一种佩兰中可抗肠道EV‑71病毒的有效部位及制备方法技术

本发明专利技术属于中药活性成分提取工艺及抗病毒有效部位的分离，主要涉及佩兰抗肠道EV‑71病毒有效成分提取分离的新工艺以及在制药领域的新用途，具体涉及利用抗病毒追踪的方式提取制备佩兰抗肠道EV‑71病毒的有效成分。具体步骤为用水回流提取佩兰，醇沉，抗病毒，溶解沉淀，采用D101型号的大孔吸附树脂对佩兰提取物进行分离，处理D101大孔树脂，上样于大孔树脂，不同浓度的洗脱剂洗脱，每200ml接一瓶每个浓度梯度洗脱至无色并浓缩，每个洗脱液进行抗病毒实验，确定抗病毒有效部位。本发明专利技术采用了抗病毒追踪的方法发现了佩兰中抗肠道EV‑71病毒的有效成分，该有效成分对肠道EV‑71病毒具有较好的抵抗作用，其作为天然提取物具有安全性高等特点。

A site can be effective against intestinal EV virus in 71 Perrin and preparation method

The invention belongs to the extraction and separation of the effective parts of antiviral active ingredients of traditional Chinese medicine, mainly relates to a new process of separating and extracting effective components of anti Perrin intestinal EV virus and 71 new uses in the pharmaceutical field, in particular to the use of antiviral tracking method to extract the effective components of the preparation of anti Perrin intestinal EV 71 virus. The concrete steps of water extraction and alcohol precipitation, Perrin, antivirus, dissolution and precipitation, macroporous resin D101 model to separate Perrin extract, processing D101 macroporous resin sample in macroporous resin, different concentration of the eluent. Every 200ml, pick a bottle of each concentration gradient elution to colorless and concentrated. Each eluate antiviral experiment, determine antiviral fractions. The invention adopts the method of tracking the antiviral effective components found in Perrin EV 71 anti intestinal virus, the active component has better resistance to intestinal EV 71 virus, as a natural extract has the characteristics of high safety.

【技术实现步骤摘要】
一种佩兰中可抗肠道EV-71病毒的有效部位及制备方法
本专利技术涉及中药活性成分生产提取工艺，涉及佩兰抗病毒有效部位提取的新思路新方法以及在制药领域的新用途，具体涉及利用抗病毒追踪的方式提取分离纯化佩兰抗肠道EV-71病毒病毒的有效成分。
技术介绍
最近几年以来世界各地都受到了各种病毒的入侵，比如SARS病毒，甲型H1N1等，每次病毒的爆发都会引起人类的恐慌以及死亡，所以找到合适的抗病毒药物迫在眉睫。佩兰又名鸡骨香、水香、兰草，为菊科植物佩兰EupatoriumfortuneiTurcz.的地上部分，多年生草本，高40-100cm，主要分布于中国、日本和朝鲜，生长于路边灌丛或溪边，喜温暖湿润气候，耐寒、怕旱、怕涝，气温低于19℃生长缓慢，高温高湿季节则生长迅速，对土壤要求不严，以疏松肥沃、排水良好的砂质壤土栽培为宜。佩兰常以全草入药，气味芳香，辛能发散，香能去秽，善于化湿醒脾、化湿解暑，可治疗湿阻脾胃、脘腹胀满、湿温初起，以及口中甜腻等症，有解热清暑、化湿健胃、止呕的作用；佩兰含有挥发油，可抑菌杀菌，能预防和治疗多种夏季皮肤病的发生，还可起到开窍提神、祛风止痛、舒筋活络等作用，有助于治疗鼻塞、神经性头痛、感冒性头痛。肠病毒在病毒学上属于微小病毒科中的肠病毒群，EV-71是目前肠道病毒群中最晚发现的病毒，它的感染性极而强且致病率较高，尤其是在神经系统方面的并发症。EV-71病毒是引起婴幼儿手足口病的主要病原体之一，也可引起无菌性脑膜炎、脑干脑炎和脊髓灰质炎样的麻痹等多种神经系统疾病。佩兰对肠道EV-71病毒具有一定的治疗作用，实验表明佩兰提取的有效成分对肠道EV-71病毒有很好的治疗作用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是明确了佩兰抗肠道EV-71病毒的有效部位，为该有效部位的分离提取提供了一种利用抗病毒追踪的方式制备佩兰抗病毒有效部位的新方法。本专利技术的优点是，本专利技术首次分离出了佩兰中具有抗EV-71病毒的一种有效部位，并专利技术了一种抗病毒追踪的方法对该有效部位进行了制备，此分离方法目的性强，简单节省了大量的人力物力，优于传统的系统分离制备得到的有效部位对EV-71病毒具有较好的治疗作用。本专利技术佩兰抗肠道EV-71病毒的有效部位为水提醇沉的沉淀部位，经大孔树脂分离后，水部位和25%乙醇部位为佩兰抗病毒的有效部位，该有效成分的制备方法，包括如下步骤：（1）取一定量的佩兰药材用10倍的水加热回流提取2次，第一次2小时，第二次1.5小时；（2）合并两次的提取液减压浓缩，浓缩至每毫升药液含有1克的药材，然后加乙醇调节乙醇的浓度为50%，静置24小时。过滤得到沉淀和上清液；（3）将上清液回收乙醇，将沉淀用水溶解，分别进行抗病毒实验。实验显示沉淀的抗病毒效果较好；（4）取一定的D101大孔吸附树脂用95%的乙醇浸泡24小时，之后装柱，用蒸馏水洗至无醇味，然后用5倍柱体积5%的盐酸水溶液进行冲洗浸泡3个小时，之后用蒸馏水冲至PH等于7，再用5倍柱体积的5%的NaOH水溶液进行冲洗浸泡3个小时，之后用蒸馏水冲至PH等于7，备用；（5）取（3）中的沉淀上样于处理好的D101大孔树脂柱，分别用水，25%乙醇，50%乙醇，75%乙醇,进行冲洗，每个洗脱液中每200ml接一瓶，并且冲洗到没有颜色之后再换下一个洗脱液；（6）将上述接到的样品进行抗病毒实验。实验显示水部位和25%乙醇部位抗病毒效果很好。具体实施方式实例1（1）称取一定量的佩兰加10倍量加热回流提取两次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并两次提取液，减压浓缩至每毫升药液含有1克的药材，加乙醇调节溶液乙醇的浓度为50%，静置24小时。（2）将（1）得到的醇沉液减压抽滤，得到沉淀，将沉淀用蒸馏水超声溶解。（3）将（2）得到的溶液上样于处理好的D101大孔吸附树脂，用水进行冲洗，每200ml接一瓶，冲洗至无色。（4）合并（3）中水洗脱部位，浓缩至一定体积，分别进行抗病毒研究。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种佩兰中具有抗肠道EV‑71病毒作用的有效部位以及一种利用抗病毒追踪的方式提取分离纯化该有效成分的工艺方法，其特征在于在每一步的提取分离之后要进行抗病毒追踪出有效部位的所在，首先利用水提醇沉，其次利用D101大孔树脂分离，得到佩兰抗肠道EV‑71病毒有效部位。

【技术特征摘要】
1.一种佩兰中具有抗肠道EV-71病毒作用的有效部位以及一种利用抗病毒追踪的方式提取分离纯化该有效成分的工艺方法，其特征在于在每一步的提取分离之后要进行抗病毒追踪出有效部位的所在，首先利用水提醇沉，其次利用D101大孔树脂分离，得到佩兰抗肠道EV-71病毒有效部位。2.根据权利要求1所述的有效部位其特征在于该有效部位为水提醇沉的沉淀部位，经D101大孔树脂分离后，水部位和25%乙醇部位为佩兰抗病毒的有效部位。3.根据权利要求1所述提取分离方法，其特征在于佩兰水回流提取的料液比为1：10，提取次数两次，提取时间为第一次2小时，第二次1.5小时...

【专利技术属性】
技术研发人员：周长征，刘飞，刘文静，杨稳，颜娓娓，
申请(专利权)人：周长征，
类型：发明
国别省市：山东,37