一种水葫芦叶蛋白的提取的方法技术

本发明专利技术公开了一种水葫芦叶蛋白的提取的方法，包括以下步骤：水葫芦的预处理、粗蛋白的提取、蛋白纯化、干燥。本发明专利技术采用低温醇洗法提取，保证了蛋白的生物活性，所提取的蛋白纯度达91.4%，为水葫芦叶蛋白开发及应用提供了有价值的方法。

Method for extracting water hyacinth leaf protein

The invention discloses a method for extracting water hyacinth leaf protein, which comprises the following steps: pretreatment of water hyacinth, extraction of crude protein, protein purification and drying. The invention adopts low-temperature alcohol leaching extraction, the biological activity of the protein, the extracted protein was up to 91.4%, providing a valuable method for the development and application of water hyacinth leaf protein.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及农作物深加工领域，尤其涉及一种水葫芦叶蛋白的提取的方法。
技术介绍
水葫芦是单子叶植物，雨久花科凤眼兰属。原产南美洲，在气温13℃开始繁殖，气温39℃时仍能繁殖，是世界上生长、繁殖最快的水草之一。水葫芦已在我国南方17个省(市、自治区)泛滥成灾，是目前世界上危害最严重的多年生水生杂草之一。据报道，我国每年人工打捞水葫芦花费至少超过1亿元。水葫芦的生长相当迅速，其倍增长周期为7天左右，据报道其最高产量可达到日产1800kg/公顷(干重)左右，一般情况下，水肥充足时，其年亩产干物质量达5000一7500kg，水肥不足时，亦有1000一200kg，甚至可达到亩年产量60吨以上，而且水葫芦的蛋白质含量高，粗蛋白质含量一般占其鲜重的1.2%左右，是其主要的有机营养成分以亩产5万公斤的新鲜水葫芦计算，能生产出600公斤的叶蛋白，如果能开发利用，其产生的经济效益非常高，一般农作物包括大豆难以与之匹敌。水葫芦所含的有机营养成分中，蛋白质的含量高，为19%一26%，它最具开发潜力，在水葫芦的开发利用研究中应该将其作为重点。然而，目前有关如何利用水葫芦为原料生产蛋白的研究尚少见报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是，克服现有技术的不足，提供一种水葫芦叶蛋白的提取的方法。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用如下的技术方案：一种水葫芦叶蛋白的提取的方法，其特征在于，操作步骤如下：（1）原料预处理将新鲜水葫芦叶用自来水清洗数次，捞去杂物，沥去水分;在4℃冰箱中预冷lh将95%乙醇放在-20℃冰箱中预冷至-20℃；（2）粗蛋白的制取将预冷的水葫芦叶片放入打浆机中，迅速加入4倍重量的已预冷至-20℃的95%的食用乙醇，打浆30min，后将己打成浆状的水葫芦乙醇溶液过100目筛，除去粗纤维，得到的蛋白质乙醇混合物，再经滤纸过滤，滤纸上得到的便是水葫芦叶粗蛋白，再将其反复醇洗至无绿色为止；整个制取过程在-5℃的冰箱中进行，得到的粗蛋白放在5℃的冰箱中自然挥发干燥，测粗蛋白中各组分的含量。（3）蛋白的纯化精确称取经低温醇洗过的水葫芦叶粗蛋白粉，按液料比25:l(V/W)分散于食盐水中，用NaOH溶液调pH至12.0，于40℃下搅拌30min，在3500r/min下离心20min，残渣用上法再提取一次，合并两次提取的上清液，取上清液加入硫酸铵至质量分数为30%，用HCl溶液调pH至5.5，有大量蛋白质析出，过滤，将滤纸上的蛋白质重新用pH12.0的NaoH溶液溶解，将此溶液装入透析袋，置于蒸馏水中，于5℃下透析，每6h换水一次，透析三天后，将透析液倒出，加入-20℃的乙醇至乙醇含量为80%，置于-5℃下沉淀lh，后经滤纸过滤，收集沉淀；（4）干燥：将收集的沉淀采用低温真空干燥，得水葫芦分离叶蛋白。步骤（3）中的食盐水是0.4mol/L的NaCl溶液。步骤（3）中的NaOH溶液是0.5mol/L的NaOH溶液。步骤（3）中的HCl溶液是0.5mol/L的HCl溶液。本专利技术的制备工艺得到的水葫芦叶蛋白含量高达91.4%，属于优质的植物蛋白源。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术的实质性内容作进一步详细的描述。实施例1（1）原料预处理将新鲜水葫芦叶用自来水清洗数次，捞去杂物，沥去水分;在4℃冰箱中预冷lh将95%乙醇放在-20℃冰箱中预冷至-20℃；（2）粗蛋白的制取将预冷的水葫芦叶片200g放入打浆机中，迅速加入4倍重量的已预冷至-20℃的95%的食用乙醇，打浆30min，后将己打成浆状的水葫芦乙醇溶液过100目筛，除去粗纤维，得到的蛋白质乙醇混合物，再经滤纸过滤，滤纸上得到的便是水葫芦叶粗蛋白，再将其反复醇洗至无绿色为止；整个制取过程在-5℃的冰箱中进行，得到的粗蛋白放在5℃的冰箱中自然挥发干燥，得4.98g水葫芦粗蛋白，经检测蛋白含量为41.61%，蛋白质的得率为82.1%。（3）蛋白的纯化精确2.00g称取经低温醇洗过的水葫芦叶粗蛋白粉，按液料比25:l(V/W)分散于0.4mol/L食盐水中，用0.5mol/LNaOH溶液调pH至12.0，于40℃下搅拌30min，在3500r/min下离心20min，残渣用上法再提取一次，合并两次提取的上清液，取上清液加入硫酸铵至质量分数为30%，用0.5mol/LHCl溶液调pH至5.5，有大量蛋白质析出，过滤，将滤纸上的蛋白质重新用pH12.0的NaoH溶液溶解，将此溶液装入透析袋，置于蒸馏水中，于5℃下透析，每6h换水一次，透析三天后，将透析液倒出，加入-20℃的乙醇至乙醇含量为80%，置于-5℃下沉淀lh，后经滤纸过滤，收集沉淀；（4）干燥：将收集的沉淀采用低温真空干燥，得水葫芦分离叶蛋白0.5893g。经检测蛋白质纯度为91.2%(干基)。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水葫芦叶蛋白的提取的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）原料预处理将新鲜水葫芦叶用自来水清洗数次,捞去杂物,沥去水分;在4℃冰箱中预冷lh将95%乙醇放在‑20℃冰箱中预冷至‑20℃；（2）粗蛋白的制取将预冷的水葫芦叶片放入打浆机中,迅速加入4倍重量的已预冷至‑20℃的95%的食用乙醇,打浆30min,后将己打成浆状的水葫芦乙醇溶液过100目筛,除去粗纤维,得到的蛋白质乙醇混合物,再经滤纸过滤,滤纸上得到的便是水葫芦叶粗蛋白,再将其反复醇洗至无绿色为止；整个制取过程在‑5℃的冰箱中进行，得到的粗蛋白放在5℃的冰箱中自然挥发干燥；（3）蛋白的纯化精确称取经低温醇洗过的水葫芦叶粗蛋白粉,按液料比25:l(V/W)分散于食盐水中,用NaOH溶液调pH至12.0,于40℃下搅拌30min,在3500r/min下离心20min,残渣用上法再提取一次,合并两次提取的上清液,取上清液加入硫酸铵至质量分数为30%,用HCl溶液调pH至5.5,有大量蛋白质析出,过滤,将滤纸上的蛋白质重新用pH12.0的NaoH溶液溶解,将此溶液装入透析袋,置于蒸馏水中,于5℃下透析,每6h换水一次，透析三天后,将透析液倒出,加入‑20℃的乙醇至乙醇含量为80%,置于‑5℃下沉淀lh,后经滤纸过滤,收集沉淀；（4）干燥：将收集的沉淀采用低温真空干燥,得水葫芦分离叶蛋白。...

【技术特征摘要】
1.一种水葫芦叶蛋白的提取的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）原料预处理将新鲜水葫芦叶用自来水清洗数次,捞去杂物,沥去水分;在4℃冰箱中预冷lh将95%乙醇放在-20℃冰箱中预冷至-20℃；（2）粗蛋白的制取将预冷的水葫芦叶片放入打浆机中,迅速加入4倍重量的已预冷至-20℃的95%的食用乙醇,打浆30min,后将己打成浆状的水葫芦乙醇溶液过100目筛,除去粗纤维,得到的蛋白质乙醇混合物,再经滤纸过滤,滤纸上得到的便是水葫芦叶粗蛋白,再将其反复醇洗至无绿色为止；整个制取过程在-5℃的冰箱中进行，得到的粗蛋白放在5℃的冰箱中自然挥发干燥；（3）蛋白的纯化精确称取经低温醇洗过的水葫芦叶粗蛋白粉,按液料比25:l(V/W)分散于食盐水中,用NaOH溶液调pH至12.0,于40℃下搅拌30min,在3500r/min下离心20min,残渣用上法再提取一次,合并两次...

【专利技术属性】
技术研发人员：宁发子，殷华，其他发明人请求不公开姓名，
申请(专利权)人：重庆都好生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50