十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法技术

技术编号:15340875 阅读:125 留言:0更新日期:2017-05-16 23:42
提供对于由动物采集的十二指肠液试样评价该十二指肠液试样是否适合作为来自胰液的成分的检测用试样的方法。即,提供十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其具有:(a)将十二指肠液试样与糜蛋白酶特异性底物混合,测定利用前述十二指肠液试样的前述糜蛋白酶特异性底物的分解活性的工序;(b)将前述十二指肠液试样与胃蛋白酶特异性底物混合,测定利用前述十二指肠液试样的前述胃蛋白酶特异性底物的分解活性的工序;以及(c)基于前述十二指肠液试样的前述糜蛋白酶特异性底物的分解活性和前述十二指肠液试样的前述胃蛋白酶特异性底物的分解活性,评价前述十二指肠液试样是否适合作为来自胰液的成分的检测用试样的工序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法
本专利技术涉及对于由动物采集的十二指肠液试样评价是否适合于来自胰液的成分检测、即,通过将该十二指肠液试样供于来自胰液的成分的检测来得到可靠性高的结果的方法。
技术介绍
胰液(由胰管排出的体液)是用于知晓胰脏状态的重要的活体试样,用于细胞诊断、重碳酸盐测定、细菌检查、包含蛋白质、核酸等的标记物的检查等胰脏病的检查。特别是,通过对胰液中所包含的细胞、各种活体成分进行解析,可以期待能够实现不仅早期发现难且预后非常差的胰癌的早期发现。胰液通常经内窥镜地由十二指肠乳头部向胰脏的胰管插入导管而采集。但是,该方法存在对患者的侵袭性高、另外,需要获得医师高度的技术等问题。因此,报告了代替由胰管采集的胰液而使用十二指肠液(由十二指肠内采集的体液),从而检查胰脏病的方法(例如专利文献1参照。)。胰液是从胰脏向十二指肠排出的,所以能够通过检测十二指肠液中的胰液成分来检查胰脏病。十二指肠液在采集工序中不需要向胰管的途径,将内窥镜插入至十二指肠,在该情况下能够仅靠吸引来进行采集。即,十二指肠液的采集与由胰管的胰液采集相比较,能够以低侵袭且更简便的技术实施。十二指肠液中,除了由胰脏排出的胰液之外,还含有由肝脏生成、经胆嚢排出的胆汁、由十二指肠分泌的粘液、由胃排出的胃液。即,十二指肠液是由胰液、胆汁、十二指肠分泌的粘液和胃液混合而成的体液,各成分的含量是多种多样的。因此,由被检者采集的十二指肠液中,被认为带有对于检查胰脏病最重要信息的胰液是否一定混入是不明确的。假设,由同一被检者采集多种级分的情况下,可以认为胰液的分布不均匀,采集的十二指肠液中不一定会含有胰液。另一方面,蛋白质等活体成分容易引起分解、失活等。因此,为了得到可靠性高的结果,重要的是调查活体试样的质量。例如,专利文献2中公开了:为了监测血清、血浆、全血等活体试样中的肽或蛋白质样品的变化、变动,将具备利用蛋白酶的切断位点的被标记的肽或蛋白质作为标准物质,向活体试样中添加该标准物质,从而监测其经时的浓度变化的方法。现有技术文献专利文献专利文献1:国际公开第2013/038981号专利文献2:日本特开2008-506373号公报
技术实现思路
专利技术要解决的问题本专利技术涉及对于由动物采集的十二指肠液试样评价该十二指肠液试样是否适合作为来自胰液的成分的检测用试样的方法;以及采集利用该方法的、适合于作为来自胰液的成分的检测用试样的十二指肠液试样的练习方法。用于解决问题的方案本专利技术人为了解决上述课题进行了深入研究的结果发现,胰液含量多且胃液含量少的十二指肠液试样适合作为来自胰液的成分检测;十二指肠液试样的胰液含量和胃液含量的多寡可以分别基于对于对糜蛋白酶特异性的底物和对胃蛋白酶特异性的底物的分解活性来判断,至此完成本专利技术。即,本专利技术的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法、以及采集十二指肠液试样的练习方法为下述[1]~[10]。[1]一种十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其具有:(a)将十二指肠液试样与糜蛋白酶特异性底物混合,测定利用所述十二指肠液试样的所述糜蛋白酶特异性底物的分解活性的工序;(b)将所述十二指肠液试样与胃蛋白酶特异性底物混合,测定利用所述十二指肠液试样的所述胃蛋白酶特异性底物的分解活性的工序;以及(c)基于所述十二指肠液试样的所述糜蛋白酶特异性底物的分解活性和所述十二指肠液试样的所述胃蛋白酶特异性底物的分解活性,评价所述十二指肠液试样是否适合作为来自胰液的成分的检测用试样的工序。[2]根据前述[1]的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,前述糜蛋白酶特异性底物的利用糜蛋白酶的切断位点为下述通式(1)所表示的结构:-(Y1)n1-(X1)-Pro-(Y2)n2-···(1)[式(1)中,Y1和Y2分别独立地表示氨基酸残基或-CH2-NH-;X1表示Phe、Trp或Tyr;n1和n2分别独立地表示1~10的整数。]前述胃蛋白酶特异性底物的利用胃蛋白酶的切断位点为下述通式(2)所表示的结构。-(Y3)n3-Pro-(X2)-(Y4)n4-···(2)[式(2)中,Y3和Y4分别独立地表示氨基酸残基或-CH2-NH-;X2表示Phe、Trp或Tyr;n3和n4分别独立地表示1~10的整数。][3]根据前述[1]或[2]所述的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,所述糜蛋白酶特异性底物和所述胃蛋白酶特异性底物用相互同种或异种的标记物质标记。[4]根据前述[3]的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,基于前述糜蛋白酶特异性底物的分解物量确定前述糜蛋白酶特异性底物的分解活性;基于前述胃蛋白酶特异性底物的分解物量确定前述胃蛋白酶特异性底物的分解活性;以所述标记物质作为指标,确定前述糜蛋白酶特异性底物的分解物量以及前述胃蛋白酶特异性底物的分解物量。[5]根据前述[3]或[4]的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,前述标记物质为荧光物质。[6]根据前述[1]的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,基于前述十二指肠液试样的糜蛋白酶含量确定前述糜蛋白酶特异性底物的分解活性;基于前述十二指肠液试样的胃蛋白酶含量确定前述胃蛋白酶特异性底物的分解活性。[7]根据[1]~[6]中任一项所述的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,对于从同一被检者的消化管中的2个以上不同的部位采集的多个十二指肠液试样,分别进行所述工序(a)~(b),作为所述工序(c),(c’)将所述多个十二指肠液试样中的、所述糜蛋白酶特异性底物的分解活性高且所述胃蛋白酶特异性底物的分解活性低的物质评价为适合作为来自胰液的成分的检测用试样的工序。[8]一种十二指肠液试样采集的练习方法,其为使用消化管模拟装置,练习采集适合于作为来自胰液成分的检测用试样的十二指肠液试样的方法,前述消化管模拟装置至少具备:模拟口、模拟食道、投入了模拟胃液的模拟胃、通过模拟乳头部投入了模拟胰液的模拟十二指肠;前述模拟胃液是含有胃蛋白酶的pH1~2的溶液,前述模拟胰液是含有糜蛋白酶的pH8~9的溶液,重复进行1次或2次以上下述工序(1)和(2),下述工序(1)中,进行练习以便能够采集糜蛋白酶特异性底物的分解活性高于规定阈值且胃蛋白酶特异性底物的分解活性低于规定阈值的模拟十二指肠液试样;(1)由所述消化管模拟装置的所述模拟口至所述模拟十二指肠插入带有液体采集用导管的内窥镜,由所述模拟十二指肠的1个或2个以上不同的位点采集模拟十二指肠液试样的工序;(2)对于所述(1)中采集的各模拟十二指肠液试样,分别测定糜蛋白酶特异性底物的分解活性和胃蛋白酶特异性底物的分解活性的工序。[9]根据前述[8]的十二指肠液试样采集的练习方法,其中,前述糜蛋白酶特异性底物的利用糜蛋白酶的切断位点为下述通式(1)所表示的结构:-(Y1)n1-(X1)-Pro-(Y2)n2-···(1)[式(1)中,Y1和Y2分别独立地表示氨基酸残基或-CH2-NH-;X1表示Phe、Trp或Tyr;n1和n2分别独立地表示1~10的整数。]前述胃本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其具有:(a)将十二指肠液试样与糜蛋白酶特异性底物混合,测定利用所述十二指肠液试样的所述糜蛋白酶特异性底物的分解活性的工序;(b)将所述十二指肠液试样与胃蛋白酶特异性底物混合,测定利用所述十二指肠液试样的所述胃蛋白酶特异性底物的分解活性的工序;以及(c)基于所述十二指肠液试样的所述糜蛋白酶特异性底物的分解活性和所述十二指肠液试样的所述胃蛋白酶特异性底物的分解活性,评价所述十二指肠液试样是否适合作为来自胰液的成分的检测用试样的工序。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其具有:(a)将十二指肠液试样与糜蛋白酶特异性底物混合,测定利用所述十二指肠液试样的所述糜蛋白酶特异性底物的分解活性的工序;(b)将所述十二指肠液试样与胃蛋白酶特异性底物混合,测定利用所述十二指肠液试样的所述胃蛋白酶特异性底物的分解活性的工序;以及(c)基于所述十二指肠液试样的所述糜蛋白酶特异性底物的分解活性和所述十二指肠液试样的所述胃蛋白酶特异性底物的分解活性,评价所述十二指肠液试样是否适合作为来自胰液的成分的检测用试样的工序。2.根据权利要求1所述的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,所述糜蛋白酶特异性底物的利用糜蛋白酶的切断位点为下述通式(1)所表示的结构:-(Y1)n1-(X1)-Pro-(Y2)n2-…(1)式(1)中,Y1和Y2分别独立地表示氨基酸残基或-CH2-NH-;X1表示Phe、Trp或Tyr;n1和n2分别独立地表示1~10的整数;所述胃蛋白酶特异性底物的利用胃蛋白酶的切断位点为下述通式(2)所表示的结构:-(Y3)n3-Pro-(X2)-(Y4)n4-…(2)式(2)中,Y3和Y4分别独立地表示氨基酸残基或-CH2-NH-;X2表示Phe、Trp或Tyr;n3和n4分别独立地表示1~10的整数。3.根据权利要求1或2所述的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,所述糜蛋白酶特异性底物和所述胃蛋白酶特异性底物用相互同种或异种的标记物质标记。4.根据权利要求3所述的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,基于所述糜蛋白酶特异性底物的分解物量确定所述糜蛋白酶特异性底物的分解活性,基于所述胃蛋白酶特异性底物的分解物量确定所述胃蛋白酶特异性底物的分解活性,将所述标记物质作为指标确定所述糜蛋白酶特异性底物的分解物量和所述胃蛋白酶特异性底物的分解物量。5.根据权利要求3或4所述的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,所述标记物质为荧光物质。6.根据权利要求1所述的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,基于所述十二指肠液试样的糜蛋白酶含量确定所述糜蛋白酶特异性底物的分解活性,基于所述十二指肠液试样的胃蛋白酶含量确定所述胃蛋白酶特异性底物的分解活性。7.根据权利要求1~6中任一项所述的十二指肠液试样作为来自胰液的成分检测用试样的适性评价方法,其中,...

【专利技术属性】
技术研发人员:朝仓正教长冈智纪岛田奈绪
申请(专利权)人:奥林巴斯株式会社
类型:发明
国别省市:日本,JP

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