两步树脂法制备红景天苷制造技术

采用两步树脂法从天然红景天粗提取物中分离制备高纯度红景天苷，将红景天粗提取物用温度为２０～９０℃的水搅拌溶解、过滤，滤液调节ｐＨ为１～５，常温下流过吸附树脂柱，用丙酮、低碳醇或乙酸酯类有机溶剂洗脱，浓缩洗脱液，加入层析柱中常温下进行层析，层析液浓缩蒸干，加入低碳醇或乙酸酯类有机溶剂加热溶解，过滤，浓缩滤液，析出结晶，过滤得高纯度红景天苷。本发明专利技术仅经过一次树脂吸附、一次树脂层析，就可从低含量（１％～５％）的天然红景天粗提取物制备出纯度为９０％～９８％的红景天苷，而且吸附、层析过程都在常温下进行，工艺简单，适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从天然植物红景天粗提取物中分离制备红景天苷(salidroside)的方法，属生物化工

技术介绍
景天科红景天属植物是多年生草本或亚灌木植物，全世界共有90多种，中国有近80种，大部分生长在海拔3500～5000米的石灰岩、花冈岩山地、山谷岩石上。我国的红景天资源主要分布在东北、西北、华北及西南的一些地区。研究表明红景天具有抗缺氧、抗疲劳、抗衰老、抗辐射、抗肿瘤、降血脂防治心血管疾病等生物医学作用。红景天苷(salidroside)是红景天中的主要有效成分。文献报道红景天苷的制备多采用多步柱色谱法或制备型高效液相色谱法完成。传统提取方法有采用活性炭吸附，用乙醇或甲醇洗脱，将洗脱液浓缩后用滤膜过滤后用制备色谱进行精制。由于制备色谱的制备量很小，无法大规模生产。也有将红景天的醇提取物依次经过聚酰胺、大孔吸附树脂、硅胶及葡聚糖凝胶四种柱层析分离制备红景天苷。此方法使用的分离介质品种多，葡聚糖凝胶价格贵，硅胶无法循环使用，整个分离过程时间长，成本高，不适合工业化生产。采用高速逆流液相色谱法制备红景天苷，目前已制得克级产品，所得产品纯度高，缺点是制备量少，而且高速逆流液相色谱设备昂贵，无法规模化生产。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种工艺简单、产品纯度高、适合工业化生产的红景天苷的制备方法。为达到上述目的本专利技术采用的技术方案是将红景天粗提取物用温度为20～90℃的水搅拌溶解20分钟～3小时，过滤得到澄清滤液。调节滤液pH为1～5，常温下过吸附树脂柱进行吸附，然后用10％～40％的丙酮、低碳醇或乙酸酯类有机溶剂洗脱。收集洗脱液，浓缩洗脱液至糖浆状，加入吸附树脂混合均匀后烘干，加入树脂的量以烘干后树脂不互相粘连为佳。将烘干的吸附树脂加入已填充了吸附树脂的层析柱中，烘干的吸附树脂∶已装柱的吸附树脂＝1∶(1～10)，常温下用5％～25％低碳醇类有机溶剂进行层析，收集层析透过液，将其浓缩蒸干。加入低碳醇或乙酸酯类有机溶剂加热溶解，加热温度不超过60℃，趁热过滤，浓缩滤液，冷却至0℃，析出结晶，再用低碳醇或乙酸酯类有机溶剂进行洗晶，70℃以下干燥，得到产品，滤液回收套用。上述方案中所述吸附树脂是非极性吸附树脂，如上海华震科技有限公司产品HZ-816、美国RohmHass公司产品Amberlite XAD-4、Amberlite XAD-16、Amberlite XAD-1600或Amberchrom CG161。方案中低碳醇类有机溶剂是甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、异丙醇中的一种；所述乙酸酯类有机溶剂是醋酸乙酯或醋酸丁酯。与红景天苷的其他提取工艺相比，本专利技术的积极效果是仅经过一次树脂吸附、一次树脂层析和结晶就可从低含量(1％～5％)的天然红景天粗提取物制备出纯度为90％～98％的红景天苷，而且吸附、层析过程都在常温下进行，工艺简单，各分离步骤都是成熟的生物化工单元操作，适合工业化生产。具体实施例方式下面通过从市售红景天粗提取物(含量1％～5％)制备高纯度红景天苷实施例，对本专利技术作进一步说明。实施例1取红景天粗提取物500克，加水5000ml溶解，加热至30℃，搅拌保温2.5个小时。过滤得到澄清滤液。滤液调节pH至3，常温下流过HZ-816吸附树脂(上海华震科技有限公司)柱，然后通入30％的乙醇1200ml，收集流出液。流出液浓缩至糖浆状，加入HZ-816吸附树脂混合均匀并烘干。按照烘干的吸附树脂∶已装柱的吸附树脂＝1∶6的比例，将烘干的树脂加入已填充了HZ-816吸附树脂的层析柱，，常温下通入15％的乙醇溶液进行层析。收集层析液，浓缩至干。加入乙醇溶解，加热至50℃，趁热过滤。浓缩滤液，冷却至0℃，析出结晶，滤液回收套用。红景天苷结晶用乙醇清洗后，60℃真空干燥，得到红景天苷白色粉末，经HPLC测定，纯度为97.2％。实施例2取红景天粗提取物500克，加水5000ml溶解，加热至70℃，搅拌保温1个小时。过滤得到澄清滤液。滤液调节pH至4，常温下流过Amberlite XAD-4吸附树脂(美国RohmHaas公司产品)柱，然后通入25％的乙醇2000ml，收集流出液。流出液浓缩至糖浆状后加入Amberlite XAD-4吸附树脂混合均匀并烘干。按照烘干的吸附树脂∶已装柱的吸附树脂＝1∶2的比例，将烘干的树脂加入已填充了Amberlite XAD-1600吸附树脂(美国RohmHass公司产品)的层析柱，常温下通入20％的乙醇溶液进行层析，收集层析液，浓缩至干。加入正丁醇溶解，加热至50℃，趁热过滤。浓缩滤液，冷却至0℃，析出结晶，滤液回收套用。红景天苷结晶用正丁醇清洗后，60℃真空干燥，得到红景天苷白色粉末，经HPLC测定，纯度为95.6％。实施例3取红景天粗提取物500克，加水5000ml溶解，加热至60℃，搅拌保温1.5个小时。过滤得到澄清滤液。滤液调节pH至3，常温下流过HZ-816吸附树脂(上海华震科技有限公司)柱，然后通入15％的甲醇2500ml，收集流出液。流出液浓缩至糖浆状后加入HZ-816吸附树脂混合均匀并烘干。按照烘干的吸附树脂∶已装柱的吸附树脂＝1∶10的比例，将烘干的树脂加入已填充了HZ-816吸附了树脂的层析柱，常温下通入5％的甲醇溶液进行层析，收集层析液，浓缩至干。加入正丁醇溶解，加热至50℃，趁热过滤。浓缩滤液，冷却至0℃，析出结晶，滤液回收套用。红景天苷结晶用正丁醇清洗后，60℃真空干燥，得到红景天苷白色粉末，经HPLC测定，纯度为96.0％。实施例4取红景天粗提取物500克，加水5000ml溶解，加热至80℃，搅拌保温40分钟。过滤得到澄清滤液。滤液调节pH至1，常温下流过HZ-816吸附树脂(上海华震科技有限公司)柱，然后通入40％的丙酮1500ml，收集流出液。流出液浓缩至糖浆状后加入HZ-816吸附树脂混合均匀并烘干。将烘干的树脂加入已填充了HZ-816吸附树脂的层析柱，烘干的吸附树脂∶已装柱的吸附树脂＝1∶3，常温下通入25％的异丙醇溶液进行层析，收集层析液，浓缩至干。加入醋酸丁酯溶解，加热至50℃，趁热过滤。浓缩滤液，冷却至0℃，析出结晶，滤液回收套用。红景天苷结晶用醋酸丁酯清洗后，60℃真空干燥，得到红景天苷白色粉末，经HPLC测定，纯度为92.9％。权利要求1.一种红景天苷的制备方法(1)将红景天粗提取物用温度为20～90℃的水搅拌溶解20分钟～3小时，过滤得到澄清滤液；(2)调节滤液pH为1～5，常温下过吸附树脂柱进行吸附，然后用10％～40％的丙酮、低碳醇或乙酸酯类有机溶剂洗脱；(3)浓缩洗脱液至糖浆状，加入吸附树脂混合均匀后烘干；(4)将烘干的吸附树脂加入已填充了吸附树脂的层析柱中，常温下用5％～25％的低碳醇类有机溶剂进行层析，收集层析透过液，将其浓缩蒸干；(5)加入低碳醇或乙酸酯类有机溶剂加热溶解，加热温度不超过60℃，趁热过滤，浓缩滤液，冷却至0℃，析出结晶，用低碳醇或乙酸酯类有机溶剂进行洗晶，70℃以下干燥，得到产品，滤液回收套用。2.根据权利要求1所述红景天苷的制备方法，其特征在于所述吸附树脂是非极性吸附树脂。3.根据权利要求1和2所述红景天苷的制备方法，其特征在于所述吸附树脂是HZ-816(上海华震科技有限公司产品)、A本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种红景天苷的制备方法：（１）将红景天粗提取物用温度为２０～９０℃的水搅拌溶解２０分钟～３小时，过滤得到澄清滤液；（２）调节滤液ｐＨ为１～５，常温下过吸附树脂柱进行吸附，然后用１０％～４０％的丙酮、低碳醇或乙酸酯类有机溶剂洗脱；（３）浓缩洗脱液至糖浆状，加入吸附树脂混合均匀后烘干；（４）将烘干的吸附树脂加入已填充了吸附树脂的层析柱中，常温下用５％～２５％的低碳醇类有机溶剂进行层析，收集层析透过液，将其浓缩蒸干；（５）加入低碳醇或乙酸酯类有机溶剂加热溶解，加热温度不超过６０℃，趁热过滤，浓缩滤液，冷却至０℃，析出结晶，用低碳醇或乙酸酯类有机溶剂进行洗晶，７０℃以下干燥，得到产品，滤液回收套用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈骏，徐环昕，刘坐镇，周晓明，江邦和，
申请(专利权)人：周晓明，
类型：发明
国别省市：90[中国|成都]