萃取方法和提纯有效物质的方法技术

一种萃取含疏水基的水溶性有机化合物的方法，包括以下步骤：使包含含疏水基的水溶性有机化合物和糖的水溶液与极性有机溶剂接触，获得水相与有机相，由此使含疏水基的水溶性有机化合物转入有机相中。水溶液的糖浓度可以是每１００ｍｌ水溶液至少１２ｇ糖。该水溶液还可以包含相分离助剂。相分离助剂选自氯化钠、柠檬酸钠、硫酸镁和硫酸铵。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于从包含含疏水基的水溶性有机化合物(例如源自动物或植物的萃取物以及酶反应溶液)的水溶液中高纯度和高产率地萃取含疏水基的水溶性有机化合物的方法。
技术介绍
已知许多具有各种生理活性的天然化合物，以粗制药物萃取物为代表。这些天然化合物也被称为生理活性物质。通常通过下述方法提纯各种生理活性物质，使用包含该生理活性物质的材料和水、温水或低浓度含水醇溶液进行萃取以获得萃取溶液，浓缩该萃取溶液，然后将浓缩的萃取溶液进行柱色谱分离。然而，这种提纯方法需要大的柱和与此相匹配的设备，以便得到大量生理活性物质。小柱的效率很低。因此，提纯的生理活性物质非常昂贵。对于通过溶剂萃取法提纯生理活性物质，人们已进行了各种尝试。但是，由于安全问题不能将下述方法用于食物，即向水溶液中加入原本与水不混溶的有机溶剂如乙酸乙酯、丁醇和氯仿，搅拌，并使溶液静置以获得两相即水相和有机溶剂相，然后回收转入有机溶剂相的生理活性物质。甚至在将生理活性物质用于除食物以外的用途时，使用有机溶剂也不能有效萃取一些生理活性物质，因为生理活性物质不能大量转入有机溶剂相。因为能用于食物的一些有机溶剂如乙醇和丙酮是与水混溶的，这些有机溶剂不能用于从水溶液中萃取和提纯生理活性物质。橙皮苷是典型的类黄酮，其包含在橙汁中。橙皮苷代表的类黄酮已知具有如下所述生理作用，例如，橙皮苷和芸香苷以前被称为维生素P，长久以来人们就知道它们具有降血压的作用(Shintaro Kamiya，Shin-Vitamin-Gaku，(The Vitamin Societyof Japan)1969，439页)。也有报道说，橙皮苷具有下列生理作用消炎作用，止痛作用(E，M.Galati等人，I1 Farmaco，49，709-712(1994))，抗变应性作用(Hideaki Matsuda等人Yakugaku Zasshi，111，193-198(1991)，J.A.Da SilvaEmim等人；J.Pharm.Pharmacol.，46，118-712(1994))，降低LDL-胆固醇以改善血胆固醇水平的作用(M.T.Monforte等人；IlFarmaco，50，595-599(1995))，以及制癌作用(T.Tanaka，等人；Cancer Research，54，4653-4659(1994)，T.Tanaka，等人；Cancer Research，57，246-252(1997)，T.Tanaka，等人；Carcinogenesis，18，761-769(1997)，T.Tanaka，等人；Carcinogenesis，18，957-965(1997)).此外，在最近的研究中，人们预期橙皮苷也具有促进脂肪前体细胞分化以便改善病症如糖尿病的作用。洋芫荽甙具有很强的抗氧化活性。包含洋芫荽甙和橙皮苷的药剂用作静脉机能不全、痔等的治疗药物(C.Labrid；Angiology，45，524-530(1994))。也有报道说，单独的橙皮苷、单独的洋芫荽甙以及橙皮苷和洋芫荽甙的混合物抑制口腔癌、食管癌、结肠直肠癌等(T.Tanaka，等人；CancerResearch，54，4653-4659(1994)，T.Tanaka，等人；CancerResearch，57，246-252(1997)，T.Tanaka，等人；Carcinogenesis，18，761-769(1997)，T.Tanaka，等人；Carcinogenesis，18，957-965(1997))。已知柚皮苷和新橙皮苷为柑桔的苦素，用于食物和饮料以提供苦味。此外，最近发现异黄酮能有效提高骨密度、抑制乳腺癌的发生等等(Toda等人；Foods and Ingredients Journal of Japan，No.172，83-89(1997))。橙皮苷和芸香苷原本不溶解于丙酮。另一方面，类黄酮如橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和芸香苷微溶于水中。为了克服这一障碍，即溶解度差，人们已经进行了各种尝试来有效溶解这些难溶性化合物。例如，已经公开了通过酶催糖基化作用提高类黄酮如橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和芸香苷的溶解度的方法(日本公开专利7-107972)。也公开了出于同一目的通过酶催糖基化作用提高除上述类黄酮以外的儿茶素、咖啡酸、曲酸、氢醌、儿茶酚、间苯二酚、原儿茶酸、五倍子酸、香草醛、黄豆苷原、染料木素、α-间二羟苯甲酸和间苯三酚的溶解度的方法(日本专利公告7-36758和T.Nishimura，J.Ferment.Bioeng.，78(1994)37页)。但是，因为苷本身的水溶性被提高，所以苷不能被有效萃取到与水不混溶的溶剂中。而且，由于安全问题，为从进行了糖基化作用的酶反应溶液中提纯苷需要使用柱色谱法如吸附色谱法。在常规提纯方法中，为了从天然材料中获得部分提纯的类黄酮、儿茶素、苯酚及它们的苷，采用了使用天然材料和碱性水溶液、有机溶剂、热水等来进行萃取，然后通过柱色谱法提纯萃取溶液的方法。但是，为了高产率低成本地获得大量这些物质，萃取和提纯需要使用能用于食物的安全有机溶剂。但是，因为可用于食物的丙酮可与水混溶，所以不可能使用丙酮来萃取这些物质。大多数可有效用于食物和药物领域的生理活性物质具有如下性质，即它们易溶于高极性溶剂如水、乙醇和丙酮，而难溶于低极性溶剂，因此它们不能被有效地从低极性溶剂中萃取出来。
技术实现思路
作为深入研究的结果，本专利技术人发现，即使在使用本质上难以和水相(其中有机溶剂与水或热水混合)分离的有机溶剂时，如果包含生理活性物质的水溶液中存在具有保水能力的物质如糖类，则有可能在混合并搅拌水溶液和有机溶剂后很容易地从有机相分离水相。本专利技术人也发现生理活性物质转入到有机相中。此外，本专利技术人发现，通过加入盐(例如氯化钠和柠檬酸钠)或有机酸来增加水溶液的离子强度，即使存在糖类，不与水相分离的有机溶剂或难以与水相分离的有机溶剂也可以从水相中分离出来，生理活性物质也可以有效地转入有机溶剂相中。基于这些发现，本专利技术人完成了本专利技术。本专利技术方法是萃取含疏水基的水溶性有机化合物的方法，包括以下步骤使包含含疏水基的水溶性有机化合物和糖类的水溶液与极性有机溶剂接触，获得水相与有机相，由此使含疏水基的水溶性有机化合物转入有机相中。在一个实施方案中，该水溶液的糖类浓度可以是每100ml水溶液至少12g糖类。在一个实施方案中，含疏水基的水溶性有机化合物可以是水溶性芳族化合物。在一个实施方案中，含疏水基的水溶性有机化合物可以选自苯酚衍生物及其苷。在一个实施方案中，含疏水基的水溶性有机化合物可以选自氢醌苷、儿茶素、水杨苷、橙皮苷、橙皮苷基糖苷(hesperidinglycosides)、咖啡酸、水杨醇和鞣花单宁(elladitannin)。在一个实施方案中，水溶液可以进一步包含相分离助剂。在一个实施方案中，相分离助剂可以是盐或有机酸。在一个实施方案中，相分离助剂选自氯化钠、柠檬酸钠、硫酸镁和硫酸铵。在一个实施方案中，极性有机溶剂可以是四氢呋喃或乙腈。在一个实施方案中，极性有机溶剂可以是四氢呋喃、乙腈、丙酮或异丙醇。在一个实施方案中，含疏水基的水溶性有机化合物可以源自酶反应溶液。在一个实施方案中，酶反应溶液可以是糖基化反应溶液。在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种萃取含疏水基的水溶性有机化合物的方法，其包括以下步骤：使包含含疏水基的水溶性有机化合物和糖的水溶液与极性有机溶剂相接触，得到水相和有机相，由此使含疏水基的水溶性有机化合物转入有机相。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：栗木隆，西村隆久，杉本和久，
申请(专利权)人：江崎格力高株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]