从柑桔加工副产物中提取黄酮的方法技术

本发明专利技术公开了一种从柑桔加工副产物中提取黄酮的方法，包括以下步骤：１）原料制备：将柑桔加工副产物制成粉碎物；２）提取：将粉碎物用乙醇溶液提取，然后依次经过滤、减压浓缩后得粗提物；３）初次分离：将粗提物与水形成的悬浮液上聚酰胺柱，进行梯度洗脱，并分段收集洗脱液；４）纯化；５）将上述步骤所得的洗脱液分别进行减压浓缩即得不同种类的黄酮。利用本发明专利技术的方法从柑桔加工副产物中提取黄酮，速度快且提取纯度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从柑桔加工副产物中提取黄酮类物质的方法。
技术介绍
柑桔是我国果树产业中的主要水果之一，广泛分布在浙江、福建、广东等地。其栽培面积居世界第一，产量居世界第三。柑桔中含有丰富的类黄酮物质，目前已鉴定出的类黄酮单体有60多种，可分为黄烷酮、黄酮、黄酮醇、黄烷酮醇等。柑桔中具有丰富的类黄酮物质，柑桔类的黄酮类物质具有抗氧化、抗肿瘤以及保护心脑血管等多种保健、医疗功能，具有广泛应用前景。随着罐头和果汁加工产业的发展，产生大量的柑桔加工副产物，为柑桔总黄酮物质的提取提供了丰富的原料；柑桔加工副产物由柑桔皮、经络和加工后的桔渣等组成。近年来，相关领域的研究者对于桔皮生物类黄酮的提取已进行了一些研究。但大多集中在橙皮苷和柚皮苷上，对其他一些柑桔类黄酮物质的提取利用还不多；国家专利“柑桔类黄酮提取技术(03135524.2)”对黄酮的提取未进行分类，产物中主要为黄酮苷，而且方法采用复合溶剂，生产时间长，仅结晶一次就需72h。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种快速且提取纯度高的。为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种，包括以下步骤1)、原料制备将柑桔加工副产物经50～60℃烘干后进行粉碎，得粉碎物；2)、提取将粉碎物在6～15Mpa的压力和60～80℃的温度下，用浓度为75～85％的乙醇溶液提取，粉碎物与乙醇溶液的用量比为1千克5～10升，提取时间为10～15min；然后依次经过滤、减压浓缩后得粗提物； 3)、初次分离按照5～15mg粗提物/mL水的比例，将上述粗提物放入水中形成悬浮液；将上述悬浮液上聚酰胺柱，用水清洗至无糖后，再分别用浓度为60～75％的乙醇溶液和乙醇进行梯度洗脱，并分段收集洗脱液；4)、纯化将上述不同收集段的洗脱液减压浓缩后分别上葡聚糖凝胶柱；再分别用洗脱液II进行再次的洗脱；5)、将上述再次洗脱后所得的洗脱液分别进行减压浓缩即得不同种类的黄酮。作为本专利技术的的改进步骤3)的聚酰胺柱选用目数为60～80的聚酰胺树脂。作为本专利技术的的进一步改进步骤3)过柱流速为1～6BV/h，洗脱液流速为2～8BV/h；步骤4)过柱流速为1～6BV/h；洗脱液流速为2～8BV/h，洗脱液II为甲醇、乙醇、丙酮、或浓度大于30％的甲醇水溶液、乙醇水溶液或丙酮水溶液。本专利技术，采用现代功能食品学、化学的先进提取分离技术手段，因此具有以下优点1)、通过增加温度和增大压力来提高萃取的效率，提取时间比以往方法明显缩短；且提高了提取效率，只需提取一次即可，减少了溶剂的用量，从而降低了生产成本。2)、采用聚酰胺柱进行初步分离，并利用葡聚糖凝胶柱进一步纯化，大大提高了产品的纯度。采用本专利技术的方法可获得两种黄酮产物，其中黄酮苷含量达96％以上。多甲氧基黄酮为95％以上。具体实施例方式实施例1、一种，依次进行以下步骤1)、原料制备将柑桔加工副产物(柑桔皮)经55℃烘干后进行粉碎，过40-60目筛，得粉碎物。2)、提取将0.5kg粉碎物和3L浓度为80％的乙醇溶液装入萃取釜中，在10Mpa的压力和70℃的温度下提取15min。提取完毕后过滤，得上清液；将上清液真空浓缩后得粗提物。3)、初次分离将上述粗提物6g用400mL水悬浮溶解后形成悬浮液备用。取处理好的聚酰胺树脂(60-80目)，以95％乙醇湿法装柱(内径1cm)，柱体积为30mL。先用乙醇在柱上流动清洗，直至洗出液加适量水无白色浑浊现象为止；再用蒸馏水洗涤，除去乙醇后即得所需的聚酰胺柱。将上述备用的悬浮液上聚酰胺柱，过柱流速为4BV/h。然后用150～200mL水清洗以除去糖及部分杂质，用糖显色试验检测确定无糖即可。先用浓度为65％的乙醇溶液以5BV/h的流速洗脱，收集0.5-2BV间的洗脱液A；再用100％乙醇以5BV/h的流速洗脱，收集0.5-2BV的洗脱液B。4)、纯化将上述洗脱液A真空浓缩后，用少量浓度为70％乙醇溶液溶解(以溶解即可)，上葡聚糖凝胶柱G15(可加溴酚兰做指示剂)，过柱流速为2BV/h；再用浓度为70％乙醇溶液进行洗脱，流速3BV/h，待溴酚兰流出后，收集约0.5BV洗脱液，真空浓缩后即得黄酮苷。测得总量为97.2％，其中橙皮苷含量68.2％。将上述洗脱液B真空浓缩后，用少量乙醇溶解(以溶解即可)，上葡聚糖凝胶柱LH-20(可加溴酚兰做指示剂)，过柱流速为2BV/h，再用乙醇进行洗脱，流速3BV/h，待溴酚兰流出后，弃去前面0.5BV收集大于0.5～1.5BV的洗脱液，真空浓缩后即得多甲氧基黄酮。测得总量为95.2％，其中川皮素为46.5％，桔皮素为35.2％。实施例2、一种，依次进行以下步骤1)、原料制备将柑桔加工副产物(胡柚皮)经60℃烘干后进行粉碎，过40-60目筛，得粉碎物。2)、提取将0.5kg粉碎物和5L浓度为85％的乙醇溶液装入萃取釜中，在15Mpa的压力和60℃的温度下提取10min。提取完毕后过滤，得上清液；将上清液真空浓缩后得粗提物。3)、初次分离将上述粗提物7.5g，用1000mL水悬浮溶解后形成悬浮液备用。取处理好的聚酰胺树脂(60-80目)，以95％乙醇湿法装柱(内径2.5cm)，柱体积为100mL。先用乙醇在柱上流动清洗，直至洗出液加适量水无白色浑浊现象为止；再用蒸馏水洗涤，除去乙醇后即得所需的聚酰胺柱。将上述备用的悬浮液上聚酰胺柱，过柱流速为6BV/h。然后用150-200mL水清洗以除去糖及部分杂质，可用糖显色试验检测确定无糖即可。用浓度为70％的乙醇以8BV/h的流速洗脱，收集0.5-2BV间的洗脱液A，再用100％乙醇以8BV/h的流速洗脱，收集0.5-2BV的洗脱液B。4)、纯化将上述洗脱液A浓缩后，用少量70％乙醇溶解(以溶解即可)，上葡聚糖凝胶柱G15(可加溴酚兰做指示剂)，过柱流速为2BV/h，再用60％乙醇进行洗脱，流速3BV/h，待溴酚兰流出后，收集约0.5BV洗脱液，真空浓缩后即得黄酮苷。测得总量为97.8％，其中柚皮苷为61.2％，新橙皮苷含量20.5％。将上述洗脱液B浓缩后，用少量乙醇溶解，上葡聚糖凝胶柱LH-20(可加溴酚兰做指示剂)，过柱流速为2BV/h，再用乙醇进行洗脱，流速3BV/h，待溴酚兰流出后，弃去前面0.5BV收集大于0.5-1.5BV的洗脱液，真空浓缩后即得多甲氧基黄酮。测得总量为96.1％，其中川皮素为46.2％，桔皮素为36.5％。实施例3、一种，依次进行以下步骤1)、原料制备将柑桔加工副产物(柑桔皮、经络和加工后的桔渣等的混合物)经50℃烘干后进行粉碎，过40-60目筛，得粉碎物。2)、提取将0.5kg粉碎物和2.5L浓度为75％的乙醇溶液装入萃取釜中，在6Mpa的压力和80℃的温度下提取12min。提取完毕后过滤，得上清液；将上清液真空浓缩后得粗提物。3)、初次分离将上述粗提物2g用400mL水悬浮溶解后形成悬浮液备用。取处理好的聚酰胺树脂(60-80目)，以95％乙醇湿法装柱(内径1cm)，柱体积为30mL。先用乙醇在柱上流动清洗，直至洗出液加适量水无白色浑浊现象为止；再用蒸馏水洗涤，除去乙醇后即得所需的聚酰胺柱。将上述备用的悬浮液上聚酰胺柱，过柱流速为4BV/h。然后用150～200mL水清洗以除去糖及部分杂质，用糖显色试验检测确定无糖即可本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从柑桔加工副产物中提取黄酮的方法，包括以下步骤：１）、原料制备：将柑桔加工副产物经５０～６０℃烘干后进行粉碎，得粉碎物；２）、提取：将粉碎物在６～１５Ｍｐａ的压力和６０～８０℃的温度下，用浓度为７５～８５％的乙醇溶液提取，粉碎物与乙醇溶液的用量比为１千克：５～１０升，提取时间为１０～１５ｍｉｎ；然后依次经过滤、减压浓缩后得粗提物；３）、初次分离：按照５～１５ｍｇ粗提物／ｍＬ水的比例，将上述粗提物放入水中形成悬浮液；将上述悬浮液上聚酰胺柱，用水清洗至无糖后，再分别用浓度为６０～７５％的乙醇溶液和乙醇进行梯度洗脱，并分段收集洗脱液；４）、纯化：将上述不同收集段的洗脱液减压浓缩后分别上葡聚糖凝胶柱；再分别用洗脱液Ⅱ进行再次的洗脱；５）、将上述再次洗脱后所得的洗脱液分别进行减压浓缩即得不同种类的黄酮。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张玉，吴慧明，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]