贯叶金丝桃总黄酮提取物、其制备及应用制造技术

贯叶金丝桃总黄酮提取物、其制备及应用，所述提取物总黄酮含量为８０－９５％；其所含黄酮成分为：芦丁５．０－５０．０％、金丝桃苷６．０－７０．０％、异槲皮苷３．０－１０．０％、扁蓄苷０．５－５．０％、槲皮苷０．５－５．０％、槲皮素０．１－１．０％，其他黄酮类成分余量。本发明专利技术公开了贯叶金丝桃总黄酮提取物在制备保肝、治疗乙肝和治疗心脑缺血药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及贯叶金丝桃总黄酮提取物、该提取物的制备方法、中药制剂，及其在保肝、治疗乙肝和治疗心脑缺血药物中的应用。
技术介绍
贯叶金丝桃(贯叶连翘)为藤黄科金丝桃属植物贯叶金丝桃Hypericum perforatum L.的干燥地上部分，收载于2005年版药典一部159页。功能与主治为舒肝解郁，清热利湿，消肿止痛。用于情志不畅，气滞郁闷，关节肿痛，小便不利。目前研究贯叶金丝桃提取物方法有申请号为02115540.2的专利技术专利申请“贯叶连翘提取物的制备方法”、申请号为02134380.2的专利技术专利申请“一种贯叶连翘提取物的制备方法”、申请号为200410017163.7的专利技术专利申请“一种从贯叶连翘中制备总黄酮的工艺”、申请号为200410017828.4的专利技术专利申请“一种贯叶连翘提取物及制备方法”等4份专利。第一项专利申请对于贯叶连翘提取物的制备方法为贯叶连翘提取液经处理后通过大孔吸附树脂、离子交换树脂或聚酰胺填充的吸附柱，首先用10～15倍量(吸附柱填充的吸附材料体积的倍数，下同)的水淋洗到无色，再用2倍量的容量10-30％的甲醇、乙醇洗脱，洗脱完后再用4倍量的容量30-70％的甲醇、乙醇或丙酮洗脱，回收洗脱液，得流浸膏200ml，再用乙酸乙酯与乙醇混合溶剂萃取，回收溶剂，得稠膏，干燥，得干浸膏，收率为2.2-2.9％。干燥提取物经紫外分光光度法分析测得如下金丝桃素含量为0.6-1.2％，总黄酮含量为52-70％。该专利的缺点为未提供该有效部位由哪些黄酮成分组成，虽提供有效部位总黄酮含量为52-70％，但还未达到静脉注射用二类原料药的标准(80％以上)。第二项专利申请对于贯叶连翘提取物的制备方法为取贯叶连翘药材粉末1100g，用丙酮在室温并不断搅拌下浸提3次，溶剂用量依次为4000ml、3000ml、2500ml。过滤，合并提取液，得提取液7800ml。提取液加蒸馏水2300ml后，每次用石油醚5000ml萃取，共萃取2次，合并萃取液。取丙酮水层50’C减压回收丙酮，水相10％盐酸酸化至pH＝2，4’C静置48小时，离心，沉淀水洗至中性后冷冻干燥，得褐色沉淀8.68g。浓缩石油醚相至2200ml，用3000ml 50％乙醇萃取，弃去醇水相。用含3％NaOH的50％乙醇溶液萃取石油醚相，10％盐酸酸化至pH＝2，用3000ml石油醚萃取酸醇相，共萃取2次，合并石油醚相，45℃以下回收石油醚，得黑色粘稠浸膏12.3g。将褐色沉淀与黑色浸膏混合，丙酮溶解，加入复合稳定剂(Vc VE柠檬酸20∶100∶1)0.5g，在低于45℃下减压回收溶剂并真空干燥，得贯叶连翘提取物。其中含贯叶金丝桃素28.4％，金丝桃素类2.1％，黄酮类32。8％，三者含量总和63.3％。该专利的缺点为未提供该有效部位由哪些黄酮成分组成，虽提供有效部位三者含量总和为63.3％，但还未达到静脉注射用二类原料药的标准(80％以上)。第三项专利申请对于从贯叶连翘中制备总黄酮的提取分离方法为称取30g贯叶连翘浸提物，加入1000mL水，超声处理30分钟，使贯叶连翘浸提物悬浮于水中。离心过滤，滤液经络合比色法测定，其黄酮含量为9.1mg/mL，滤液待用。取140mL滤液，用水稀释至400ml，即可上柱分离。取一定量预处理好的弱极性AB-8树脂或中极性DM-301树脂，装入内径为1cm的玻璃柱中，使其床体积为20mL，以2BV/h的流速使400mL贯叶连翘溶液缓慢流过树脂床。然后用120mL水洗去柱中残留的溶液，再用浓度为50％的乙醇溶液以4BV/h的流速流过树脂柱，收集0.25～3BV间的洗脱液，减压浓缩至干，即得浅棕色粉末状提取物，其总黄酮含量为86.6％。该专利的缺点为未提供该总黄酮由哪些黄酮成分组成，虽提供该总黄酮中总黄酮含量为86％，但未标明总黄酮中主要活性成分金丝桃苷的含量。第四项专利申请对于贯叶连翘提取物的制备方法为取贯叶连翘药材，加入10倍量55-70％乙醇回流提取二次，每次1小时，合并提取液，滤过，减压浓缩至相对密度1.02-1.03(55℃-65‘C)，离心，上清液过LSA-20、D101、AB-8大孔吸附树脂柱，树脂吸附饱和后停止上样，20％乙醇洗脱，弃去洗脱液，再以75-95％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩、干燥，粉碎，过100目筛，即得贯叶连翘提取物。其中所含的苯并二蒽酮类含量为1.3-2.1％，总黄酮含量为50-61％。该专利的缺点为虽提供提取物的指纹图谱及提取物含量总和为63.1％，但还未达到静脉注射用二类原料药的标准(80％以上)。据文献报道，贯叶金丝桃(Hypericumper～orarum L.)主要成分有苯并二蒽酮类、黄酮类、挥发油类和间苯三酚类。贯叶金丝桃的应用还局限于其甲醇提取物制剂用于治疗抑郁症，以含量极低的金丝桃素作为质量标准，其富含的黄酮类成分却未被开发利用。药理研究表明黄酮类成分是其中的主要活性成分类别之一，化学研究表明贯叶金丝桃黄酮类成分以芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、扁蓄苷、槲皮苷和槲皮素等6种成分含量较高。不同的提取方法得到的提取物由于包含不同的黄酮类化合物、不同的含量，其药理、药性存在很大差异。因此在保证药效的前提下，尽可能提高提取物总黄酮的含量，特别是主要保肝、治疗乙肝活性成分金丝桃苷的含量和明确提取物中黄酮组成成分是技术难点。中药贯叶金丝桃及其制剂临床用于治疗轻度及中度抑郁症，尚未见到用于保肝、治疗乙肝和治疗心脑缺血性疾病的报道，。
技术实现思路
本专利技术是为避免上述现有技术所存在的问题，提供一种贯叶金丝桃总黄酮提取物，药理和化学研究表明该提取物活性成分明确，质量可控。本专利技术另一目的是提供该贯叶金丝桃总黄酮提取物的制备方法及其制剂。本专利技术目的还在于提供该贯叶金丝桃总黄酮提取物在保肝、治疗乙肝和治疗心脑缺血疾病中的应用。本专利技术目的是通过如下技术方案实现的本专利技术贯叶金丝桃总黄酮提取物，其特点是所述提取物总黄酮含量为80-95％；其所含黄酮成分为芦丁5.0-50.0％、金丝桃苷6.0-70.0％、异槲皮苷3.0-10.0％、扁蓄苷0.5-5.0％、槲皮苷0.5-5.0％、槲皮素0.1-1.0％，其他黄酮类成分余量。本专利技术贯叶金丝桃总黄酮提取物制备方法的特点是按如下步骤操作a、将干燥的贯叶金丝桃粉碎成粗粉，用8-10倍量的30-95％乙醇水溶液加热回流提取；b、将步骤a所得提取液在50℃-60℃的条件下减压浓缩至60℃时比重为1.13-1.16的浸膏，加入原生药量4-6倍量沸水，分次溶解，静置24小时过滤；c、将步骤b所得滤液通过聚酰胺和大孔吸附树脂混合柱层析，或通过聚酰胺柱层析，首先用水冲洗，再用不同浓度醇水溶液分段洗脱、收集、浓缩，所述分段洗脱、收集、浓缩的操作过程为用10-20％乙醇水溶液或10-20％甲醇水溶液洗脱1-3个柱体积、去除洗脱液；用40-50％乙醇水溶液或40-50％甲醇水溶液洗脱，按照洗脱时间的先后顺序，分段收集，分别获得前段洗脱液、中段洗脱液和后段洗脱液，去除前段和后段洗脱液；将所述中段洗脱液在50℃-60℃条件下减压浓缩，真空干燥得贯叶金丝桃总黄酮提取物；d、将步骤c中所得贯叶金丝桃总黄酮提取物用甲醇或乙醇重结晶，得结晶物和结晶母液；所述结晶物通过真本文档来自技高网...

【技术保护点】
贯叶金丝桃总黄酮提取物，其特征是所述提取物总黄酮含量为８０－９５％；其所含黄酮成分为：芦丁５．０－５０．０％、金丝桃苷６．０－７０．０％、异槲皮苷３．０－１０．０％、扁蓄苷０．５－５．０％、槲皮苷０．５－５．０％、槲皮素０．１－１．０％，其他黄酮类成分余量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王先荣，周亚球，柯仲成，
申请(专利权)人：周亚球，王先荣，
类型：发明
国别省市：34[中国|安徽]