新的多烯抗菌素3874 H1-H6, 其制备方法及用途技术

下式化合物 ３８７４Ｈ１，分子式：Ｃ↓［５８］Ｈ↓［８６］Ｎ↓［２］Ｏ↓［１８］，ＭＷ１０９９．３ ＊＊＊ ３８７４Ｈ２，分子式：Ｃ↓［５９］Ｈ↓［８８］Ｎ↓［２］Ｏ↓［１８］，ＭＷ１１１３．３ ＊＊＊ ３８７４Ｈ３，分子式：Ｃ↓［５７］Ｈ↓［８７］ＮＯ↓［１４］，ＭＷ１０７４．３ ＊＊＊ ３８７４Ｈ４，分子式：Ｃ↓［５８］Ｈ↓［８４］Ｎ↓［２］Ｏ↓［１８］，ＭＷ１０９７．３ ３８７４Ｈ５，分子式：Ｃ↓［５９］Ｈ↓［８６］Ｎ↓［２］Ｏ↓［１８］，ＭＷ１１１１．３ ３８７４Ｈ６，分子式：Ｃ↓［５７］Ｈ↓［８５］ＮＯ↓［１８］，ＭＷ１０７２．３ 适用于治疗真菌性疾病和与类固醇浓度增加有关的疾病。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】, 其制备方法及用途的制作方法
本专利技术涉及新的七烯抗菌素、其制备方法及用途。许多七烯抗菌素是已知的。七烯抗菌素属大环内酯类，它含有特征性的7个共轭双键。它们是来源于微生物的天然物质，可以用作抗真菌剂、抗毛滴虫剂或作为与类固醇(胆固醇)结合的药物。然而，它们当中有一些是毒性非常大的化合物，由于该原因，不能将它们用于全身给药(注射)，但商品两性霉素B(Merck索引，第11版，1989，93页)除外，该物质是多烯抗菌素的原型。由于真菌性疾病的增加，目前仍非常需要新的抗真菌的抗菌素，这些抗菌素比已知的多烯抗菌素更有效或更易耐受。我们惊奇地发现，链霉菌(Streptomyces spec.)HAG 3874，DSM11007可以产生新的、高活性的七烯抗菌素，这些抗菌素不仅非常有效，而且在有些情况下耐受性良好。因此，本专利技术涉及化合物3874 H1-H6、其生理可接受的盐及其显而易见的化学等同物。3874H1，分子式C58H86N2O18，MW1099.3 3874H2，分子式C59H88N2O18，MW1113.3 3874H3，分子式C57H87NO18，MW1074.3 3874H4，分子式C58H84N2O18，MW1097.33874H5，分子式C59H86N2O18，MW1111.33874H6，分子式C57H85NO18，MW1072.3抗菌素3874H1-H6与文献中公开的物质不同，它们具有所示的结构式和分子式以及Δ28/29和Δ30/31位置的两个顺式双键，这在本专利技术的所有化合物中均是相同的。本专利技术的化合物具有特征性的紫外光谱。本专利技术还涉及制备所述化合物的方法。制备所述化合物的方法之一包括将微生物链霉菌HAG 3874(DSM 11007)在含水营养培养基中培养，随后分离并纯化目标化合物。所述微生物根据布达佩斯条约于1996年6月21日保藏在Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen，Mascheroder Weg 1b，D-38124 Braunschweig，保藏号为DSM 11007。链霉菌DSM 11007有白色的气生菌丝体和灰色的孢子链。它形成了链霉菌的特征性孢子链。在含碳源和氮源、以及常用无机盐的营养液中，链霉菌DSM 11007产生化合物3874 H1-H6。还可用链霉菌DSM 11007株的突变体或变异体代替链霉菌DSM11007，只要它们能够合成本专利技术的化合物。所述突变体可以用已知的方式通过物理方法产生，例如用诸如紫外线或X射线等辐射、或用化学诱变剂，如甲磺酸乙酯(EMS)；2-羟基-4-甲氧基二苯酮(MOB)或N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)。可以通过测定在培养液中积累的活性物质的生物活性来筛选可产生本专利技术抗菌素的突变体和变异体，例如，通过下述的方法测试抗真菌的作用。用于有氧发酵的合适和优选的碳源是可同化的碳水化合物和糖醇，例如葡萄糖、乳糖或D-甘露糖醇；以及含有碳水化合物的天然产物，例如麦芽提取物。合适的含氮营养物质是氨基酸、肽、蛋白质和其降解产物，如胨或胰胨；肉提取物，研碎的种子，例如玉米、小麦、豆、大豆或棉花植物；生产醇的蒸馏残渣，肉粉或酵母提取物，以及铵盐和硝酸盐。可加入培养液中的无机盐是，例如，碱金属或碱土金属、铁、锌、钴和锰的氯化物、碳酸盐、硫酸盐或磷酸盐。七烯3874 H1-H6的生产特别适于在例如含有大约0.5至5％、优选1至2％葡萄糖，0.5至5％、优选1至2％大豆粉，优选0.2至1％玉米浆，0.05至1.0％优选0.1至0.5％CaCO3和0.1至2％优选0.2至1％NaCl的培养液中进行，每种物质均以培养液的总重量计。培养在通气下进行，也就是说，例如，在振荡或搅拌下于振荡烧瓶或发酵灌中浸泡，向其中适当地通入空气或氧气。发酵可以在例如各种容积的广口瓶或圆底烧瓶中、在玻璃发酵罐或不锈钢罐中进行。可以在大约20至35℃的温度范围内进行，优选大约25至30℃。pH应在4到10之间，最好在5.5到8.5之间。通常将微生物在这些条件下培养20至300小时，优选24至140小时。培养最好分多个阶段进行，即在液体营养培养基中进行初始的一次或多次预培养，然后以例如1∶10的体积比转移至实际的生产培养基中进行主培养。预培养物可以通过例如将形成孢子的菌丝体转移至营养液中并让其生长大约20至120小时、优选24至72小时而得到。形成孢子的菌丝体可以通过例如让菌株在固体或液体营养培养基(例如酵母-麦芽琼脂或土豆-右旋糖琼脂)中生长大约1至40天、优选3至10天而得到。可以通过技术人员已知的方法对发酵及抗菌素3874 H1-H6产生的进展进行监测，所述方法是例如通过测试在生物鉴定中的生物活性，或通过色谱的方法，例如薄层色谱(TLC)或高效液相色谱(HPLC)。菌株HAG 3874(DSM 11007)的特征是，除可以产生这些七烯外，还可以产生文献中已知的抗菌素咔唑霉素B和pimprinin。在菌丝体和培养液的滤液中均可以发现抗菌素3874 H1-H6，但大部分通常都是在生命体(菌丝体)中发现的。因此优选通过过滤或离心使菌丝体和滤液分离。将滤液用不与水互溶的溶剂如1-丁醇、乙酸乙酯、氨仿等提取。菌丝体优选用甲醇或丙酮提取，但也可使用上述不与水互溶的溶剂。提取可以在宽的pH范围内进行，但最好是在中性介质中进行，优选pH5到pH9之间。有机提取物可以在真空下浓缩和干燥。分离七烯3874 H1-H6的方法之一是以已知的方式进行萃取。另一种纯化方法是在吸附树酯上进行色谱分离，所述树酯是例如DiaionHP-20(Mitsubishi Casei Corp.，Tokyo)、AmberliteXAD7(Rohm和Haas，USA)、AmberchromCG，(Toso Haas，Philadelphia，USA)等。分离可以在宽的pH范围内进行。优选pH1-pH13的范围；并特别优选pH2-pH12的范围。还适用多种反相载体，例如高压液相色谱(HPLC)领域所公知的RP18。另一种纯化本专利技术抗菌素的可能方法是用所谓的正相色谱载体，例如硅胶或Al2O3等以已知的方式进行。多种溶液及其混合物均适用于该目的，例如加有碱性溶剂如吡啶的氯仿/甲醇混合物。另一种分离方法是使用分子筛如FractogelTSK HW-40、SephadexLH-20等以已知的方式进行。还可以通过结晶的方法从富含七烯的原料中将其分离。适用于该目的的是例如无水或加水的有机溶剂及其混合物。分离和纯化本专利技术的抗菌素的其它方法包括使用阴离子交换物质(优选在7到10的pH范围内)和阳离子交换物质(优选在3到7的pH范围内)。特别适用于该目的的是加有一定比例有机溶剂的缓冲液。抗菌素3874H1-H6或其化学衍生物可以通过技术人员已知的方法转变成相应的可药用盐。本专利技术化合物的显而易见的等同物是仅有微小化学差异(也就是说具有相同活性)的化合物，或可以在温和条件下转变成本专利技术化合物的化合物。所述等同物包括，例如本专利技术化合物的酯、氨基衍生物、配合物或加合物。本专利技术化合物的可药用盐指Remington’s Pharmaceutical Sc本文档来自技高网...

【技术保护点】
下式的化合物３８７４Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５或Ｈ６，３８７４Ｈ１，分子式：Ｃ↓［５８］Ｈ↓［８６］Ｎ↓［２］Ｏ↓［１８］，ＭＷ１０９９．３＊＊＊３８７４Ｈ２，分子式：Ｃ↓［５９］Ｈ↓［８８］Ｎ↓［２］Ｏ↓［１８］，ＭＷ１１１３． ３＊＊＊３８７４Ｈ３，分子式：Ｃ↓［５７］Ｈ↓［８７］ＮＯ↓［１８］，ＭＷ１０７４．３＊＊＊３８７４Ｈ４，分子式：Ｃ↓［５８］Ｈ↓［８４］Ｎ↓［２］Ｏ↓［１８］，ＭＷ１０９７．３３８７４Ｈ５，分子式：Ｃ↓［５９］Ｈ↓［８ ６］Ｎ↓［２］Ｏ↓［１８］，ＭＷ１１１１．３３８７４Ｈ６，分子式：Ｃ↓［５７］Ｈ↓［８５］ＮＯ↓［１８］，ＭＷ１０７２．３其生理可接受的盐和显而易见的化学等同物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：L沃特赛，M柯兹，J温克，A马库斯，W斯塔尔，
申请(专利权)人：赫彻斯特股份公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]