一种海星皂苷类抗肿瘤化合物制造技术

本发明专利技术提供了一种海星皂苷类化合物，分子式为Ｃ↓［４５］Ｈ↓［７４］Ｏ↓［２２］Ｓ↓［２］Ｎａ↓［２］。采用波谱解析和化学手段，确定该化合物的化学结构为（２０Ｒ，２４Ｓ）－６α－Ｏ－［３－Ｏ－甲基－β－Ｄ－吡喃奎诺糖基－（１→２）－β－Ｄ－吡喃木糖基－（１→３）－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基］－５α－胆甾－９（１１）－烯－３β，２４－二硫酸钠盐（（２０Ｒ，２４Ｓ）－６α－Ｏ－［３－Ｏ－ｍｅｔｈｙｌ－β－Ｄ－ｑｕｉｎｏｖｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ－（１→２）－β－Ｄ－ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ－（１→３）－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］－５α－ｃｈｏｌｅｓｔ－９（１１）－ｅｎ－３β，２４－ｄｉｓｕｌｆａｔｅ　ｄｉｓｏｄｉｕｍ　ｓａｌｔ）。体外抗肿瘤试验表明，该化合物对Ｋ－５６２人白血病和ＢＥＬ－７４０２人肝癌等８种肿瘤细胞有明显的抑制作用。该化合物在体外试验中还能够促进微管蛋白聚合。本发明专利技术可为研制新的抗肿瘤药物提供先导化合物，可望成为治疗癌症的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，是从海洋生物中分离有抗痛活性的化合物，具体地说jt^面包 海星中提取分离到的一种海星皂苷类抗肿瘤化合物。
技术介绍
海星(stofeh)属觫皮动物门海星纲，现存约1500种，为海生底栖动物，分布广泛.近二十 年来，国外关于海星活性化学成分特别是海星甾体皂苷的研究非常活跃，对海星皂苷的研究已 魏邻余种结构新穎的化合物的发现。这些海星皂苷具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、Na+-K、ATP 酶抑制、抗澳疡、溶血等多种多样的药理活性。海星皂苷(asterosaponins)为海星甾体皇苷中的一 类特定的化合物，其结构特征为具有AW"-3p,6ft-二羟基甾体母核，并在3位硫酸化，6位糖 募化》苷元賴链至少有1个位置被氧化，寡糖基一般由5或6个单糖构成，并具有相似的连接 方式和连接位点，寡糖基由3个单糖构成的情况非常少见(汤海峰，易杨华，张淑l&，等.海星皂 苷的研究进展-中国海洋药物，2004， 23(6): 48-57和forizzi M、 De Marino S， Zd，o R Steroidal 0iig嘴lycosides fromlhe a幼eroidean. CurreatOfgiric Chen、 2001， 5(9): 951)。我国南海生物资源极为丰富，是世界上海星集中分布的海域之一，特别是面包海星(C"fcto ffiww^uifww)的l^量巨大。我们从采自三亚海域的面包海星中分离鉴定了 16种具有生物活性 的海星菪苷，包括ll种新化合物，这是国内外首次对面包海星中的海星皂苷类化合物进行分离 和鉴定》其中一种新化^f CEDS对K-562人白血病和BEL-7402人肝癌等8种肿瘤细胞有明 显的抑制作用，其化学结构和抗胂瘤活性未见有过报道。对l类创新药物(单体化合物药物辦制的大量实践和报道证实化学结构决定药理作用，新 的化学结构预示着更强的生物活性、更低的毒副作用或更适于在临床使用。因此，迫切需要发 現更多不同类别的新的化合物，以供进一歩开发为高效低毒的抗癌新药。
技术实现思路
本专利技术的目的旨在提供一种具有抗肿瘤作用的、提取分离自面包海星的海星皂苷类化合物a本专利技术的目的是这样实现的，一种海星皂苷类抗肿瘤化合物，其特征是式l所示化合物<formula>formula see original document page 3</formula>式I上述结构其化学名称为(20/ 2必>601力-[3"0-甲基4-1>吡喃奎诺糖基><1—2沖-EMt喃木糖 基<1—3H^EV吡喃葡萄糖基p5ot-胆甾-9(11>烯-3&》二琉酸钠盐((20iU45>6cfO-[3^-9(11Hd"3^24^sulfetedisodi咖salt),是从面包海星中提取分离的新的海星皂苷类化合物，以下 简称其为CEDS 所述的从面包海星中提取分离1M式I化合物CEDS的方法，其步骤如下:以新鲜采集的面包海星为原料，,经剪碎后，按重量体积比加入3 5倍原料重的95%乙 醇，回流提取3次，每次2 4小时；合并提取液，回收溶剂，得乙醇提取物，提取物分敢于按 重量fl^比3倍的水中，分别用和水等体积的石油醚萃取3次，萃取后的水相再分别用与水等 # 的正丁醇萃取5次，合并正丁醇萃取液，蒸千得到总苷提取物；总苷提取物应用硅胶柱层 析,以体积比为2:1:0-力:6:l的氯仿-水饱和的正丁醇-甲醇混合溶剂洗脱,得到含式l化合物CEDS 的海星皂舒混合物-，该海星皂苷混合物应用S^>hadexLH-20凝胶ttJg析和中压液相柱层析纯化， 均分别采用^^比为i:l的甲醇-水混合^^i洗脱，合并含式I化合物CEDS的流份，再经高效 液相色谱仪分离纯化，用体积比为48:52 49:51的甲醇-水混合溶剂为流动相洗脱，得到式l化 合物CEDS的纯品。所述的从面包海星中提取分离式I化合物CEDS的方法，除应用常规的溶剂提取、溶剂萃 取和各种色谱分离技术外，在应用硅胶柱层析方法从总苷提取物制备含式I化合物CEDS的海 星變-苷混合物时，对该海星皂苷混合物的确定是采用如下手段来检査的以硅胶薄层层析检溯， M柳比为12:3:5的正丁醇-乙酸-水混合溶剂或^lR比为80:18:2的氯仿-甲醇-水混合溶剂展 开，收集Rr值在0_20~0_25处显示紫红色斑点的流份，即为含式I化合物CEDS的海星皂苷混 合物。所述的式1化合物CEDS对K-562人白血病、BE1"402人肝癌等S种不同的肿瘤细胞株均 显示显著的抑制作用，半数有效抑,度(IC5o值难0.7 12_2 funol/L之间。所述的式I化^CEDS在采用两步法微管蛋白聚合筛选模型(Hu W, Dong H， Li仏Hu XT, Han GJ， Qu YB. A )righ~throughput modd for screwing anti-tumor agents capable of promoting polynierizatkHi of加lMi]in in vitro. Acta Pbarmactd Sin, 2(M>4， 25(6): 775-782)进行的体外试验中，显 示显著的促进微管蛋白聚合作用，在10將/mL浓度时的终点促聚指数(A值)为4(Bi,动力学促 聚指数(A值)为145%,而阳性对照药物紫杉醇在10吗/mL浓度时的户e值和A值分别为31%和 100%,表明CEDS^JT傲管蛋白聚合的作用强于紫杉醇。所述的式I化合物CETO!在作为药物使用时，可以是单独使用，也可以是与其他成分混合在临床应用时，以常规的制剂工艺，单独使用或与其他药物配合制备成在临床上可以使用 的各种不同剂型的药物，如注射剂、或散剂、或丸剂、或胶囊剂、或片剂、或微囊剂、或软胶 囊剂、或膜剂、或膏剂、或酊剂、或颗粒剂、或气雾剂等。本专利技术的特点是-式化合物CEDS是从面包海星中提取分离的新的海星皂苷类化合物，而且结构特征非常 罕见它是首次发现的具有硫酸化儺链的海星皂苷类化合物，也是非常少见的寡糖基由3个单 ttM成的海星阜苷类化合物，它所含有的甲氧基单糖在海星皂苷类化合物中也不多见。式I化 ^tf CEDS对多种不同肿瘤细胞株的显著抑制作用也表明其可以迸一步作为新的抗肿瘤药物进 行研究开发。通过促进徵管蛋白聚合作用机制发挥抗癌作用的紫杉醇在临床的成功应用，使得 微管稳定剂成为国内外抗痛药物研究的主要热点之一，但目前从天然界发现的具有该作用的化 ^J非常少，迫切需要发现更多不同类别的新的化合物，以供进一步开发为高效低毒的^t痛新 药.式1化合物CEDS能够促进微管蛋白聚合，并且该作用强于紫杉醇，显示其具有良好的开 发潜力。本专利技术从面包海星中通过提取、分离纯化得到式I化合物CEDS，该化合物可用于制备治 疗Jl^痛症的药物，为研制新的抗肿瘤药物提供了先导化合物。具体实錄方式下面结合具体实施例来说明本专利技术的实质，应理解,这些实施例仅用于证实本专利技术而不用 于跟制本专利技术的菘围-下述实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，或按照SU&厂商所建i交的条件。 化^H的提取和分离制备本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种海星皂苷类抗肿瘤化合物，其特征在于化学结构式如下：　＊＊＊　式１　上述式１结构的化学名称为（２０Ｒ，２４Ｓ）－６α－Ｏ－［３－Ｏ－甲基－β－Ｄ－吡喃奎诺糖基－（１→２）－β－Ｄ－吡喃木糖基－（１→３）－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基］－５α－胆甾－９（１１）－烯－３β，２４－二硫酸钠盐（（２０Ｒ，２４Ｓ）－６α－Ｏ－［３－Ｏ－ｍｅｔｈｙｌ－β－Ｄ－ｑｕｉｎｏｖｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ－（１→２）－β－Ｄ－ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ－（１→３）－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］－５α－ｃｈｏｌｅｓｔ－９（１１）－ｅｎ－３β，２４－ｄｉｓｕｌｆａｔｅ　ｄｉｓｏｄｉｕｍ　ｓａｌｔ），以下简称其为ＣＥＤＳ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：汤海峰，程光，文爱东，巫军，杨志福，赵越平，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]