本发明专利技术公开了一种从积雪草总苷元出发同时制备积雪草酸、羟基积雪草酸和多米诺积雪草酸的方法。方法的步骤如下：在无机碱的水溶液中加入积雪草总苷元原料，加热充分溶解后过滤除去不溶性固形物，加入无机酸调节ｐＨ值至６～９，冷却、结晶后过滤得结晶物Ⅰ与滤液，结晶物Ⅰ真空干燥得积雪草酸产品；滤液中加入无机酸调节ｐＨ值至２～４，结晶后过滤得结晶物Ⅱ，结晶物Ⅱ自然晾干后用有机溶剂溶解，过Ｃ１８硅胶柱，并用乙腈－水混合溶剂洗脱；洗脱液经ＨＰＬＣ分析后合并成两个馏分，分别经减压浓缩、真空干燥后得多米诺积雪草酸与羟基积雪草酸产品。该方法产品收率和纯度高，可用作原料药，同时工艺过程较简单、所需投资少、易于实现工业化。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种从积雪草总苷元出发同时制备积雪草酸、羟基积雪草酸和 多米诺积雪草酸的方法。
技术介绍
积雪草Ce"te//a os/arica (L.) Urban为伞形科积雪草属植物，在许多 国家和地区传统医药领域中的应用有悠久的历史，我国中医中药对积雪草的内 服和外用已有两千年的历史。积雪草味苦、辛，性寒，归肝、脾、肾、胃经。 古药典记载主要用于治疗湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋血淋、痈肿疮毒、跌打损 伤等病症。现代药理学研究和应用表明，积雪草可用于治疗抑郁症、皮肤创伤、 胃溃疡、传染性肝炎、皮肤病和流行性脑脊髓膜炎等。积雪草的药理作用同它的化学成分是密不可分的。积雪草的化学成分十分 复杂，其主要成分有三萜类、多炔烯烃类、黄酮类和挥发油类等。此外，积雪 草中还含有氯原酸、内消旋肌醇、黄酮醇、脂肪酸、天胡荽碱、甾醇、蜡、叶 绿素、烃类、木脂素类、糖、鞣质和多元酚类等成分。积雪草的化学成分中， 三萜类皂苷及其皂苷元是研究的最早、生物学活性研究较深入的一大类组分， 其中积雪草酸、羟基积雪草酸、多米诺积雪草酸等是其重要的活性成分。积雪草总苷是从积雪草中提取得到的皂苷类物质的总称，主要由三萜苷类 物质组成，其主要成分包括积雪草苷(Asiaticoside， CAS No.:16830-15-2，分子 式为<:481178019，分子量为959.12)、羟基积雪草苷(Madecassoside， CASNo.: 34540-22-2，分子式为C48H7802。，分子量为975.12)和多米诺积雪草苷 (Terminoloside， CAS No.: 125265-68-1，分子式为C48H78O20，分子量为975.12)。积雪草总苷元是指上述皂苷类成分的糖苷键断裂后生成的糖苷配基(苷元)，分 别是积雪草酸(Asiatic acid， CAS No.:464-92-6,分子式为C3GH4805,分子量为 488.70)、羟基积雪草酸(Madecassic acid, CAS No.:18499-41-7，分子式为 C30H48O6，分子量为504.70)、多米诺积雪草酸(Terminolic acid ， CAS No.:564-13-6，分子式为C3QH4806，分子量为504.70)。羟基积雪草苷也叫积雪草 苷A，多米诺苷也叫做积雪草苷B，两者是一对同分异构体，同样羟基积雪草酸 和多米诺酸也是一对同分异构体。它们差异只在于其中一个甲基归属不同，且 两个不同的归属处于邻位关系，性质差异较小。三种苷元的结构式分别如下积雪草酸 羟基积雪草酸 多米诺积雪草酸专利200810162211.X公开了一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的方法， 专利200710164473.X公开了一种从积雪草总苷出发同时制备积雪草苷A与积 雪草苷B的方法，实现了积雪草苷、羟基积雪草苷、多米诺积雪草苷的分离制 备；专利200810163172.5与专利200810163173.X分别公开了碱水解与酸水解 积雪草苷制备积雪草酸的方法，专利200810164182.0与专利200810164213.2 分别公开了碱水解与酸水解羟基积雪草苷制备羟基积雪草酸的方法。以上6个 专利实现了从积雪草总苷出发先分离后水解分别制备积雪草酸、羟基积雪草酸 的完整工艺过程。专利200910095289,9与专利200910095290.1中分别公开了碱水解与酸水 解积雪草总苷制备积雪草总苷元的方法，本专利从积雪草总苷元出发结合结晶 和柱色谱方法同时制备积雪草酸、羟基积雪草酸、多米诺积雪草酸。本专利与 专利200910095289.9与专利200910095290.1结合可以提供一个从积雪草总苷 出发先水解后分离制备积雪草酸、羟基积雪草酸、多米诺积雪草酸的全新工艺 过程。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从积雪草总苷元出发同时制备积雪草酸、羟基积 雪草酸和多米诺积雪草酸的方法。方法的步骤如下1) 在无机碱的水溶液中加入积雪草总苷元原料，加热至30 6(TC充分溶解 后过滤得滤液I;2) 滤液I中加入无机酸调节pH值至6 9，冷却至0 25'C结晶后过滤，分 别得结晶物I与滤液II，结晶物I经真空干燥后得积雪草酸产品；3) 滤液II中加入无机酸，调节pH值至2 4，结晶后过滤得结晶物II;4) 结晶物II自然晾干后用有机溶剂溶解；5) C18硅胶采用湿法装柱，柱子的高径比为4 20，用乙腈一水混合溶剂冲洗柱子；6) 按0.01 0.1g结晶物II/lgC18硅胶的比例上样，乙腈一水混合溶剂以 0.5 3床层体积/h的流速洗脱；7) 洗脱液经HPLC分析后合并成两个馏分，馏分1为多米诺积雪草酸溶 液，馏分2为羟基积雪草酸溶液；8) 馏分l、馏分2分别经减压浓縮、真空干燥后得多米诺积雪草酸与羟基 积雪草酸产品；步骤l)中的无机碱为NaOH或KOH，无机碱的浓度为0.01-0.1 mol/L，每升无机碱的水溶液中积雪草总苷元的加入量为5 60g;步骤2)与步骤3)中的 无机酸为盐酸或硫酸；步骤4)中的有机溶剂为甲醇或乙醇，有机溶剂加入量为 0.1 3 g结晶物11/10 mL有机溶剂；步骤5)与步骤6)中乙腈一水混合溶剂中 乙腈的体积百分比为50~70%。本专利技术结合结晶和柱色谱技术，提供了一种从积雪草总苷元出发同时制备 积雪草酸、羟基积雪草酸、多米诺积雪草酸的方法。该方法产品收率和纯度高 (积雪草酸、羟基积雪草酸和多米诺积雪草酸等三种产品质量含量295%)，可 用作原料药，同时工艺过程较简单、所需投资少、易于实现工业化。 附图说明附图是从积雪草总苷元出发同时制备积雪草酸、羟基积雪草酸和多米诺积 雪草酸的工艺流程简图。 具体实施例方式本专利技术所使用的积雪草总苷元原料采用专利"一种积雪草总苷碱水解制备 积雪草总苷元的方法"(吕秀阳，郑兴芳，李音。 一种积雪草总苷碱水解制备积 雪草总苷元的方法，申请号200910095289.9申请日2009年1月8日)中的 实施例20 (在1L带搅拌和水冷凝管的三口烧瓶中加入0.5 mol/LKOH水溶液 500 mL，放入75'C的恒温水浴中，开搅拌和冷凝水，分3批加入积雪草总苷 原料20 g(总加料时间为45 min)，水解3 h;水解液加入硫酸，调节pH值至2~4， 沉淀后过滤，得沉淀物，沉淀物晾干后称重得8.3 g;收集晾干后的沉淀物加入 124.5 mL甲醇溶解、活性炭脱色、过滤，滤液加入1992 mL水结晶，经过滤 后得结晶物，结晶物再经真空干燥后得5.9g积雪草总苷元产品，产品经HPLC 分析积雪草总苷元的质量含量90.6%。)的方法制备，重复以上过程16次最终 得93g积雪草总苷元，经HPLC分析积雪草总苷元的质量含量为卯.5。/。，其中 积雪草酸的质量含量为29.2%，羟基积雪草酸的质量含量为30.6%，多米诺积雪草酸的质量含量为21.5%。积雪草酸、羟基积雪草酸、多米诺基积雪草酸含量采用高效液相色谱法 (HPLC)测定，采用外标法定量。采用AgilentllOO液相色谱分析系统，分析 条件如下Eclipse XDB—ds反相柱(<D4.6mm x 250mm, 5pm, Agilent);采 用梯度本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从积雪草总苷元出发同时制备积雪草酸、羟基积雪草酸和多米诺积雪草酸的方法，其特征在于，方法的步骤如下： １）在无机碱的水溶液中加入积雪草总苷元原料，加热至３０～６０℃充分溶解后过滤得滤液Ⅰ； ２）滤液Ⅰ中加入无机酸调节ｐＨ值至 ６～９，冷却至０～２５℃结晶后过滤，分别得结晶物Ⅰ与滤液Ⅱ，结晶物Ⅰ经真空干燥后得积雪草酸产品； ３）滤液Ⅱ中加入无机酸，调节ｐＨ值至２～４，结晶后过滤得结晶物Ⅱ； ４）结晶物Ⅱ自然晾干后用有机溶剂溶解； ５）Ｃ１８硅胶采 用湿法装柱，柱子的高径比为４～２０，用乙腈－水混合溶剂冲洗柱子； ６）按０．０１～０．１ｇ结晶物Ⅱ／１ｇ Ｃ１８硅胶的比例上样，乙腈－水混合溶剂以０．５～３床层体积／ｈ的流速洗脱； ７）洗脱液经ＨＰＬＣ分析后合并成两个馏分，馏 分１为多米诺积雪草酸溶液，馏分２为羟基积雪草酸溶液； ８）馏分１、馏分２分别经减压浓缩、真空干燥后得多米诺积雪草酸与羟基积雪草酸产品。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李音，吕秀阳，郑兴芳，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]
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