治疗和/或预防Ⅰ型糖尿病的疫苗及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于治疗和/或预防Ⅰ型糖尿病的疫苗及其应用。该疫苗的活性成分为如下1)或2)或3)：1)Ⅰ型糖尿病蛋白抗原和免疫抑制剂；2)所述Ⅰ型糖尿病蛋白抗原的表位多肽和所述免疫抑制剂；3)所述Ⅰ型糖尿病蛋白抗原、所述Ⅰ型糖尿病蛋白抗原的表位多肽和所述免疫抑制剂；所述Ⅰ型糖尿病蛋白抗原为胰岛素、谷氨酸脱羧酶和胰岛淀粉样多肽中至少一种；所述免疫抑制剂为地塞米松，环孢素A，他克莫司，骁悉，硫唑嘌呤，强的松，早基强的松龙，抗CD4单抗和抗CD3单抗中至少一种。该组合物能促进Treg增殖；促进IL‑10和TGF‑β分泌；控制血糖水平；抑制自身免疫反应性CD8 T细胞杀伤作用；抑制DC细胞成熟；诱导免疫抑制产生，有效治疗I型糖尿病。

Vaccines for the treatment and / or prevention of type I diabetes mellitus and uses thereof

The present invention discloses a vaccine for the treatment and / or prevention of type I diabetes mellitus and the use thereof. The active component of the vaccine are 1 or 2 or 3)))):1 type protein antigen and immune inhibitor; 2) epitope peptide of the type I diabetes protein antigen and the immune inhibitors; 3) the type I diabetes protein antigen and the type I diabetes resistant protein epitopes peptide and the immunosuppressant; the protein antigen of type I diabetes for at least one of insulin, glutamic acid decarboxylase and islet amyloid polypeptide; the immunosuppressant dexamethasone, cyclosporine A, tacrolimus, mycophenolate mofetil, azathioprine, prednisone, prednisolone as early as strong base, anti CD4 antibody and anti CD3 monoclonal antibody in at least a. The composition can promote the proliferation of Treg IL 10 and TGF; promote beta secretion; glycemic control; killing effect of inhibiting autoimmune reaction of CD8 T cells; inhibition of DC cell maturation; induced immunosuppression, effective treatment of type I diabetes.

【技术实现步骤摘要】
治疗和/或预防Ⅰ型糖尿病的疫苗及其应用本申请是申请号为201210108159.6、申请日为2012年4月13日、专利技术创造名称为“治疗和/或预防Ⅰ型糖尿病的药物组合物及其应用”的分案申请。
本专利技术涉及一种用于治疗和/或预防Ⅰ型糖尿病的疫苗及其应用。
技术介绍
世界卫生组织(WHO)的专家预测，糖尿病将是21世纪主要的健康危机，尤其在亚洲，它的威胁比禽流感和艾滋病更加严重。WHO估计全球的糖尿病患者到2010年将增加到两亿人，到2025年将超过3.3亿人。而从目前的情况分析，在未来10年时间里，全球所有病例中有60％都将出现在亚洲。据透露，西太平洋地区(包括中国)和东南亚地区(包括印度)是世界上糖尿病患者最多的地区。在世界糖尿病患者最多的五个国家里，四个在亚洲。人们对脂肪与糖类的摄取量未能得到合理的控制，在老龄化及多方位应激因素影响下，糖尿病的发生率已逐年上升，与20世纪90年代中期相比，国内许多地区平均每年以千分之一的速度递增，我国专家预测糖尿病发病率在近10余年间将呈迅速上升趋势，较WHO的预测更为严峻。据我国国内的调查显示，全国20岁以上的糖尿病患者达2500万人以上，糖耐量异常者不低于3500万人，总计在6000万人以上。其中，富裕地区的发病率显著高于贫困地区，城市发病率普遍高于农村，肥胖者高于正常体重者，高龄者高于低龄者，而且发病年龄也日益趋于年轻化。40岁以下人群新发病例增多，40岁以上的平均患病率约占糖尿病总数87％，患者高峰年龄在50岁～70岁。由于我国人口老龄化逐渐加剧，使糖尿病药物市场潜力进一步加大。Ⅰ型糖尿病是以CD4+T细胞，CD8+T细胞和巨噬细胞浸润胰岛而造成胰岛中产生胰岛素的细胞被破坏为特征的一类自身免疫疾病。它约占所有糖尿病患者的5-10％(ADA[AmericanDiabetesAssociation].1997.Reportoftheexpertcommitteeonthediagnosisandclassificationofdiabetesmellitus.DiabetesCare20:1183-1197；AtkinsonMA,LeiterEH.1999.TheNODmousemodeloftype1diabetes:Asgoodasitgets？Nature5:601-604)。主要发病机理是自身反应的T淋巴细胞破坏了胰腺中产生胰岛素的细胞引起的，以CD4+T细胞，CD8+T细胞和巨噬细胞浸润胰岛而造成胰岛中产生胰岛素的细胞被破坏为特征(AtkinsonMA,MaclarenNK.1994.Thepathogenesisofinsulin-dependentdiabetesmellitus.NEnglJMed331:1428-1436；BenoistC,MathisD.1997.Autoimmunediabetes:Retrovirusastrigger,precipitatorormarker？Nature388:833-834；BjorkS.2001.Thecostofdiabetesanddiabetescare.DiabetesResClinPract54(Suppl1):13-18)。人们已经发现Ⅰ型糖尿病胰岛炎现象，即淋巴细胞浸润胰岛，以后相继在Ⅰ型糖尿病患者中发现了抗胰岛细胞自身抗体(ICA)，对胰岛素、羧肽酶、热休克蛋白产生自主反应的T细胞。实验证明胰岛素B链肽9-23可以结合到II类组织相容性复合体(MHC)等位基因叫I-Ag7。1型糖尿病或胰岛素依赖型糖尿病，是一种T细胞介导性疾病，导致高血糖的胰腺β细胞的自身免疫性破坏的结果。这胰岛B肽可能是一种自身抗原可能引发的疾病的候选(Devendra,D.etal.Diabetes54,2549,2005；Starwalt,S.etal.ProteinEng.16,147(2003)；Lee,L.etal.PNAS102,15995,2005)。进一步实验还证明胰岛素B链15至23氨基酸片段可以被T细胞识别。它在糖尿病病人体内可以被检测到表达干扰素-β和IL-17的CD4+或CD8+T细胞的生产。这种肽可以与B链胰岛素CTL克隆反应，但不会与脾CD8T细胞反应(Hu,C.etal.J.Clin.Invest.117,3857,2007；Amrani,A.etal.Nature406,739,2000)。实验证明胰岛素C链肽也是一个一起自身免疫反应的抗原(Arif,T.I.Tree,T.P.Astilletal.AutoreactiveTcellresponsesshowproinflammatorypolarizationindiabetesbutaregulatoryphenotypeinhealth.TheJournalofClinicalInvestigation,vol.113,no.3,pp.451–463,2004)。至1990年Beakkeskov证明Ⅰ型糖尿病患者血清中存在的64K抗体就是谷氨酸脱羧酶(GAD)自身抗体和自主反应的T细胞，认为GAD是Ⅰ型糖尿病自身免疫反应的关键抗原(Immunemodulationforpreventionoftype1diabetesmellitus.ItamarRaz1,RoyEldor2andYaakovNaparstek.TRENDSinBiotechnology23:128,2005；Enee,E.etal.JImmunol180,5430,2008；龙秀荣，杜文斌，苏钟浦，魏庆琤.儿童糖尿病的谷氨酸脱羧酶抗体检测.中华儿科杂志.1998年第10期)。另外，有大量的报道发现胰岛淀粉样多肽(isletamyloidpolypeptide，IAPP)所形成的淀粉样蛋白沉积，具有破坏胰岛beta细胞膜结构、诱导beta细胞凋亡和损伤beta细胞功能、及激活免疫细胞攻击beta细胞的作用，被认为是糖尿病的重要致病原因之一。最新研究也表明抑制IAPP的聚集可有效减少beta细胞的凋亡，提高胰岛移植的成功率。同时，因此，IAPP已成为糖尿病治疗中一个具有良好前景的靶点。在目前，T1D的治疗主要以外源性胰岛素替代治疗为主，患者需每日注射胰岛素。此方法不仅每天给患者带来极大不方便，而且易发生注射感染或过敏反应；且此治疗方案只能缓解高血糖等临床症状，但常有血糖波动和低血糖发生，也无法改变自体病理性T细胞攻击胰腺的状况，更加无法恢复受损胰腺功能，也就不能控制远期并发症。即使目前最为有效的胰岛素强化治疗方案，也仅能减少并发症发生率的35％～90％，同时患者难免遭受着注射所带来的不便和痛苦。因此，寻求调节和抑制自主免疫反应，改善甚至恢复胰腺正常功能，成为从根本上治疗T1D，解除患者痛苦，提高患者尤其是青少年患者生活质量的必经之路。由于Ⅰ型糖尿病是T细胞引起的自身免疫性疾病，所以在临床上也使用的免疫抑制剂来抑制此类疾病，如：地塞米松(DMS)，普乐可复(FK506)，环孢素A(CsA)，骁悉(MMF)，硫唑嘌呤(Aza)，强的松(Pred)，早基强的松龙(MP)；或利用抗体如：抗淋巴细胞球蛋白(ALG)，抗CD4单克隆抗体(OKT4)，每年治疗费用本文档来自技高网...

【技术保护点】
如下(A)或(B)：(A)用于治疗和/或预防Ⅰ型糖尿病的疫苗；(B)组合物；所述疫苗或所述组合物的活性成分均为如下1)或2)或3)：1)由Ⅰ型糖尿病的蛋白抗原和免疫抑制剂组成；2)所述Ⅰ型糖尿病的蛋白抗原的表位多肽和所述免疫抑制剂的混合物；3)所述Ⅰ型糖尿病的蛋白抗原、所述Ⅰ型糖尿病的蛋白抗原的表位多肽和所述免疫抑制剂的混合物；所述Ⅰ型糖尿病的蛋白抗原为胰岛素、谷氨酸脱羧酶和胰岛淀粉样多肽中的至少一种；所述免疫抑制剂为地塞米松，环孢素A，他克莫司，骁悉，硫唑嘌呤，强的松，早基强的松龙，抗CD4单克隆抗体和抗CD3单克隆抗体中的至少一种。

【技术特征摘要】
1.如下(A)或(B)：(A)用于治疗和/或预防Ⅰ型糖尿病的疫苗；(B)组合物；所述疫苗或所述组合物的活性成分均为如下1)或2)或3)：1)由Ⅰ型糖尿病的蛋白抗原和免疫抑制剂组成；2)所述Ⅰ型糖尿病的蛋白抗原的表位多肽和所述免疫抑制剂的混合物；3)所述Ⅰ型糖尿病的蛋白抗原、所述Ⅰ型糖尿病的蛋白抗原的表位多肽和所述免疫抑制剂的混合物；所述Ⅰ型糖尿病的蛋白抗原为胰岛素、谷氨酸脱羧酶和胰岛淀粉样多肽中的至少一种；所述免疫抑制剂为地塞米松，环孢素A，他克莫司，骁悉，硫唑嘌呤，强的松，早基强的松龙，抗CD4单克隆抗体和抗CD3单克隆抗体中的至少一种。2.根据权利要求1所述的疫苗或组合物，其特征在于：所述表位多肽为单一抗原表位的多肽或多个抗原表位组合而成的多肽。3.根据权利要求1所述的疫苗或组合物，其特征在于：所述胰岛素为人胰岛素、狗胰岛素，或猫胰岛素；所述谷氨酸脱羧酶为人谷氨酸脱羧酶、狗谷氨酸脱羧酶，或猫谷氨酸脱羧酶；所述胰岛淀粉样多肽为人胰岛淀粉样多肽、狗胰岛淀粉样多肽，或猫胰岛淀粉样多肽；所述表位多肽来源于人、狗、猫或化学合成。4.根据权利要求3所述的疫苗或组合物，其特征在于：所述人胰岛素的所述表位多肽的氨基酸序列如序列表中序列1或序列2或序列3或序列12或序列13所示；所述狗胰岛素的所述表位多肽的氨基酸序列如序列表中序列4或序列5或序列12或序列13所示；所述猫胰岛素的所述表位多肽的氨基酸序列如序列表中序列6或序列7或序列12或序列13所示。5.根据权利要求3所述的疫苗或组合物，其特征在于：所述人谷氨酸脱羧酶的所述表位多肽的氨基酸序列如序列表中序列8所示。6.根据权利要求3所述的疫苗或组合物，其特征在于：所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王宾，郑国兴，耿爽，王意忠，俞庆龄，
申请(专利权)人：北京艾棣维欣生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11