溶血剂及应用制造技术

本发明专利技术公开了溶血剂及其应用，该溶血剂包含：表面活性剂；聚乙二醇；乙二胺四乙酸钠盐；以及水。本发明专利技术的溶血剂能够对全血进行快速有效溶解，且能够同时满足对血清、血浆和全血(静脉和末梢)的C‑反应蛋白检测且不影响后续免疫比浊反应的速度。

Hemolytic agent and its application

The invention discloses a hemolytic agent and an application thereof, wherein the hemolytic agent comprises a surface active agent, polyethylene glycol, EDTA, sodium salt, and water. Hemolytic agent of the invention can efficiently dissolve the blood, and can also meet the serum, plasma and blood (venous and peripheral) detection of C C-reactive protein and does not affect the subsequent immune turbidimetric reaction speed.

【技术实现步骤摘要】
溶血剂及应用
本专利技术涉及体外诊断试剂
，具体涉及溶血剂及其应用。
技术介绍
体外诊断试剂是指可单独使用或与仪器、器具、设备或系统组合使用,在疾病的预防、诊断、治疗监测、预后观察、健康状态评价以及遗传性疾病的预测过程中,用于对人体样本(各种体液、细胞、组织样本等)进行体外检测的试剂、试剂盒、校准品(物)、质控品(物)等。随着临床体外诊断技术的研究和发展，体外诊断使用最多最重要的人体样本类型当属门诊全血。全血成分相当丰富，除血常规检测细胞等有形成分外，还含血清和血浆中的其他所有化学成分，为避免红细胞、白细胞等对检测的影响，在进行全血中的化学成分测试前，需要将全血进行快速有效溶解，因此溶血剂的效率和作用将对后续样本的检测起到非常关键的作用。C-反应蛋白(CRP)是相对分子质量为115～140KD的血清β球蛋白，因最早发现其和肺炎球菌的C多糖相结合而得名(1930年)，是由5个相同的亚单位以非共价键结合而成的环状五球体。CRP半寿期约15h，正常人CRP的浓度很低(0.068～8.2mg/L)，但在组织损伤、急性感染发生后6～8h开始升高,24～48h达峰值，可达正常值的几百倍甚至上千倍，升高幅度与感染程度成正比，炎症治愈后浓度迅速下降，7～12天可恢复正常水平。CRP持续增高提示机体存在慢性炎症或自身免疫疾病，CRP在病毒感染时不会升高，其变化不受病人的个体差异、机体状态和治疗药物的影响。近年来研究证明，CRP具有与IgG和补体相似的调理和凝集作用，促进巨噬细胞的吞噬，刺激单核细胞表面的组织因子表达及其它免疫调节功能。CRP在炎症或组织损伤时皆可升高，但CRP与其他蛋白升高(2～3倍)不同，可升高100～1000倍，尽管为非特异性的，但对于细菌感染、各种炎症过程及组织坏死与损伤及其恢复期的筛检、监测、病情评估与疗效判断，都有重要的价值。以往CRP的检测主要基于生化分析仪或特定蛋白仪上针对血清进行检测，随着研究的进展和发现CRP在细菌和病毒感染表现差异的重要临床价值，以静脉全血或者末梢血作为样本进行CRP的检测就显得异常迫切和重要。然而，目前还没有能够同时满足对血清、血浆和全血(静脉和末梢)的C-反应蛋白检测且不影响后续免疫比浊反应的速度的溶血剂。
技术实现思路
本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提出一种能够同时满足对血清、血浆和全血(静脉和末梢)的C-反应蛋白检测且不影响后续免疫比浊反应的速度的溶血剂。需要说明的是，本专利技术是基于专利技术人的下列发现而完成的：专利技术人研究发现，CRP(体C-反应蛋白)是人体在感染发生后的极性相反应蛋白，早期临床上几乎均是针对人体血清样本进行测试，最近几年由于研发发现CRP对病毒感染和对细菌感染的升高水平差异性表现而发展为与血常规测试配合针对全血样本进行测试。但由于血清是采用自然凝固或加入促凝剂或分离胶并经离心除去纤维蛋白及血液有形成分的均一性样本，与含有红细胞、白细胞、血小板等有形成分的未经任何处理的全血有很大的差异。全血样本和血清样本的测定过程本质都是人体C-反应蛋白与对应的CRP抗体发生免疫结合从而产生沉淀的反应，两者的差异在于是否存在溶血的过程。而全血C-反应蛋白的检测，由于全血成分复杂，需溶血过程，影响因素较多。血清样本均一、干扰成分少，无需溶血过程，目前针对血清的CRP检测试剂盒中，试剂1成分简单，主要是一些缓冲盐溶液，起到稳定反应体系的作用即可，加入试剂2乳胶抗体即可产生反应。通常称为一步法完成测试。对于全血样本，溶血本身是一个很简单的过程，关键在于如需要快速溶血，比如10s以内，则需要加入足够浓度的能快速破坏血液细胞并溶解细胞壁上的脂类等成分的表面活性剂，表面活性剂强度不足(亲水亲油平衡值低)则溶血慢或者不充分，表面活性剂过强，则会通过破坏后续加入的CRP乳胶抗体(其本质是胶体溶液)的水化层从而破坏反应体系的稳定性(表现为加入试剂2乳胶抗体后吸光值下降从而反应信号为负，或者为加入试剂2乳胶抗体后测试水空白时吸光值异常升高，产生强烈的本地反应导致正常样本反应信号低于水空白)，影响反应的特异性和反应速度。由于全血样本溶血剂对后续反应的干扰问题，当前市面上的全血CRP检测试剂几乎均为两步法，即第一步先加稀释液(溶血剂)对全血样本进行溶血，然后时第二步再取溶血后的样本进行反应，这样由于稀释过程和反应过程分开，加入的稀释液样本体积远小于一步法中需加入的试剂1体积，所以对后续免疫比浊反应影响小；如测试血清样本则不需要第一步样本稀释(溶血)过程。部分厂家直接注册两种试剂盒，一种只适用于血清样本，一种只适用于全血样本。因而，目前市场在用尤其是国产的C-反应蛋白(CRP)检测试剂盒，基本是血清/血浆检测和全血检测试剂分开，即采用不同试剂，这样无论是对于企业还是临床检测实验室，既不方便也增加了成本负担。但是，同一种试剂要同时满足对血清、血浆和全血(静脉和末梢)的检测且不影响后续免疫比浊反应的速度，具有一定难度。因而，专利技术人继续进行了一系列的实验探索和研究，以期寻找出一种能够对全血进行快速有效溶解，并能够同时满足对血清、血浆和全血(静脉和末梢)的C-反应蛋白检测且不影响后续免疫比浊反应的速度的溶血剂。从而，最终得到了本专利技术的溶血剂。本专利技术的溶血剂，含有多种表面活性剂及缓冲成分，可以在很短的时间内完成溶血(对静脉全血和末梢血)过程，并直接加入试剂2(乳胶CRP抗体)进行反应，无需样本稀释(溶血)过程，免疫比浊反应进程不受影响；溶血剂对血清、血浆无影响，即血清和血浆可以同全血一样与乳胶CRP抗体顺利产生免疫比浊反应，从而能够实现针对血清、血浆、全血均一步法完成测试过程。因而，在本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种溶血剂。根据本专利技术的实施例，该溶血剂包含：表面活性剂；聚乙二醇；乙二胺四乙酸钠盐；以及水。如前所述，目前市售的C-反应蛋白(CRP)检测试剂盒分为适用于血清和全血两种，通用性较差，而本专利技术的溶血剂能够同时满足对血清、血浆和全血(静脉和末梢)的C-反应蛋白检测且不影响后续免疫比浊反应的速度。从而，将本专利技术的溶血剂用于C-反应蛋白(CRP)检测，能够有效解决同一种试剂适用于与多种临床样本的兼容性问题，可分别临床使用需求，并减少成本。并且，根据本专利技术的实施例，本专利技术的溶血剂能够对全血进行快速有效溶解。根据本专利技术的实施例，所述溶血剂的pH值为6.0～8.0。根据本专利技术的实施例，所述表面活性剂为选自十二烷基硫酸钠、十四烷基三甲基氯化铵和甜菜碱的至少一种。根据本专利技术的实施例，当所述表面活性剂为选自十二烷基硫酸钠和十四烷基三甲基氯化铵的至少一种时，在所述溶血剂中，所述表面活性剂的质量-体积浓度为0.1‰～1‰；当所述表面活性剂为甜菜碱时，在所述溶血剂中，所述表面活性剂的质量-体积浓度为0.01％～0.1％。根据本专利技术的实施例，所述聚乙二醇的分子量范围为8000-20000。根据本专利技术的实施例，在所述溶血剂中，所述聚乙二醇的质量-体积浓度为0.4％～1％。根据本专利技术的实施例，在所述溶血剂中，所述乙二胺四乙酸钠盐的质量-体积浓度为1‰～5‰。其中，在本文中所述的“质量-体积浓度”＝溶质的质量数(克)/溶液的体积(升)，即1‰＝1克/升。专利技术人惊奇地发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种溶血剂，其特征在于，包含：表面活性剂；聚乙二醇；乙二胺四乙酸钠盐；以及水。

【技术特征摘要】
1.一种溶血剂，其特征在于，包含：表面活性剂；聚乙二醇；乙二胺四乙酸钠盐；以及水。2.根据权利要求1所述的溶血剂，其特征在于，所述溶血剂的pH值为6.0～8.0。3.根据权利要求1所述的溶血剂，其特征在于，所述表面活性剂为选自十二烷基硫酸钠、十四烷基三甲基氯化铵和甜菜碱的至少一种。4.根据权利要求3所述的溶血剂，其特征在于，当所述表面活性剂为选自十二烷基硫酸钠和十四烷基三甲基氯化铵的至少一种时，在所述溶血剂中，所述表面活性剂的质量-体积浓度为0.1‰～1‰；当所述表面活性剂为甜菜碱时，在所述溶血剂中，所述表面活性剂的质量-体积浓度为0.01％～0.1％。5.根据权利要求1所述的溶血剂，其特征在于，所述聚乙二醇的分子量范围为8000-20000。6.根据权利要求1所述的溶血剂，其特征在于，在所述溶血剂中，所述聚乙二醇的质量-体积浓度为0.4％～1％。7.根据权利要求1所述的溶血剂，其特征在于，在所述溶血剂中，所述乙二胺四乙酸钠盐的质量-体积浓度为1‰～5‰。8.权利要求1-7任一项所述的溶血剂在检测血液样本的C-反应蛋白中的用途。9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述血液样本为静脉血或末梢血，任选地，所述血液样本为选自血清、血浆和全血的至少一种，优选全血。10.一种检测血液样本的C...

【专利技术属性】
技术研发人员：艾峰，
申请(专利权)人：深圳优迪生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44