用于释放胞毒剂和其组分的方法技术

本发明专利技术涉及治疗肿瘤疾病的方法，该方法包括：ａ）对感染宿主施用治疗有效量的抗体－酶结合物；然后ｂ）对感染宿主施用治疗有效量的底物－胞毒剂，其中底物是对于酶的底物。本发明专利技术也公开了抗体－酶结合物和底物－胞毒剂化合物。（*该技术在2013年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】多年来，已经开发了用于治疗肿瘤疾病的许多胞毒药物。所有这些有用的药物的主要缺点是对于患者所有细胞存在着无差别的毒性，因此限制了该药物的剂量，并从而限制了它的效力。胞毒剂以潜在的形式作用于肿瘤疾病的部位上。因此，在减少或可能抑制该药物的不希望的副作用方面，本专利技术提供了标记的优点。由于进一步减少了有害副作用的结果，通过增加剂量来服用胞毒剂，使肿瘤部位上的药物产生更高的浓度。一方面是，本专利技术提供了用于治疗肿瘤疾病的方法，其方法包括A)对感染宿主施用治疗有效量的抗体-酶结合物;然后B)对感染宿主施用治疗有效量的底物-胞毒剂，其中底物是对于酶的底物;其中抗体-酶结合物和底物-胞毒剂在下面的定义中进行详述。另一方面，本专利技术包括在下面定义中进行详述的抗体-酶结合物和底物-胞毒剂。附图说明图1描述了在按器官重量分离的每个器官中，以注射剂量%表示的在裸体小鼠中抗-KSI/4-β-内酰胺酶结合物的生物分布。图2描述了在每个器官中以注射剂量表示的图1的相同的测量。图3说明了通过抗CEA-β-内酰胺酶结合物和实施例11的前体药物化合物的结合在裸体小鼠中抑制T380肿瘤的生长。治疗经过3周，在3个过程中服药。每个过程包括35μg结合物，72小时后，4日剂量为1mg前体药物/Kg体重。图4描述除了用4日剂量为0.25mg前体药物/Kg体重的方法服用前体药物之外，还描述了如图3关于T380肿瘤的相同结合物前体药物的结合的相似的抑制作用。图5是通过抗KSI/4抗体-β-内酰胺酶结合物或抗CEA-β-内酰胺结合物和实施例11的前体相结合来比较在裸体小鼠中抑制LS174T肿瘤的生长。图6描述了在裸小鼠中对于LS174T肿瘤的抗TAG72-β-内酰胺酶结合物和实施例11的前体药物相结合的抑制作用。图7是通过本专利技术的抗CEA-β-内酰胺酶结合物和实施例11的前体药物相结合的关于抑制T380肿瘤生长的结合物的剂量的作用的比较。本专利技术的一方面是式抗体-酶 Ⅰ的酶抗体结合物其中酶与式底物-胞毒剂 Ⅱ的化合物(该化合物在下面描述)反应，以致使底物从胞毒剂中分离出来;并且抗体与靶组织进行络合。本专利技术的抗体与一种或多种靶细胞的抗原相络合。靶细胞是肿瘤组织(或者是良性的或者是恶性)的一部分。这类靶细胞的实例包括鳞皮病、多鳞癌细胞、腺癌细胞、小细胞癌细胞、glyoma细胞、melonoma细胞、肾细胞癌细胞、转移细胞癌细胞、肉瘤细胞、支持肿瘤血管的细胞和淋巴样肿瘤的细胞例如白血病和淋巴瘤。抗体可以选自包括IgG、IgA、IgM、IgE和IgD的任何种类或小类的免疫球蛋白。起源的种类不是关键的，只要抗体与靶细胞络合。 在本
中，单克隆抗体是用于本专利技术中最优选的。然而，多克隆抗体也不排除在外。新型抗体是嵌合抗体，其是在试验室通过重组体技术来制备的，所说的重组体技术允许表达修饰的DNA，该DNA编码了任何所需抗体的结合抗原的区，也编码了任何其他所需氨基酸顺序。因此，嵌合抗体(其中一部分由一种物种衍生而来，而另一部分由不同物种衍生而来)可以得到并可用于本专利技术。另外，抗体的起源和性质不是关键的，只要它对准要治疗的靶细胞，并且本身对患者是没有毒性的。那些普通技术人员可以容易地制备具有选择物抗体的酶结合物，并且对它们进行评价。如何选择这类抗体将在下面详细讨论。认为，正确地选择抗体的片段具有与抗体相同的作用。因此，在本专利技术的实施中，抗体的片段例如F(ab′)2、F(ab′)和单一区域的抗体(VH区或dAbs)和特别是F(ab′)片段(识别与要治疗的细胞结合的抗原)可以与完整的抗体一样有用。(dAbs由Ward E.等人描述在Nature，341，p.544，1989中;由Orlandi R.等人描述在Proc.Natl.Acad.Sci.，(USA)86，p.3833，1989中。)大量的抗体对于免疫学家来说都可应用于本专利技术。另外有用的抗体公开在每一种相关的杂志的发行物中。在本专利技术的实施中，不可能并且也完全不必要给出可应用的抗体的一览表。普通技术的免疫学家和化学家完全能够从例如American Type Culture Collection (ATCC)(Rockville，Maryland，U.S.A)，和Linscott′s Directory of Immunological and Biological Reagents(由Linscott′s Directory公布，40 Glen Drive，Mill Valley，California，U.S.A.，94941)的产品目录的来源中选择抗体。因此，本
的技术人员选择在该靶细胞上实际上抗任何抗原的抗体是简单的事情。另一种方法是，用于产生这类抗体的所必需的杂交瘤可通过ATCC或Northern Regional Research Laboratories(NRRL)(U.S.Department of Agriculture，Peroia，Illinois，U.S.A)和其它细胞系收集得到。一些现在已知的抗体对于本专利技术是特别有意义的，一种优选的有特效的抗体是由ATCC杂交瘤HB9682产生的L/IC。另一种优选的是由ATCC杂交瘤HB9620产生的。上述的抗体(称为CEM231.6.7)与通过几种类型的肿瘤细胞表达的合适的癌胚抗原络合。近来，嵌合抗体CEM231.6.7已描述在美国专利申请号07/165，856和07/272，577(申请日分别为1988年3月3日和1988年11月17日)。该抗体也详述于Beidler C.B.等人的J.Immunology(141，pp.4053-4060，1988)中。与MAT65 T-细胞标记物反应的抗体是T-101抗体。该T-101抗体是由ATCC杂交瘤＃CRL8023产生的，并描述于美国专利号4，675，386中。另一种有意义的抗体是KSI/4，其首先由Varki等人公开于Cancer Research(44，PP.681-686，1984)中。包括单克隆抗体KSI/4的不同区的编码顺序的一些质粒存在于沉积物上，并可由Northern Regional Research Laborotory得到。该质粒可通过那些普通的技术人员使用，以便用重组体方法产生嵌合抗体，该抗体结合到在腺癌细胞上具有高密度的细胞表面的抗原上。这类抗体的结构详述于美国专利申请号07/184，522(申请日为1988年4月21日)中。下述的质粒涉及KSI/4。由E.coli K12 MM294/PGKC2310、NRRLB-18356分离出来的质粒PGKC2310为轻链的编码顺序，信号肽与轻链结合的和5′和3′未转译区的编码顺序。由E.coli K12 MM294/PG2A52、NRRL B-18357中分离出来的质粒PG2A52为重链的编码顺序，信号肽与重链结合的和5′和3′未转译区的编码顺序。由E.coli K12 DH5/CHKC2-6、NRRL B-18358分离出来的质粒CHKC2-6为轻链可变区的编码顺序，信号肽与轻链结合的编码顺序和人的IgG的轻链不变区的编码的顺序。由E.coli K12 本文档来自技高网...

【技术保护点】
下式的化合物：＊＊＊胞毒剂式中ｚｚ为０或１，Ｒ↓［１］为由Ｃ↓［１］至Ｃ↓［３０］烷基衍生而来的酰基，Ｒ↓［２］为氢、有机或无机阳离子、羧基保护基，或无毒代谢不稳定的酯形成的基；和式中胞毒剂为下式的化合物：＊＊＊。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：VJ陈，LN容海姆，DL迈耶，TA谢泼德，
申请(专利权)人：海布里特克有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]