一种鞘类脂糖苷化合物及其提取方法技术

＊＊＊ 本发明专利技术涉及一种从中国南海海绵Ｉｏｔｒｏｃｈｏｔａ ｒｉｄｌｅｙ中提取、分离的新鞘类脂糖苷化合物。本发明专利技术所述化合物的化学名为：１－（β－Ｄ－吡喃葡糖氧基）－３，４－二羟基－２－［（４’Ｚ）－２’－羟基二十四碳烯酰胺基－４’］－十八烷。命名为：ＩｏｔｒｏｒｉｄｏｓｉｄｅＡ，其化合结构式如下：该化合物是以工业乙醇从中国南海海绵Ｉｏｔｒｏｃｈｏｔａ ｒｉｄｌｅｙ中提取、浓缩，并以正丁醇等溶剂萃取，经硅胶柱层析和适当溶剂淋洗，再以葡聚糖凝胶柱层析得白色粉状物。该化合物具有新型骨架结构，即其支链二十四碳烯酰胺基具有独特的双键片段，这是以往所获得的此类天然产物所没有的。同时该化合物还具有极强的肿瘤细胞毒活性。因此，具有良好的应用前景。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从中国南海海绵Iotrochota ridley中分离、提取的新鞘类脂糖苷化合物。海绵是一种低等的多细胞动物，种类繁多，分布极广，以海产为主。自七十年代以来，人们已从海绵中发现了许多结构独特的萜类、生物碱、大环内酯和糖苷等化合物。近几年来，由于有效成分的分离、纯化技术的显著改进，尤其是600兆核磁共振仪等现代先进分析仪器的出现以及各种二维谱技术的迅猛发展，使海洋天然产物中的一些结构较复杂的化合物，特别是鞘类脂糖苷化合物的结构鉴定工作在九十年代才取得一些重要进展。经药理试验表明，鞘类脂糖苷化合物大多具有抗真菌和抗肿瘤等生理活性。因而，它们是一类具有广阔应用前景的天然产物。本专利技术所涉及的化合物经IR、EIMS、FABMS、1HNMR、13CNMR、GCOSY、TOCSY、HMQC和HMBC等现代物理手段和化学方法确定结构如下 该化合物的化学名称为1-(β-D-吡喃葡糖氧基)-3,4-二羟基-2--十八烷。命名为Iotroridoside A,其物理常数如下νmaxKBr(cm-1):3363,2919,2850,2287,1629,1536,1465,1376,1168,1035,898,721,605；δ1H(C5D5N,TMS)ppm:8.54(1H,d,J=9Hz,NH),5.90(1H,dt,J=10.2,7.2Hz,H4’),5.60(1H,dt,J=10.8,7.2Hz,H5’),5.24(1H,m,H2),4.93(1H,d,J=8.4Hz,H1”),4.68(1H,dd,J=10.2,4.2Hz,H1a),4.62(1H,m,H2’),4.50(1H,dd,J=10.8,4.2Hz,H1b),4.45(1H,dd,J=12,2.4Hz,H6”a),4.31(1H,dd,J=12,5.4Hz,H6”b),4.27(1H,dd,J=12,4.8Hz,H3),4.19(1H,m,H4”),4.16(1H,m,H4),4.15(1H,m,H3”),3.97(1H,m,H2”),3.84(1H,m,H5”),3.00(1H,m,H3’a),2.82(1H,m,H3’b),2.22(1H,m,H5a),2.17(2H,m,H6’),1.88(2H,m,H5b,H6a),1.66(1H,m,H6b),1.42(2H,m,H7),1.35(2H,m,H7’),1.34～1.20(26CH2),1.25(H17,H23’),1.24(H16,H22’),0.86(6H,t,J=6.6Hz,18-CH3,24’-CH3)；δ13C(C5D5N,TMS)ppm:174.98(C1’),132.39(C5’),126.27(C4’),105.53(C1”),78.52(C3”),78.43(C5”),75.85(C3),75.13(C2”),72.57(C4”),72.48(C2’),71.51(C4),70.42(C1),72.57(C4”),72.48(C2’),71.51(C4),70.42(C1),62.65(C6”),51.80(C2),34.22(C5),33.56(C3’),32.14(C16,C22’),30.37～29.90(23CH2),29.70(C7),27.90(C6’),26.54(C6),22.94(C17,C23’),14.28(C18,C24’)；FABMS得分子量843,EIMS(m/z):568,490,458,406,370,356,328,307,265,225,179,145,123,111,97,83,70(100％),57,55,43该化合物的提取方法如下以中国南海海绵为原料，将晒干的海绵用酒精浸泡、抽提，将抽提物浓缩至浆状物，然后将其分散在适量的水中，再以等量的乙酸乙酯和正丁醇依次萃取，将所获得的正丁醇可溶物进行三次硅胶柱层析和两次葡聚糖凝胶LH-20柱层析得白色粉状物，即该化合物。生理活性试验表明，该化合物对小鼠L1210白血病细胞的细胞毒作用EC50值为80ng/ml。本专利技术所述的化合物，不但具有新型双键片段的酰胺骨架结构，而且具有极强的肿瘤细胞的细胞毒活性。因此，本专利技术所涉及的新化合物具有十分重要的理论价值和应用价值。实施例一、分离提纯中国南海海绵Iotrochota ridley，晒干(2.2g)切碎后用95％工业酒精(5kg)于室温下浸泡提取三次，合并提取物并减压浓缩至浆状物，将此浆状物均匀分散于500ml水中，分别用等量的乙酸乙酯和正丁醇萃取三次，正丁醇萃取物经减压浓缩得黑色浆状物23g。上述浆状物经硅胶(150g,Merk 70～230目)柱层析(φ=4.6×35cm)，以500ml不同比例的氯仿-甲醇(100％,90％,85％,80％,70％)梯度洗脱，获得A、B、C、D、E五个初组分。C组分(1g)经两次硅胶(80g,30g，青岛海洋化工分厂，300～400目)柱层析(φ2.4×48,φ1.6×48，洗脱剂90％氯仿-甲醇)得粗产物45mg。将此粗产物再经二次葡聚糖凝胶LH-20(30％氯仿-甲醇)柱层析，得白色粉状物29.6mg。二、结构鉴定1．红外3363cm-1处的宽峰说明分子含羟基，1629、1536cm-1等处的中等偏弱吸收峰显示分子可能含仲酰胺片段。2．1HNMR、13CNMR(C5D5N,ppm)显示分子含有一根邻二取代双键(δH5.90,dt,J=10.2,7.2Hz,δc126.7和δH5.60,dt,J=10.8,7.2Hz,δc132.39)，因两烯氢间的偶合常数小于12Hz，故双键的立体构型为顺式。另有10个连氧或氮的亚甲基(或次甲基)及两个甲基(δH0.86,6H,t,J=6.6Hz,δc14.28)。δH4.93(1H,d,J=8.4Hz)以及δc105.53是特征的葡萄糖异头碳氢信号，暗示分子可能含葡糖环。δH8.54(1H,d,J=9Hz,NH)以及δc174.98(酰胺羰基)指明分子含有一个仲酰胺片段，恰与红外提供的信息吻合。另外，δH1.34～1.20,δc30.37～29.90都有一个巨大的亚甲基信号峰，说明分子含一根或一根以上的长脂肪链。3．GCOSY同核相关谱显示分子有三个偶合体系①从异头氢(1″)出发找偶合点可连接出一个六元糖环结构(1″→6″)，再由HMQC异核相关谱可找出其相应的δc值(105.53,75.13,78.52,72.57,78.43和62.65ppm)，将其δc值与文献值对照，可知是β-D-吡喃葡糖环。②从仲酰胺氢出发可推导出一个植物鞘氨醇(phytosphingosine)片段(1→6)，同样可由HMQC定出相应的δc值。③从双键氢(4′,5′)出发可推出一不饱和脂肪长链(1′→mCH2)，其中有一连氧亚甲基，可能与酰胺羰基相连。HMBC指出，NH与C=O、C=O与H2′有2JCH远程偶合，C1与H1″有3JCH远程偶合，由此可将三个偶合体系连成一片，得到如下初步结构 上述结构与文献报导的一些鞘类脂糖苷化合物类似，但结构上又有独特的地方，即4′位有双键，这是以前所没出现过的，因此是新化合物。该化合物的TOCSY、HMBC等相关谱则进一步证实了这一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鞘类脂糖苷化合物，其特征在于，该化合物的结构式为：＊＊＊化学名称：１－（β－Ｄ－吡喃葡糖氧基）－３，４－二羟基－２－［（４’Ｚ）－２’－羟基二十四碳烯酰胺基－４’］－十八烷１－（β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌｏｘｙ）－ ３，４－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ－２－［（４’Ｚ）－２’－ｈｙｄｒｏｘｙｔｅｔｒａｃｏｓｅｎｅ ａｍｉｄｏ－４’］－ｏｃｔａｄｅｃａｎｅ英文名称：Ｉｏｔｒｏｒｉｄｏｓｉｄｅ Ａ物理常数：ν↓［ｍａｘ］↑［ＫＢｒ］（ｃｍ↑［－１］）：３３６ ３，２９１９，２８５０，２２８７，１６２９，１５３６，１４６５，１３７６，１１６８，１０３５，８９８，７２１，６０５；δ↑［１］Ｈ（Ｃ↓［５］Ｄ↓［５］Ｎ，ＴＭＳ）ｐｐｍ：８．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，ＮＨ），５．９０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０．２，７．２Ｈｚ，Ｈ４’），５．６０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０．８，７．２Ｈｚ，Ｈ５’），５．２４（１Ｈ，ｍ，Ｈ２），４．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ１”），４．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．２，４．２Ｈｚ，Ｈ１ａ），４．６２（１Ｈ，ｍ，Ｈ２’），４．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．８，４．２Ｈｚ，Ｈ１ｂ），４．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２，２．４Ｈｚ，Ｈ６”ａ），４．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２，５．４Ｈｚ，Ｈ６”ｂ），４．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２，４．８Ｈｚ，Ｈ３），４．１９（１Ｈ，ｍ，Ｈ４”），４．１６（１Ｈ，ｍ，Ｈ４），４．１５（１Ｈ，ｍ，Ｈ３”），３．９７（１Ｈ，ｍ，Ｈ２”），３．８４（１Ｈ，ｍ，Ｈ５”），３．００（１Ｈ，ｍ，Ｈ３’ａ），２．８２（１Ｈ，ｍ，Ｈ３’ｂ），２．２２（１Ｈ，ｍ，Ｈ５ａ），２．１７（２Ｈ，ｍ，Ｈ６’），１．８８（２Ｈ，ｍ，Ｈ５ｂ，Ｈ６ａ），１．６６（１Ｈ，ｍ，Ｈ６ｂ），１．４２（２Ｈ，ｍ，Ｈ７），１．３５（２Ｈ，ｍ，Ｈ７’），１．３４～１．２０（２６ＣＨ↓［２］），１．２５（Ｈ１７，Ｈ２３’），１．２４（Ｈ１６，Ｈ２２’），０．８６（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１８－ＣＨ↓［３］，２４’－ＣＨ↓［３］）；δ↑［１３］Ｃ（Ｃ↓［５］Ｄ↓［５］Ｎ，ＴＭＳ）ｐｐｍ：１７４．９８（Ｃ１’），１３２．３９（Ｃ５’），１２６，２７（Ｃ４’），１０５．５３（Ｃ１”），７８．５２（Ｃ３”），７８．４３（Ｃ５”），７５．８５（Ｃ３），７５．１３（Ｃ２”），７２．５７（Ｃ４”），７２．４８（Ｃ２...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邓松之，田春雷，肖定军，章勤，
申请(专利权)人：中国科学院广州化学研究所，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]