一种芸苔素内酯的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种污染小，利于工业化生产的芸苔素内酯的制备方法。工艺步骤包括将植物油脂脱臭馏出物或蜂蜡进行皂化，采用分子蒸馏技术除去游离脂肪酸等杂质，得粗品，用大孔吸附树脂进行分离纯化即得。采用本发明专利技术生产芸苔素内酯，污染小，得率高，产品纯度好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，尤其是一种天然芸苔素内酯的制备方法。技术背景芸苔素内酯(brassinolide),又称油菜素内酯，是一种生物活性极强的新型植物生长激素，主要存 在于油菜、大豆、玉米、花生等植物的花粉、种子、根、茎和叶中。虽然已经能人工合成，但研究表明， 天然芸苔素内酯的活性明显优于合成品。日本专利公告说明书特公平5-3843中披露了一种芸苔素内酯的提取方法用乙醚萃取经过皂化的大 豆油脂脱臭馏出物，接着用四氯化碳-甲醇-水萃取，最后应用硅胶柱层析，用苯-甲醇-乙酸溶剂洗脱分离 而得。中国专利说明书CN85102899B中披露了一种制备油菜素甾醇类的方法将蜂蜡皂化，用氯仿或石油 醚萃取，皂化液调PH值，用氯仿、甲醇等处理，最后采用髙效液相色谱精制。现有技术中，大量的使用了苯、四氯化碳、氯仿等毒性较大的有机溶剂，容易对操作者造成伤害，对 环境造成污染采用硅胶柱层析、高效液相等方法进行分离、精制，成本高，周期长，不利于工业化生产。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种污染小，利于工业化生产的芸苔素内酯的制备方法。本专利技术所提出的制备方法如下将植物油脂脱臭馏出物或蜂蜡用碱醇溶液皂化后，回收溶剂，残液加入到分子蒸馏器中进行分子蒸馏 处理，除去游离脂肪酸等杂质，得到芸苔素内酯粗品上述粗品，用大孔吸附树脂柱吸附，并用低级醇洗脱，收集洗脱液；将上述洗脱液回收溶剂并浓縮，冷藏，析出结晶，滤过，滤渣洗涤、干燥，即得。该专利技术采用的原料主要是植物油脂脱臭馏出物或蜂蜡，其中植物油脂脱臭馏出物包括大豆油脂脱臭馏 出物、花生油脂脱臭馏出物、菜籽油脂脱臭馏出物、玉米油脂脱臭馏出物等。该专利技术中的碱醇溶液主要是指氨氧化钾或氢氧化钠的甲醇溶液，浓度优选lmol/L。该专利技术中皂化的反应条件为常规条件，优选75土3'C温度下搅拌3小时。该专利技术中分子蒸馏处理的条件为压力《133Pa,蒸发面温度100-300'C:优选压力《13.3Pa，蒸发 面温度100-250'C,尤其优选压力1.5Pa，蒸发面温度230'C 。该专利技术中采用的大孔吸附树脂为常规使用的型号与规格，优选D101型、AB-8型、HPD"700型、H-50 型、CD-180型，尤其优选CD-180型，该专利技术中用于洗脱树脂的的低级醇主要是指甲醇或乙醇，体积百分比浓度为40-90%,优选75%。本专利技术所提出的方法采用分子蒸馏技术，避免了有机溶剂的大量使用，环保安全；采用大孔吸附树脂 进行分离，材料能反复使用，生产成本低，便于工业化操作。采用本专利技术生产芸苔素内酯，得率高，产品纯度好。下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下述实施方式。具体实施方式实施例1:将10Kg大豆油脂脱臭馏出物用40Kg的氧氧化钾甲醇溶液(lmol/L)在75士3'C搅拌3小时进行皂化反应，减压回收甲醇至尽，加入到分子蒸馏器中以压力1.5Pa 、蒸发面温度23CTC进行分子蒸馏处理， 除去游离脂肪酸等杂质，得到芸苔素内酯粗品上述粗品加入95% (V: V)乙醇溶解，以5Kg/小时的速度 流过CD-180大孔吸附树脂柱，以75% (V: V)乙醇洗脱，收集30Kg洗脱液，回收溶剂并浓缩，置4'C冷 库中冷藏24小时，析出结晶，滤过，滤渣洗涤、干燥即得芸苔素内酯4.1g。按下述方法检测，所得产品 的纯度达到99. 0%。HPLC检测方法如下1、 色谱条件色谱柱Shim-Pack VP-0DS 15cmX4.6 mm; 流动相乙腈-水(77: 28， V: V): 流速1. 0mL/min:2、 检测波长222nm 柱温40'C。 测定方法取对照品适量，制成0. lmg/mL的甲醇溶液,取相应量的样品,制成甲醇溶液,各取10W,注入液相色谱 仪，按峰面积外标法计算即得。实施例2:将10Kg大豆油脂脱臭馏出物用40Kg的氢氧化钾甲醇溶液(lmol/L)在75土3TC搅拌3小时进行皂化 反应，减压回收甲醇至尽，加入到分子蒸馏器中以压力133Pa 、蒸发面温度300t:进行分子蒸馏处理， 除去游离脂肪酸等杂质，得到芸苔素内酯粗品；余方法同实施例1。所得芸苔素内酯3. 5g,纯度达到96. 5%。实施例3:将10Kg大豆油脂脱臭馏出物用40Kg的氢氧化钾甲醇溶液(lmol/L)在75士3'C搅拌3小时进行皂化 反应，减压回收甲醇至尽，加入到分子蒸馏器中以压力0.5Pa 、蒸发面温度IOO'C进行分子蒸馏处理， 除去游离脂肪酸等杂质，得到芸苔素内酯粗品；余方法同实施例1。所得芸苔素内酯2. 6g，纯度达到95. 4%。实施例4:将10Kg大豆油脂脱臭馏出物用40Kg的氢氧化钾甲醇,(lmol/L)在75土3'C搅拌3小时进行皂化 反应，减压回收甲醇至尽，加入到分子蒸馏器中以压力13.3Pa 、蒸发面温度250'C进行分子蒸馏处理， 除去游离脂肪酸等杂质，得到芸苔素内酷粗品余方法同实施例1。所得芸苔素内酯3. lg，纯度达到97.6%。实施例5:将10Kg大豆油脂脱臭馏出物用40Kg的氨氧化钠甲醇溶液(lmol/L)在75士3'C搅拌3小时进行皂化 反应余方法同实施例1。所得芸苔素内酯4. 3g，纯度达到98.2%。实施例6:将10Kg大豆油脂脱臭馏出物用40Kg的氢氧化钾甲醇溶液(lmol/L)在75土3'C搅拌3小时进行皂化 反应，减压回收甲醇至尽，加入到分子蒸馏器中以压力1.5Pa 、蒸发面温度230'C进行分子蒸馏处理， 除去游离脂肪酸等杂质，得到芸苔素内酯粗品上述粗品加入95% (V: V)乙醇溶解，以5Kg/小时的速度 流过CD"180大孔吸附树脂柱，以4(m(V: V)乙醇洗脱，余方法同实施例l。所得芸苔素内酯2.1g,纯度达到94. 6%。 实施例7:将10Kg大豆油脂脱臭馏出物用40Kg的氢氧化钾甲醇溶液(lmol/L)在75土3'C搅拌3小时进行皂化 反应，减压回收甲醇至尽，加入到分子蒸馏器中以压力1.5Pa 、蒸发面温度230'C进行分子蒸馏处理， 除去游离脂肪酸等杂质，得到芸苔素内酯粗品；上述粗品加入95先(V: V)乙醇溶解，以5Kg/小时的速度 流过CD-180大孔吸附树脂柱，以90% (V: V)乙醇洗脱，余方法同实施例l。所得芸苔素内酯2.3g,纯度 达到95. 4%。实施例8:将10Kg大豆油脂脱臭馏出物用40Kg的氢氧化钾甲醇溶液(lmol/L)在75土3'C搅拌3小时进行皂化 反应，减压回收甲醇至尽，加入到分子蒸馏器中以压力1.5Pa 、蒸发面温度230'C进行分子蒸馏处理， 除去游离脂肪酸等杂质，得到芸苔素内酯粗品上述粗品加入甲醇溶解，以5Kg/小时的速度流过CD~180 大孔吸附树脂柱，以75先(V: V)甲醇洗脱，余方法同实施例l。所得芸苔素内酯3. 8g,纯度达到97. 6%。实施例9:将10Kg大豆油脂脱臭馏出物用40Kg的氢氧化钾甲醇溶液(1啦1/L)在75土3'C搅拌3小时进行皂化 反应，减压回收甲醇至尽，加入到分子蒸馏器中以压力1.5Pa 、蒸发面温度230'C进行分子蒸馏处理. 除去游离脂肪酸等杂质，得到芸苔素内酯粗品上述粗品加入甲醇溶解，以5Kg/小时的速度流过Cl>"180 大孔吸附树脂柱，以4W(V: V)甲醇洗脱本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种芸苔素内酯的制备方法，其特征在于所述的方法包括下列几个步骤：将植物油脂脱臭馏出物或蜂蜡用碱醇溶液皂化后，回收溶剂，残液加入到分子蒸馏器中进行分子蒸馏处理，除去游离脂肪酸等杂质，得到芸苔素内酯粗品；上述粗品，用大孔吸附树脂柱吸附，并用低级醇洗脱，收集洗脱液；将上述洗脱液回收溶剂并浓缩，冷藏，析出结晶，滤过，滤渣洗涤、干燥，即得。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，范淦彬，杨成东，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]