二核苷-5’,5’-焦磷酸酯制造技术

本发明专利技术描述了选自胸腺嘧啶－３′－叠氮基－２′，３′－二脱氧－Ｄ－核苷、５－氟尿嘧啶－２′－脱氧－Ｄ－核苷、尿嘧啶－３′－叠氮基－２′，３′－二脱氧－Ｄ－核苷、鸟嘌呤－２′，３′－二脱氧－Ｄ－核苷、次黄嘌呤－２′，３′－二脱氧－Ｄ－核苷、胞嘧啶－２′３′－二脱氧－Ｄ－核苷、和腺嘌呤－２′，３′－二脱氧－Ｄ－核苷的非天然存在核苷的５′，５′－焦磷酸酯，以及它们的生产和作为抗肿瘤和抗逆转录病毒感染，包括ＨＩＶ感染的治疗剂的用途。化合物可以作为药物组合物的活性发生成分或作为包藏在生物载体如转化红细胞中的前药来给药，从而导向引起病理学疾病产生的特定细胞群。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及式(I)的二核苷-5′，5′-P1，P2-焦磷酸酯 其中符号A和B各自独立地代表选自胸腺嘧啶-3′-叠氮基-2′，3′-二脱氧-D-核苷、5-氟尿嘧啶-2′-脱氧-D-核苷、尿嘧啶-3′-叠氮基-2′，3′-二脱氧-D-核苷、鸟嘌呤-2′，3′-二脱氧-D-核苷、次黄嘌呤-2′，3′-二脱氧-D-核苷、胞嘧啶-2′，3′二-脱氧-D-核苷、和腺嘌呤-2′，3′-二脱氧-D-核苷的非天然存在核苷的5′-C′基团；符号X各自独立地代表氧或硫；符号R和R1各自独立地代表氢或从1至10个碳原子的烷基基团；以及其中R和/或R1代表氢的式(I)化合物与提供生物学上可接受的阳离子的碱的加成盐。本专利技术还包括制备式(I)的二核苷-5′，5′-P1，P2-焦磷酸酯的方法，将它们包藏在生物载体特别是红细胞中从而将上述化合物导向特定部位或参与病理学疾病如肿瘤或病毒感染的发展或引起这些疾病如肿瘤或病毒感染的细胞群的方法，以及含有包藏式(I)的二核苷-5′，5′-P1，P2-焦磷酸酯的所述生物载体，特别是红细胞的组合物。包藏生物活性分子的红细胞膜化学修饰是一种向靶细胞传递生理活性形式的被包藏分子的有利方法。参见，例如-De Flora A.et al.“作为载体和生物反应器的工程化红细胞”，免疫学年，Basel，Karger，(1993)，第7卷，168-174。-Tonetti M.等人，“负载阿霉素的自体红细胞的肝导向”欧洲癌症研究杂志，(1991)，第27卷，No.7,947-948。-Zocchi E.等人，“作为释放抗赘生物药物5-氟-2’-脱氧尿苷的人和鼠源红细胞”，生物科学进展，(1991)，第8卷，Pergamon出版社plc.51-57。-De Flora A.等人，“被囊性5-氟-2’-脱氧尿苷-5’-单磷酸在人体红细胞中向抗赘生物药物5-氟-2’-脱氧尿苷的转化”。美国国家学术科学汇编，(1988)，第85卷，3145-3149。-De Flora A.等人，“载体红细胞技术一种用于诊断和治疗的多用途工具”，诊断学中的生物技术，Elsevier科学出版社B.V.，(1985)，223-236。上述文章和出版物引用了本领域中进一步的文献。下列专利文献也公开了将生物活性物质，特别是磷酸化化合物包藏在转化红细胞中的方法和适于其用途的组合物，以及诱导动物产生的细胞，尤其是红细胞选择性地挑出其它细胞并与之融合的方法国际专利申请公开号92/22306，美国专利号4,931,276，美国专利号4,652,449以及欧洲专利申请公开号298280。在本说明书和权利要求书中，“非天然存在核苷的5′-C′基团”一词是指通过除去戊糖基团中5′位置上的羟基从非天然存在的核苷衍生的基团。“符号X各自独立地代表氧或硫”一语是指每个符号X可以代表氧或硫原子，而与其它假设的含义无关。根据本专利技术的优选实施方案，所有符号X代表氧或者其中只有一或两个代表硫而其它代表氧。在后一种情况下，最优选的式(I)化合物是其中代表硫的符号X通过双键与磷原子直接相连或者是基团XR或(和)XR1的一部分的那些化合物。术语“生物学上可接受的阳离子”是指适用于药学实际的阳离子并且包括那些对式(I)化合物的生物载体无毒并适合于将其包藏到所述载体的过程的阳离子。当符号R和/或R1独立地代表氢时，式(1)化合物可以与提供生物学上可接受的阳离子的碱形成加成盐。可以用式(I)的化合物代表这样的盐，其中基团XR和/或XR1中的符号X代表阴离子形式的氧和/或硫原子(即O-和/或S-)并且符号R和/或R1代表生物学上可接受的阳离子。药学实际应用中可接受的阳离子是从碱或碱土金属如钠、钾和镁，铵，以及脂肪族、脂环族和芳香族胺如甲胺、二甲胺、三乙醇胺、呱啶、哌嗪、N-甲基哌啶、N-甲基哌嗪、吗啉和甲基吡啶衍生的阳离子。适于药学实际应用以及包藏过程的生物学上可接受的阳离子是，例如，Na+和K+。术语“从1至10个碳原子的烷基基团”是指直链或支链烷基残基，其可选择性地含有不饱和和/或一或两个选自羟基、巯基、氯、碘、氟、溴、氨基、(C1-C4)烷基氨基、二-(C1-C4)烷基氨基、(C1-C4)烷氧基和(C1-C4)烷硫基的取代基。优选地，上述术语是指1至4个碳原子的烷基基团如甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基、1-甲基丙基、1，1-二甲基乙基、和2-甲基丙基，其可选择性地含有一或两个如上所述的取代基。进一步优选的本专利技术化合物组包括其中符号A、B和X如上述规定而符号R和R1各自独立地代表氢或上述(C1-C4)烷基的那些式(I)化合物。这一组优选的化合物还包括其中R和/或R1代表氢的式(I)化合物与提供生物学上可接受的阳离子如Na+、K+、和其它上面提到的阳离子的碱的加成盐。最优选的本专利技术化合物组是其中符号A和B如上述规定，所有符号X代表氧而R和R1代表氢的式(I)的那些衍生物及它们与生物学上可接受的阳离子如Na+或K+的盐。可以说明本专利技术的某些具体的式(I)二核苷-5′，5′-P1，P2-焦磷酸酯的实例具体表示于下列表I中。表1A B 表1(续)A B 表1(续)AB 表1(续)A B 表1(续)A B 表1(续)A B 表1(续)AB 表1(续) 表1(续)A B 表1(续)A B 表1(续)AB 表1(续)A B 表1(续)A B 表1(续)A B 表1(续)A B 表1(续)A B 表1(续)AB 表1(续)AB 表1(续)A B 表1(续)A B 表1(续)A B 其中A和B至少一个代表从5-氟尿嘧啶-2′-脱氧-D-核苷衍生的5′-C′基团的上述式(I)二核苷-5′，5′-P1，P2-焦磷酸酯可用作抗肿瘤治疗药和其中A和B至少一个代表选自下列非天然存在的核苷的5′-C′基团的二核苷-5′，5′-P1，P2-焦磷酸酯可用作抗病毒治疗药，特别是抗逆转录病毒感染如HIV感染，这些非天然存在的核苷是胸腺嘧啶-3′-叠氮基-2′，3′-二脱氧-D-核苷，尿嘧啶-3′-叠氮基-2′，3′-二脱氧-D-核苷，鸟嘌呤-2′，3′-二脱氧-D-核苷，次黄嘌呤-2′，3′-二脱氧-D-核苷，胞嘧啶-2′，3′-二脱氧-D-核苷，以及腺嘌呤-2′，3′-二脱氧-D-核苷。根据上述特性，含有两种类型上述5′-′C′基团的二核苷可以用作抗肿瘤和抗病毒药。制备二核苷-5′，5′-P1，P2-焦磷酸酯的方法是按照已在本领域描述过的方法进行的。参见例如A.M.Michelson，“通过阳离子交换进行核苷酸酐的合成”，于生物化学生物物理学报，(1964)，91，1-13。按照该方法，式(II)的磷酸核苷 其中A、X和R具有如上的同样含义，其通过与活化剂如焦磷酸四苯基酯或氯基磷酸二苯基酯(diphenyl phosphochloridate)反应在磷酸部分的XH基团上活化，形成上述磷酸核苷的活化磷酸酯。然后将活化磷酸酯与式(III)的磷酸核苷反应 其中B、X和R1具有如上的同样含义，通过活化的磷酸二苯基酯部分的替代从活化的磷酸酯形成式(I)化合物。用于制备本专利技术的二核苷-5′，5′-P1，P2-焦磷酸酯的方法的其它例子可以从US4855304本文档来自技高网...

【技术保护点】
式（Ⅰ）的二核苷－５′，５′－Ｐ↑［１］，Ｐ↑［２］－焦磷酸酯＊＊＊ （Ⅰ）其中符号Ａ和Ｂ各自独立地代表选自胸腺嘧啶－３′－叠氮基－２′，３′－二脱氧－Ｄ－核苷、５－氟尿嘧啶－２′－脱氧－Ｄ－核苷、尿嘧啶－３′－叠氮基－２′，３ ′－二脱氧－Ｄ－核苷、胞嘧啶－２′，３′－二脱氧－Ｄ－核苷、和腺嘌呤－２′，３′－二脱氧－Ｄ－核苷的非天然存在核苷的５′－Ｃ′基团；符号Ｘ各自独立地代表氧或硫；符号Ｒ和Ｒ↓［１］各自独立地代表氢或从１至１０个碳原子的烷基基团；以 及其中Ｒ和／或Ｒ↓［１］代表氢的式（Ⅰ）化合物与提供生物学上可接受的阳离子的碱的加成盐。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：A德费罗拉，U本纳蒂，M基维尼，
申请(专利权)人：格鲁波莱佩蒂特公司，热那亚技术研究大学，
类型：发明
国别省市：IT[意大利]