四氢异喹啉-3-甲酰-K(GRPAK)RGDV,其合成,活性及应用制造技术

本发明专利技术公开下式的N‑(3S‑6,7‑二羟基‑1,1‑二甲基‑1,2,3,4‑四氢异喹啉‑3‑甲酰)‑Lys(Gly‑Arg‑Pro‑Ala‑Lys)‑Arg‑Gly‑Asp‑Val,公开了它的制备方法，公开了它的抗血栓活性，公开了它的溶血栓活性，公开了它治疗脑缺血大鼠的作用，因而本发明专利技术公开了它在制备抗血栓药物,溶血栓药物和治疗缺血性中风药物中的应用。

-K four (GRPAK) RGDV, -3-, its synthesis, activity and Application

The invention discloses a formula of N (3S 6,7 1,1 two hydroxy two methyl four 1,2,3,4 isoquinoline 3 formyl) Lys (Gly Arg Pro Ala Lys Arg Gly Asp) Val, discloses the preparation method, open its antithrombotic activity, discloses its thrombolytic activity, discloses it for the treatment of cerebral ischemia rats, thus the invention discloses it in preparing antithrombotic drugs, application of thrombolytic drugs and drugs in the treatment of ischemic stroke.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val,涉及它的制备方法，涉及它的抗血栓活性，涉及它的溶血栓活性，涉及它治疗脑缺血大鼠的作用，因而本专利技术涉及它在制备抗血栓药物,溶血栓药物和治疗缺血性中风药物中的应用。
技术介绍
缺血性中风是一类较常见且危害严重的脑血管疾病，特点是发病率高、病死率高、致残率高和复发率高。目前临床治疗缺血性中风面临没有有效药物的现实，尤其中风面4h以上的患者非死即残。专利技术对中风面4h以上的患者有效的药物是临床的重要需求。专利技术人曾经公开式II的咪唑啉化合物在中风面24h的大鼠缺血性中风模型上，显示优秀疗效。即连续静脉注射6天式II的咪唑啉化合物，每天1次，首次剂量为5μmol/kg，后5次的剂量为2μmol/kg具有优秀疗效。式中aa1和aa2可为同时存在,aa1存在但aa2不存在,或同时不存在；当aa1和aa2同时存在时,aa1为R(Arg),且aa2为G(Gly),A(Ala)或Q(Gln)；当aa1存在但aa2不存在时,aa1为R(Arg)；aa3可为S(Ser),V(Val)或F(Phe)。由于式II的咪唑啉化合物的2-位是4-氧乙酰-Lys。而该Lys的侧链氨基和主链羧基分别与RGD抗血栓四肽及ARPAK溶栓肽相连接,所以结构比较复杂需要简化。专利技术人经过3年实验研究，发现用3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰基代替上式中的1-取代苯基咪唑啉基,用Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val十肽基代替上式中的肽基可以获得疗效好的意想不到的技术效果。按照这个发现，专利技术人提出了本专利技术。
技术实现思路
1.本专利技术的内容之一是提供下式的N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val2.本专利技术的内容之二是提供N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val的制备方法,该方法由以下方法构成:(1)按照标准方法制备Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBz；(2)按照标准方法制备Gly-Arg(NO2)-Pro-Als-Lys(Z)-OBz；(3)制备3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢-异喹啉-3-羧酸；(4)制备N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)-OBzl；(5)制备N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)；(6)制备N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(7)制备N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(8)制备N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys[Gly-Arg(NO2)-Pro-Als-Lys(Z)-OBz]-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(9)制备N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Als-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val。3.本专利技术的内容之三是评价N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val的抗血栓活性。4.本专利技术的内容之四是评价N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val的溶血栓活性。5.本专利技术的内容之五是评价N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val在脑缺血24h后治疗脑缺血的活性。附图说明图1是N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val的合成路线.i)丙酮,三氟乙酸,MgSO4；ii)DCC,HOBt,NMM；iii)乙醇,Pd/C；iv)氯化氢-乙酸乙酯溶液(4M),冰浴；v)三氟甲磺酸,三氟乙酸。具体实施方式为了进一步阐述本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。实施例1液相接肽反应通法将N端保护的原料以无水DMF溶解，向得到的溶液中加入N-羟基苯并三氮唑(HOBt)。冰浴下缓慢加入用无水DMF溶解的N,N-二环己基羰二亚胺(DCC)，0℃搅拌15分钟得到反应液(I)。羧端保护的原料也用无水DMF溶解，用N-甲基吗啉(NMM)调pH至9，然后与反应液(I)混合，用N-甲基吗啉维持pH9，室温搅拌10小时，TLC监测原料点消失后，反应混合物过滤，滤液减压浓缩，得到粘稠状物质用乙酸乙酯溶解，得到的溶液依次用5％NaHCO3水溶液洗，5％KHSO4水溶液洗，饱和NaCl水溶液洗，乙酸乙酯相加无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干,残留物经柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇,50/1)，得到目标化合物。实施例2脱Boc通法将Boc保护的肽用少量的无水乙酸乙酯溶解，冰浴搅拌下加入氯化氢的乙酸乙酯溶液(4M)。TLC显示原料点消失后，反应溶液用水泵反复抽干，除净氯化氢气体，残留物用石油醚或无水乙醚反复研磨，得到目标化合物。实施例3脱苄酯基通法将多肽苄酯用CH3OH溶解，冰浴搅拌下缓慢滴加NaOH的水溶液(2M)，冰浴维持反应液温度在0℃，TLC显示原料消失。反应液用1M的盐酸调至中性，减压除去甲醇，继续用1M的盐酸酸化至pH2，溶液用乙酸乙酯萃取，合并的乙酸乙酯相用饱和NaCl水溶液洗涤至中性，用无水Na2SO4干燥，过滤，滤液减压浓缩得到目标化合物。实施例4脱苄氧羰基或苄酯基通法将具有苄氧羰基或苄酯保护的肽用适量的乙醇溶解，加入钯碳(反应物量的10％)，通入氢气室温氢解。反应结束后过滤,减压浓缩，得到目标化合物。实施例5制备Boc-Pro-Ala-OBzl按照实施例1的方法,从4.3g(20.0mmol)Boc-Pro和8.45g(24.0mmol)Tos·Ala-OBzl得到5.19g(68％)标题化合物,为无色粉末。ESI-MS(m/e):377[M+H]+。实施例6制备Boc-Pro-Ala按照实施例4本文档来自技高网...

【技术保护点】
下式的N‑(3S‑6,7‑二羟基‑1,1‑二甲基‑1,2,3,4‑四氢异喹啉‑3‑甲酰)‑Lys(Gly‑Arg‑Pro‑Ala‑Lys)‑Arg‑Gly‑Asp‑Val

【技术特征摘要】
1.下式的N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val2.权利要求1的N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Gly-Arg-Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val的制备方法,该方法包括以下步骤:(1)按照标准方法制备Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBz；(2)按照标准方法制备Gly-Arg(NO2)-Pro-Als-Lys(Z)-OBz；(3)制备3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢-异喹啉-3-羧酸；(4)制备N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)-OBzl；(5)制备N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)；(6)制备N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酰)-Lys(Boc)-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(7)制备N-(3S-6,7-二羟基-1,1-二甲基-1,2,3,4-四氢...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭师奇，赵明，李姗，彭莉，
申请(专利权)人：彭莉，
类型：发明
国别省市：北京;11