本发明专利技术涉及一种制备高纯度龙胆苦苷的方法，采用分析型高速逆流色谱仪的小量制备及半制备型高速逆流色谱仪的较大量制备，其特征在于，选用氯仿－甲醇－正丁醇－水体积比为４－８∶３－６∶１－４∶３－６的溶剂系统，一次分离可以得到龙胆苦苷。不需使用固体填料，没有不可逆吸附，样品无损失、无污染、高效、快速、低成本和大制备量分离龙胆苦苷的方法。获得的龙胆苦苷纯度可达９２％以上，适用于从由各种工艺条件制备的龙胆粗提物中分离制备龙胆苦苷。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及，是一种应用高速逆流色谱(HSCCC)法从龙胆粗提物中制备高纯度龙胆苦苷的方法。
技术介绍
龙胆为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.、龙胆Gentiana scabra Bge.、三花龙胆Gentiana triflora pall.或坚龙胆Gentiana rigescens Franch.的干燥根及根茎。其药用部分的主要有效成分为龙胆苦苷，龙胆苦苷属环烯醚萜苷类化合物，有清肝解毒、消食健胃的功效。龙胆苦苷已被中国药典2005版作为龙胆HPLC方法含量测定的定量化学指标。同时还是龙胆及其制品指纹图谱的标志性成分。因此说高纯度龙胆苦苷用途广泛，需求量大。以前报道的龙胆苦苷提取分离主要是采用柱色谱法，需要使用固体填料，易产生不可逆吸附，具有样品易损失、易污染、低效、速度慢和分离步骤繁琐等缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，是应用高速逆流色谱(HSCCC)法从龙胆粗提物中制备高纯度龙胆苦苷；是不需使用固体填料，而是应用两相互不混溶的溶剂系统在支撑管内高速行星运动的方式下进行天然产物的分离纯化，因而没有不可逆吸附，具有样品无损失、无污染、高效、快速和大制备量分离的优点。本专利技术的技术方案是这样实现的，采用分析型高速逆流色谱仪的小量制备及半制备型高速逆流色谱仪的较大量制备，其特征在于，选用氯仿-甲醇-正丁醇-水体积比为4-8∶3-6∶1-4∶3-6的溶剂系统，一次分离可以得到龙胆苦苷。室温对分离度有一定影响，以上分离条件适合室温在16-28℃时使用。当室温降低时，降低甲醇的比例，以提高分离度。反之亦然。本专利技术的积极效果是提供了一种不需使用固体填料，没有不可逆吸附，样品无损失、无污染、高效、快速、低成本和大制备量分离龙胆苦苷的方法。具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术做进一步的描述实施例1采用分析型高速逆流色谱仪，溶剂选用正己烷-甲醇-水系统。首先以4∶5∶3∶5体积比将上述溶剂体系置于分液漏斗中，摇匀后静止分层。待平衡一段时间后分离上、下相，以上相为固定相，下相为流动相。取适量龙胆粗提物溶解于2ml下相中待用。采用美国产CCC-3000型高速逆流色谱仪进行分离，将固定相注满色谱分离柱，开启速度控制器，当达到预定转速时，开始以一定流速泵入流动相，当流动相流出时，通过六通进样阀进样。由首端向尾端洗脱，主机正转，转速为1300r/min，定时收集组分。实施例2 采用半制备型高速逆流色谱仪，溶剂选用正己烷-甲醇-水系统。首先以7∶3∶1∶3体积比将上述溶剂体系置于分液漏斗中，摇匀后静止分层。待平衡一段时间后分离上、下相，以上相为固定相，下相为流动相。取适量龙胆粗提物溶解于10ml下相中待用。采用美国产CCC-1000型高速逆流色谱仪进行分离，将固定相注满色谱分离柱，开启速度控制器，当达到预定转速时，开始以一定流速泵入流动相，当流动相流出时，通过六通进样阀进样。由首端向尾端洗脱，主机正转，转速为900r/min，定时收集组分。实施例3采用分析型高速逆流色谱仪，溶剂选用正己烷-甲醇-水系统。首先以4∶3∶1∶3体积比将上述溶剂体系置于分液漏斗中，摇匀后静止分层。待平衡一段时间后分离上、下相，以上相为固定相，下相为流动相。取适量龙胆粗提物溶解于2ml下相中待用。采用美国产CCC-3000型高速逆流色谱仪进行分离，将固定相注满色谱分离柱，开启速度控制器，当达到预定转速时，开始以一定流速泵入流动相，当流动相流出时，通过六通进样阀进样。由首端向尾端洗脱，主机正转，转速为1300r/min，定时收集组分。实施例4采用分析型高速逆流色谱仪，溶剂选用正己烷-甲醇-水系统。首先以8∶6∶4∶6体积比将上述溶剂体系置于分液漏斗中，摇匀后静止分层。待平衡一段时间后分离上、下相，以上相为固定相，下相为流动相。取适量龙胆粗提物溶解于10ml下相中待用。采用美国产CCC-3000型高速逆流色谱仪进行分离，将固定相注满色谱分离柱，开启速度控制器，当达到预定转速时，开始以一定流速泵入流动相，当流动相流出时，通过六通进样阀进样。由首端向尾端洗脱，主机正转，转速为900r/min，定时收集组分。权利要求1.，其特征在于选用氯仿-甲醇-正丁醇-水体积比为4-8∶3-6∶1-4∶3-6的溶剂系统，采用分析型高速逆流色谱仪的小量制备及半制备型高速逆流色谱仪的较大量制备，一次分离可以得到龙胆苦苷。全文摘要本专利技术涉及，采用分析型高速逆流色谱仪的小量制备及半制备型高速逆流色谱仪的较大量制备，其特征在于，选用氯仿－甲醇－正丁醇－水体积比为4－8∶3－6∶1－4∶3－6的溶剂系统，一次分离可以得到龙胆苦苷。不需使用固体填料，没有不可逆吸附，样品无损失、无污染、高效、快速、低成本和大制备量分离龙胆苦苷的方法。获得的龙胆苦苷纯度可达92％以上，适用于从由各种工艺条件制备的龙胆粗提物中分离制备龙胆苦苷。文档编号C07H1/00GK101070335SQ200610016839公开日2007年11月14日 申请日期2006年5月10日 优先权日2006年5月10日专利技术者王艳艳, 王英平, 赵景辉, 刘继永, 焉石 申请人:赵景辉本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种制备高纯度龙胆苦苷的方法，其特征在于：选用氯仿－甲醇－正丁醇－水体积比为４－８∶３－６∶１－４∶３－６的溶剂系统，采用分析型高速逆流色谱仪的小量制备及半制备型高速逆流色谱仪的较大量制备，一次分离可以得到龙胆苦苷。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王艳艳，王英平，赵景辉，刘继永，焉石，
申请(专利权)人：赵景辉，
类型：发明
国别省市：22[中国|吉林]
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