广防风苷A及其制备和应用制造技术

一种广防风苷Ａ，具有式Ⅰ结构：　　　　＊＊＊　　Ⅰ。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及制药领域，具体涉及一种从广防风根中提取分离获得的新化合物-广防风苷A及其制备和应用。
技术介绍
对更年期综合征的治疗，长期以来都是使用雌激素类制剂，但由于激素有诸多的副作用及不良反应，甚至可能导致癌症，不易被广大妇女所接受。因此，就目前来说，在临床上尚无较为理想的药物。广防风，又名防风草，拉丁名Epimeredi indica(L.)Rothmalex，在《中药大辞典》中有记载，为唇形科植物防风草的全草，主要用于治疗感冒身热，呕吐，腹痛，筋骨疼痛，疮疡，湿疹，痔疾等；在中华人民共和国卫生部部颁标准《中药成方制剂》第二十册的贯防感冒片，是组方中的一味药。本专利技术申请人已在中国专利申请02110522.7中公开了广防风根的新用途。广防风根具有改善卵巢功能和调节雌激素和孕激素的作用，可用于制备治疗预防与雌激素、孕激素平衡失调有关的疾病的药物或保健品。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是对广防风根进行进一步研究，分离纯化其有效部位，提供一种广防风根主要活性成份单体广防风苷A。本专利技术公开的广防风苷A具有下述式I结构 化学名3-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-丙烯酸5-羟基-6--2-羟甲基-4-鼠李糖-四氢吡喃-3-酯根据化合物的UV、IR、ESI、HRESI、NMR、2D-NMR(COSY、HMQC、HMBC、NOESY)鉴定化合物广防风苷A，分子式为C13H40O15，分子量为652，熔点139～142℃，其结构式如式1；信号归属如表1。广防风苷A核磁共振13C谱见图1，广防风苷A核磁共振1H谱见图2，广防风苷A红外图谱见图3，广防风苷A紫外图谱见图4，广防风苷A质谱见图5。表1化合物广防风苷A的1H NMR、13C NMR数据(CD3OD，500MHz)Ferulic acid δC ΔH AglyconeΔC δH1127.68 1 132.692111.667.15(d，2)2 117.00 6.69(d，2)3150.64 3 147.474149.36 4 147.335116.476.80(d，8)5 112.81 6.65(d，8)6124.277.02(dd，8，2)6 121.11 6.61(dd，8，2)7147.107.62(d，16) α 36.71 2.80(t，7)8115.286.39(d，16) β 72.31 3.5---4.29169.07 OCH355.40 3.76(s)OCH355.44 3.86(s) GlucoseδC ΔH Rhamnose ΔC δH1 104.39 4.33(d，8) 1102.735.18(d，1)2 75.663.5---4.2272.34 3.5---4.23 84.083.53(m) 372.25 3.5---4.24 70.543.5---4.2473.99 3.5---4.25 75.373.5---4.2570.05 3.5---4.26 64.684.41(m) 617.88 1.25(d，6)本专利技术广防风苷A是通过下述技术方案获得的取广防风根粗粉6Kg，加10倍量的水加热提取3次，回收水至600ml，加水饱和的正丁醇萃取3次(400ml/次)，回收正丁醇至干，加蒸馏水500ml溶解后上大孔树脂(AB-8)，依次用20％，50％，95％的乙醇洗脱，回收50％的乙醇洗脱液至干，加适量50％的甲醇-水(v/v)溶解，上C-18硅胶柱，用50％的甲醇-水(v/v)洗脱，分部收集，薄层检查，合并，回收，得广防风苷A。本专利技术所要解决的另一技术问题在于公开上述广防风苷A在制备治疗预防与雌激素、孕激素平衡失调有关疾病药物中的应用，以及作为广防风根活性成份提取物含量检测标示物的应用。广防风根提取物是由广防风根部经水提、浓缩后获得的浸膏，广防风根苷A是广防风根提取物中的主要活性成份，同样具有改善卵巢功能和调节雌激素和孕激素的作用，可用于制备治疗预防与雌激素、孕激素平衡失调有关疾病的药物。同时广防风根提取物及其制剂在采用HPLC法测定含量方法中，采用广防风苷A作为含量的标示物，可准确、灵敏地确定提取物的活性成份含量，以方便地控制所述药物的使用剂量。以广防风苷A作为含量的标示物测定广防风根提取物含量的方法包括a、仪器与材料仪器Aglient1100高效液相色谱仪对照品广防风苷A试剂甲醇、乙腈、蒸馏水等所有试剂为分析纯样品广防风根提取物b、色谱条件 色谱柱DiscoveryC18(250*4.6mm，5um)流动相乙腈∶水＝27∶73流速1.0ml/min 柱温室温检测波长320nm 进样量20ulc、标准曲线①标准储备液的制备精密称取对照品4.95mg，加甲醇超声溶解，定量到25ml；②标准曲线的绘制精密吸取对照品储备液各0.4，0.8，1.2，1.6，2.0于2ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，分别得浓度为39.6ug/ml，79.2ug/ml，118.8ug/ml，158.4ug/ml，198ug/ml的Y1标准液，采用以上色谱条件，进样20ul。以峰面积(Y)为纵坐标，Y1浓度(X)为横坐标，进行线性回归，得回归方程Y＝20.139X-154.35；R2＝0.9994，线形范围0.792～3.96ug，Y1出峰时间为9.55mind、样品测定对照品溶液配制精密称取对照品一定量，加甲醇超声溶解，定容，分别吸取供试品溶液20ul，按上诉液相条件测定，记录峰面积，并用标准曲线计算Y1的含量；供试液的制备取广防风根提取物粉末，精密称取170.5mg，置于离心管中，加水超声提取两次，离心，取上清液，残渣再用水洗，合并上清液和洗液，定容至10ml容量瓶中，进样前用0.45μm滤膜过滤；取以上供试液在色谱条件下进样，按双点校正法计算样品中所含组分的含量，计算公式如下Y＝20.139X-154.35Y为峰面积值；X为样品的浓度μg/ml；则样品中广防风苷A的含量为X*10/取样量*100％。下面结合实施例对本专利技术作进一步的描述。附图说明图1广防风苷A核磁共振13C谱图2广防风苷A核磁共振1H谱图3广防风苷A红外图谱图4广防风苷A紫外图谱图5广防风苷A质谱图6广防风苷AHPLC7广防风根提取物HPLC图具体实施例方式实施例1、广防风苷A制备(1)取广防风根，粉碎，加10倍量的水，煎煮2小时，滤液待用，残渣加8倍量水，煎煮2小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩，喷雾干燥或真空干燥，得广防风根提取物。(2)取广防风根提取物6Kg，加10倍量的水加热提取3次，回收水至600ml，加水饱和的正丁醇萃取3次(400ml/次)，回收正丁醇至干，加蒸馏水500ml溶解后上大孔树脂(AB-8，天津南开大学化工厂)，依次用20％，50％，95％的乙醇洗脱，回收50％的乙醇洗脱液至干，加适量50％的甲醇-水(v/v)溶解，上C-18硅胶柱，用50％的甲醇-水(v/v)洗脱，分部收集，薄层检查，合并，回收，得广防风苷A。根据化合物的UV、IR、ESI、HRESI、NMR、2D-NMR(COSY、HMQC、HMBC、NOESY)鉴定化合物广防风苷A，分子本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄寰，
申请(专利权)人：上海药港生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：