一种植物乳杆菌饲料及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种植物乳杆菌饲料及其应用，属于微生物技术领域。本发明专利技术将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM 8610以离心浓缩获得的菌剂以饲料添加剂的形式加入到水生动物饲料预混料中进行制粒，含活菌数大于108CFU/g成品饲料的益生菌颗粒饲料。以该方法获得的饲料能够提高罗非鱼的生长速率；降低镉暴露罗非鱼体内镉含量，尤其是罗非鱼可食用部位的镉含量；改善镉暴露罗非鱼的血细胞指标以及血清生化指标；缓解镉暴露罗非鱼体内氧化应激损伤；调节镉暴露罗非鱼肠道微生物的组成及数量，抑制肠道内致病菌Flavobacterium与Pseudomonas的丰度；非常具有应用前景。

Lactobacillus plantarum feed and application thereof

The invention discloses a plant lactobacillus feed and application thereof, belonging to the technical field of microorganisms. The invention of Lactobacillus plantarum (Lactobacillus plantarum) CCFM 8610 centrifugal concentration to obtain inoculum in the feed additive form into aquatic animal feed premix granulation, granule feedstuff containing probiotics viable count more than 108CFU/g of finished feed. By the same method of feed can improve the growth rate of tilapia; reduce the cadmium content of tilapia exposed to cadmium, especially the cadmium content in edible part of tilapia; improve the cadmium exposure of tilapia blood cell index and serum biochemical indexes; alleviate oxidative stress injury of tilapia exposed to cadmium cadmium exposure; regulating the composition and quantity of tilapia intestinal microflora, inhibition the abundance of bacteria in the gut of Flavobacterium and Pseudomonas; very promising.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种含植物乳杆菌鱼饲料及其应用，属于微生物

技术介绍
镉是人体非必需元素，具有很强的毒性以及致癌性。在美国毒物和疾病登记署(ATSDR)于2015年公布的危害物质目录中，镉位列第七位。工业上镉常用于电池、合金、颜料的生产。工业生产中含镉的废弃物若未经过处理，直接排放到自然环境中，会造成区域内环境重金属镉污染。环境中的镉会通过生物吸收以及体内蓄积作用会不断在食物链中积累，进而危害处于食物链顶端的人类的健康。近年来随着工业的不断发展，环境镉污染问题也愈发突出，其中水环境镉污染也在世界范围内广泛报道。水体环境镉超标不仅会对水生生物产生毒害，引发多种急慢性疾病，从而影响水产养殖业。同时，水生生物吸收水体中的镉并在体内逐渐蓄积，不仅威胁水产品的食用安全性，消费者的身体健康也会受到潜在危害。现有对镉的毒性研究中，水体中镉超标会使鱼类产生氧化应激，并对鱼有一定的免疫毒性，从而导致鱼的一些重要器官(如腮、肝、肾等)出现损伤并影响其正常的生理功能，进而抑制鱼类正常生长，并增加鱼类死亡率。目前处理水生生物镉中毒的可选方法较少，其主要方法集中于水体中镉元素的减除以及镉毒害作用的缓解。水体中镉元素的减除主要依赖于吸附剂的吸附作用，如粉末活性炭、膨润土、海泡石等，但靠吸附剂降低水环境中镉浓度使用性较差且成本太高。缓解镉毒害则主要集中降低镉的生物利用率以及缓解机体氧化应激产生的危害，主要方法是在饲料中添加抗氧化剂以及镉吸附剂。其中镉吸附剂主要有壳聚糖，葡甘露聚糖与膨润土等，抗氧化物质则主要包括维生素C、无机硒等。但吸附剂的摄入会破坏水生生物体内原有的离子平衡，而添加抗氧化物质则成本过高。固而寻找一种高效且低成本的方法缓解镉对水生生物的毒害有着重要的意义。已有的研究表明，鱼类的肠道微生物在鱼类的免疫力、新陈代谢能力以及抵抗病原菌能力方面有的不可或缺的作用。肠道菌群紊乱会使鱼肠道免疫系统失调并导致鱼类患病率增加。已有研究表明，益生菌可作为饲料添加剂混入饲料，并可有效调节鱼的肠道菌群，改善鱼的生长性能以及维持鱼体内免疫平衡。同时，某些特定的乳酸菌菌株具有高效吸附镉离子的特性，也可作为潜在吸附剂添加进饲料，加之乳酸菌的培养成本较低，可用于大规模的饲料制作。并且益生菌在缓解水生生物镉中毒方面的研究较少，因此，探究一种能够缓解水生生物镉中毒的饲料，进而降低水生生物可食用部位的镉含量，具有很大的研究意义以及应用价值。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供一种水生动物饲料，所述饲料含有≥108CFU/g的植物乳杆菌CCFM8610活菌。在本专利技术的一种实施方式中，所述的植物乳杆菌CCFM8610。该菌株已于2012年5月3日在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏号为CGMCCNo.6077，该菌株在申请号为201210322124.2的专利技术专利中公开。在本专利技术的一种实施方式中，所述饲料是由植物乳杆菌CCFM8610的菌剂与食品学上可接受的载体组成的。在本专利技术的一种实施方式中，所述食品学上可接受的载体是指水生动物饲料的基础配料。在本专利技术的一种实施方式中，所述水生动物饲料含有粗蛋白30～35份，粗脂肪5～10份，粗纤维10～15份，粗灰分10～15份。在本专利技术的一种实施方式中，所述水生动物饲料含有大豆粕、次粉、面粉、鱼粉、矿物盐、氯化胆碱、复合维生素、酪蛋白、豆粕、大豆油、VC-磷酸酯钠、微晶纤维素、磷酸二氢钙中的至少一种。在本专利技术的一种实施方式中，所述水生动物饲料含有大豆粕20～25份、次粉20～25份、面粉20～25份、鱼粉10～15份、矿物盐1～2份、氯化胆碱0.5～1份、复合维生素1～2份、酪蛋白8～10份、豆粕20～25份、大豆油5～10份、VC-磷酸酯钠0.2～0.5份、微晶纤维素2～4份、磷酸二氢钙1～2份。本专利技术的第二个目的是提供一种水生动物饲料的生产方法，是将配料粉碎，与植物乳杆菌CCFM8610菌液混合，制备成菌体含量≥108CFU/g的饲料。在本专利技术的一种实施方式中，所述配料包括大豆粕、次粉、面粉、鱼粉、矿物盐、氯化胆碱、复合维生素、酪蛋白、豆粕、大豆油、VC-磷酸酯钠、微晶纤维素、磷酸二氢钙中的至少一种。在本专利技术的一种实施方式中，所述菌液的制备包括以下步骤：将植物乳杆菌CCFM8610按体积比以2-4％的接种量接种到MRS培养基中，37℃下培养16～24h，离心并洗涤菌体，用生理盐水重悬使活菌浓度≥1011CFU/mL。在本专利技术的实施方式中所述的饲料制作包括以下步骤：将粒状原料粉碎处理后与粉状原料按比例混合，得到预混饲料，将所述菌液按14mL/kg预混饲料的比例均匀混入预混饲料，以小型颗粒饲料机进行制粒，制粒温度为65℃。本专利技术的第三个目的是提供一种饲喂水生动物的方法，所述方法是应用含有植物乳杆菌CCFM8610的水生动物饲料饲喂水生动物。在本专利技术的一种实施方式中，所述水生动物是罗非鱼，所述饲喂是按罗非鱼体重3～5％进行饲喂。本专利技术还提供所述饲料在制备低含镉水产品中的应用。有益效果：本专利技术的植物乳杆菌CCFM8610在鱼饲料中的应用能够加快罗非鱼的生长速率，使其相对增长速率提高5％以上，并能有效降低罗非鱼肌肉中镉含量，由0.14μg/g降低至0.057μg/g,达到GB2762-2012中规定的鱼类镉限量标准(0.1μg/g)，缓解罗非鱼体内因镉中毒导致的氧化应激损伤，改善镉暴露罗非鱼的血细胞指标以及血清生化指标，对于制备低镉含量、天然无重金属污染的罗非鱼及以罗非鱼肉为原料的食品非常具有应用前景。附图说明图1为本专利技术的饲料制作方法流程图；图2是罗非鱼血液生理指标的变化：A，红细胞压积；B，血红蛋白浓度；C，白细胞数量；D，红细胞平均容量。注：标有不同字母的组表示有差异显著(P<0.05)；图3是罗非鱼血清生化指标的变化：A，总胆固醇；B，总甘油三酯；C，谷草转氨酶；D，谷丙转氨酶；E，高密度脂蛋白；F，总蛋白。注：标有不同字母的组表示有差异显著(P<0.05)图4是罗非鱼肝胰脏丙二醛(A)和谷胱甘肽过氧化物酶活性(B)的变化；注：标有不同字母的组表示有差异显著(P<0.05)；图5是罗非鱼脑丙二醛(A)和超氧化物歧化酶活性(B)变化；注：标有不同字母的组表示差异显著(P<0.05)；图6是罗非鱼粪便微生物组成变化(属水平)；图7是罗非鱼粪便中微生物相对丰度的变化：A,Cetobacterium,Plesiomonas和Deefgea的相对丰度变化；B，Flavobacterium,Pseudomonas,Cellvibrio和Acinetobacter的相对丰度变化。具体实施方式实施例1水生动物饲料的制备按表1-2所示的基础配方及营养组成配制饲料配料，按附图1所示的方法制备饲料，具体步骤如下：将植物乳杆菌CCFM8610按体积比以2-4％的接种量接种到MRS培养基中，37℃下培养18h，离心并洗涤菌体，用生理盐水重悬浮，使活菌浓度≥1011CFU/mL。将粒状原料经初清、粉碎处理后与粉状原料按表1配方混合，得到预混饲料；将上述菌液按14ml/kg预混饲料的比例均匀混入预混饲料后，以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水生动物饲料，其特征在于，所述饲料含有≥108CFU/g的植物乳杆菌CCFM 8610活性成分。

【技术特征摘要】
1.一种水生动物饲料，其特征在于，所述饲料含有≥108CFU/g的植物乳杆菌CCFM8610活性成分。2.根据权利要求1所述的饲料，其特征在于，所述饲料是由植物乳杆菌CCFM8610的菌剂与食品学上可接受的载体组成的。3.根据权利要求2所述的饲料，其特征在于，含有粗蛋白30～35份，粗脂肪5～10份，粗纤维10～15份，粗灰分10～15份。4.根据权利要求2所述的饲料，其特征在于，含有大豆粕20～25份、次粉20～25份、面粉20～25份、鱼粉10～15份、矿物盐1～2份、氯化胆碱0.5～1份、复合维生素1～2份、酪蛋白8～10份、豆粕20～25份、大豆油5～10份、VC-磷酸酯钠0.2～0.5份、微晶纤维素2～4份、磷酸二氢钙1～2份。5.一种水生动物饲...

【专利技术属性】
技术研发人员：翟齐啸，陈卫，朱家民，田丰伟，于雷雷，赵建新，张灏，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32