人参皂苷Rb 高获取量分离方法技术

本发明专利技术涉及一种环保型人参皂苷Ｒｂ＃－［１］高获取量产业化分离方法，属于中药有效成份的提取分离方法。湿法装柱，取人参总皂苷或西洋参总皂苷或三七总皂苷用少量洗脱剂溶解，上样，加入到稳定好的层析柱上面，洗脱，连续接样，边接样边检测，直到检测为阴性时，结束接样；合并人参皂苷Ｒｂ＃－［１］洗脱液部分，减压回收溶剂，真空冷冻干燥，得人参皂苷Ｒｂ＃－［１］冻干粉，质量检测，产品包装。本发明专利技术的优点在于：工艺简单，生产周期短、无污染、成本低，纯度高，收率多，人参皂苷纯度达到９５％以上，收率达到２０％。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药有效成份的提取分离方法。虽然在上世纪80年代初期，人参茎叶总皂苷的工业化生产就已完成，但时至今日，人参总皂苷中的40余种单体人参皂苷中只有人参皂苷-Re、物理化学方法制备的人参皂苷-Rg3、酶转化法生产人参皂苷-Rh2等3种单体人参皂苷得以实现产业化生产，其他单体皂苷由于分离技术尤其是分离工艺的制约，即以往的溶剂法和层析法，工艺繁琐、效率低下、操作困难、生产成本过高，溶媒易挥发、易燃、有毒，对生产人员的人身安全造成威胁，易对环境造成污染，仅限于实验室少量纯品的制备，所以没有能够实现工厂化生产，未能实现产业化开发。且传统的分离方法，人参皂苷Rb1的收率为10％左右，纯度只能达到90％左右，如需进一步纯化，只能靠高效液相色谱仪。传统的分离方法的洗脱剂需要几种溶剂混合，生产结束后，溶剂回收、分离困难，不能重复使用，如需要分离需要增加生产设备，造成生产成本提高。人参中含有的40余种人参皂苷，每种均有独特的药理作用，人参皂苷Rb1是人参、西洋参中重要的生理活性物质，最新药理研究表明人参皂苷Rb1能激活RNA多聚酶，促进大脑细胞和神经中枢细胞的RNA、DNA蛋白质，可修复受损大脑细胞，使大脑细胞再生，对大脑皮层细胞具有保护作用，可提高思维能力，改善记忆力，提示人参皂苷Rb1具有促智、抗老年痴呆药物开发价值；在肠内某种厌氧菌的作用下，可产生CompandK，简称Rck，而Rck具有明显的抑癌作用，提示人参皂苷Rb1具有抗癌药物开发价值；小鼠ig人参皂苷Rb1，通过提高雄激素水平，激活NO/cGMP通路，而显著改善小鼠性功能，提示人参皂苷Rb1具有开发改善性功能药物价值。本专利技术采取的技术方案是一、装柱取12千克200～300目硅胶，加入水饱和正丁醇，边加边搅拌，排除气泡，浸泡10～15小时，装入到高100厘米层析柱中，36升水饱和正丁醇洗脱稳定，备用； 二、分离取240～400克人参总皂苷或西洋参总皂苷或三七总皂苷上样，少量水饱和正丁醇溶解，加入到稳定好的层析柱上面，水饱和正丁醇洗脱，到色带到达层析柱底端时开始用三角瓶连续接样，每次50毫升，边接样边用薄层色谱检测，直到检测无明显斑点时，结束接样；三、回收得产品合并人参皂苷Rb1洗脱液部分，减压回收正丁醇，得人参皂苷Rb1水溶液，真空冷冻干燥，得人参皂苷Rb1冻干粉，质量检测，产品包装。本工艺生产的人参皂苷Rb1各项理化指标如下性状白色粉末或淡黄色粉末，味微苦熔点197～200℃比旋度+9.0～+13.0°含量测定按干燥品计算，含人参皂苷Rb1大于95.0％。本专利技术的优点在于1、工艺简单，生产周期短。由于人参、西洋参、三七中的B组人参皂苷化学结构相似，极性相近，以往的分离难度很大、工艺繁琐、生产周期长、效率低，仅限于实验室制备少量纯品。本工艺如用总皂苷分离纯化人参皂苷，只需要一次硅胶柱层析即可将人参皂苷Rb1与其他皂苷成分分离，生产周期大大缩短。2、环保、无污染传统的人参皂苷Rb1的分离工艺，多采用三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯等，易挥发、易燃、有毒，对生产人员的人身安全造成威胁，易对环境造成污染，不适合工厂化生产。本工艺采用水饱和正丁醇作为洗脱剂，挥发性和易燃性降低，且无毒，还可回收利用，真正实现环保、无污染生产。3、纯度高，收率多。利用本工艺生产的人参皂苷纯度达到95％以上，收率达到20％。4、成本低本工艺洗脱剂为水饱和正丁醇，回收后可直接用做洗脱剂，反复使用，不需要增加新的溶剂分离设备，生产成本大大降低。实施例二一、装柱取12千克200～300目硅胶，加入24升水饱和正丁醇，边加边搅拌，排除气泡，浸泡12小时，装入到高100厘米层析柱中，36升水饱和正丁醇洗脱稳定，备用；二、分离取300克人参总皂苷上样，少量水饱和正丁醇溶解，加入到稳定好的层析柱上面，水饱和正丁醇洗脱，到色带到达层析柱底端时开始用三角瓶连续接样，每次50毫升，边接样边用薄层色谱检测，直到检测无明显斑点时，结束接样；三、回收得产品合并人参皂苷Rb1洗脱液部分，减压回收正丁醇，得人参皂苷Rb1水溶液，真空冷冻干燥，得人参皂苷Rb1冻干粉，质量检测，产品包装。实施例三一、装柱取12千克200～300目硅胶，加入24升水饱和正丁醇，边加边搅拌，排除气泡，浸泡15小时，装入到高100厘米层析柱中，36升水饱和正丁醇洗脱稳定，备用；二、分离取400克人参总皂苷上样，少量水饱和正丁醇溶解，加入到稳定好的层析柱上面，水饱和正丁醇洗脱，到色带到达层析柱底端时开始用三角瓶连续接样，每次50毫升，边接样边用薄层色谱检测，直到检测无明显斑点时，结束接样；三、回收得产品合并人参皂苷Rb1洗脱液部分，减压回收正丁醇，得人参皂苷Rb1水溶液，真空冷冻干燥，得人参皂苷Rb1冻干粉，质量检测，产品包装。实施例四一、装柱取12千克200～300目硅胶，加入24升水饱和正丁醇，边加边搅拌，排除气泡，浸泡10小时，装入到高100厘米层析柱中，36升水饱和正丁醇洗脱稳定，备用；二、分离取240克西洋参总皂苷上样，少量水饱和正丁醇溶解，加入到稳定好的层析柱上面，水饱和正丁醇洗脱，到色带到达层析柱底端时开始用三角瓶连续接样，每次50毫升，边接样边用薄层色谱检测，直到检测无明显斑点时，结束接样； 三、回收得产品合并人参皂苷Rb1洗脱液部分，减压回收正丁醇，得人参皂苷Rb1水溶液，真空冷冻干燥，得人参皂苷Rb1冻干粉，质量检测，产品包装。实施例五一、装柱取12千克200～300目硅胶，加入24升水饱和正丁醇，边加边搅拌，排除气泡，浸泡12小时，装入到高100厘米层析柱中，36升水饱和正丁醇洗脱稳定，备用；二、分离取300克西洋参总皂苷上样，少量水饱和正丁醇溶解，加入到稳定好的层析柱上面，水饱和正丁醇洗脱，到色带到达层析柱底端时开始用三角瓶连续接样，每次50毫升，边接样边用薄层色谱检测，直到检测无明显斑点时，结束接样；三、回收得产品合并人参皂苷Rb1洗脱液部分，减压回收正丁醇，得人参皂苷Rb1水溶液，真空冷冻干燥，得人参皂苷Rb1冻干粉，质量检测，产品包装。实施例六一、装柱取12千克200～300目硅胶，加入24升水饱和正丁醇，边加边搅拌，排除气泡，浸泡15小时，装入到高100厘米层析柱中，36升水饱和正丁醇洗脱稳定，备用；二、分离取400克西洋参总皂苷上样，少量水饱和正丁醇溶解，加入到稳定好的层析柱上面，水饱和正丁醇洗脱，到色带到达层析柱底端时开始用三角瓶连续接样，每次50毫升，边接样边用薄层色谱检测，直到检测无明显斑点时，结束接样；三、回收得产品合并人参皂苷Rb1洗脱液部分，减压回收正丁醇，得人参皂苷Rb1水溶液，真空冷冻干燥，得人参皂苷Rb1冻干粉，质量检测，产品包装。实施例七一、装柱取12千克200～300目硅胶，加入24升水饱和正丁醇，边加边搅拌，排除气泡，浸泡10小时，装入到高100厘米层析柱中，36升水饱和正丁醇洗脱稳定，备用；二、分离取240克三七总皂苷上样，少量水饱和正丁醇溶解，加入到稳定好的层析柱上面，水饱和正丁醇洗脱，到色带到达层析柱底端时开始用三角瓶连续接样，每次50毫升，边接样边用薄层色谱检测，直到检测无明显斑点时，结束接样；三、回收得产品合并人参皂苷Rb1洗脱液部分，减压回收正丁醇，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种环保型人参皂苷Ｒｂ↓［１］高获取量产业化分离方法，其特征在于：一、装柱：取１２千克２００～３００目硅胶，加入水饱和正丁醇，边加边搅拌，排除气泡，浸泡１０～１５小时，装入到高１００厘米层析柱中，３６升水饱和正丁醇洗脱稳定，备用；二、分离：取２４０～４００克人参总皂苷上样，少量水饱和正丁醇溶解，加入到稳定好的层析柱上面，水饱和正丁醇洗脱，到色带到达层析柱底端时开始用三角瓶连续接样，每次５０毫升，边接样边用薄层色谱检测，直到检测无明显斑点时，结束接样；三、回收得产品合并人参皂苷Ｒｂ↓［１］洗脱液部分，减压回收正丁醇，得人参皂苷Ｒｂ↓［１］水溶液，真空冷冻干燥，得人参皂苷Ｒｂ↓［１］冻干粉，质量检测，产品包装。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：魏春雁，李向高，王秀全，王德清，王光学，
申请(专利权)人：吉林农大珍源参业高科技有限公司，
类型：发明
国别省市：82[中国|长春]