±SD) 试验例2苜蓿皂苷提取物降低主动脉壁内TC及TG的药效。苜蓿皂苷提取物84mg及168mg/兔/天，给药3.5月明显降低主动脉壁内脂质含量，见表4。第二批实验中，苜蓿皂苷降低主动脉壁组织中TC和TG疗效显著，见表4、5。表4 苜蓿皂苷醇沉提取物对高脂血症家兔主动脉壁脂质沉着的影响(mg/g组织湿重，X±SD) TC-胆固醇，TG-甘油三脂，FC-游离胆固醇，CE-胆固醇脂表5 苜蓿皂苷醇沉提取物与安妥明对高脂血症家兔主动脉壁脂质含量定量比较(mg/g组织湿重，X±SD) ()内的数字系动物只数权利要求1.一种苜蓿提取物的制备方法，它包括下列步骤取苜蓿干草、切碎，用浓度0-65％的乙醇回流提取1-3次，每次使用原料与溶剂的重量比为苜蓿∶乙醇＝1∶4-12；合并提取液，过滤，滤液回收溶剂，浓缩，得一次浓缩液；将一次浓缩液分别按下述步骤之一或组合进行处理(a).将一次浓缩液喷雾或真空干燥，过筛，得苜蓿粗提取物；(b).一次浓缩液加入乙醇至乙醇浓度达65％-85％，搅匀，静置12-48小时，弃沉淀，上清液回收乙醇，得二次浓缩液，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种苜蓿提取物的制备方法，它包括下列步骤：取苜蓿干草、切碎，用浓度０－６５％的乙醇回流提取１－３次，每次使用原料与溶剂的重量比为苜蓿∶乙醇＝１∶４－１２；合并提取液，过滤，滤液回收溶剂，浓缩，得一次浓缩液；将一次浓缩液分别按下述步骤之一或组合进行处理：（ａ）．将一次浓缩液喷雾或真空干燥，过筛，得苜蓿粗提取物；（ｂ）．一次浓缩液加入乙醇至乙醇浓度达６５％－８５％，搅匀，静置１２－４８小时，弃沉淀，上清液回收乙醇，得二次浓缩液，将经醇沉提取的二次浓缩液喷雾或真空干 燥，过筛，得苜蓿醇沉提取物；（ｃ）．一次浓缩液加入大孔树脂上柱中吸附，用水和５５％－９５％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，得二次浓缩液，将经上柱提取的二次浓缩液喷雾或真空干燥，过筛，得苜蓿上柱提取物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：余从洪，郭江宁，沈惠宾，梁待亮，赵娜，温锦涛，
申请(专利权)人：中山市中健药物研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：44[中国|广东]