一种合成RNA单体的方法技术

技术编号:1526984 阅读:725 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种合成RNA单体的方法。该方法中所采用的RNA合成单体以其独特的2’-保护基为出发点,RNA合成单体结构不同于以往的RNA合成单体。其特点在于该保护基在酸性脱保护条件下稳定,在碱性脱保护条件下也很稳定。在固相合成完成后,在把5’-DMT保护基脱掉而2’-保护基仍在链上的情况下可以进行高压液相纯化,一级纯化后的产品可以在适当的条件下将2’-保护基完全脱下来,进一步纯化后即可与另一条互补链退火成双链。由此合成及纯化获得的RNA寡核苷酸纯度可达97%以上,纯化回收率可达55%以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种RNA单体的制备方法。
技术介绍
RNA单体目前由Glen Research, Transgenomic, ChemGene等少数几个大公 司垄断生产,国内无任何RNA单体生产厂家;我们依靠自有技术生产的RNA单体 质量指标高于现有厂家生产产品;
技术实现思路
本专利技术的目的在于采用独特的2'-保护基为出发点,合成RNA单体。 本专利技术的上述目的是通过下述技术方案实现的 A.制备2,-保护基1_(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPPB. 尿苷单体合成;C. 胞苷单体合成;D. 腺苷单体合成;E. 鸟苷单体合成; 所述的RNA单体合成方法,其特征在于采用独特的2,-保护基1-(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPP)为出发点,合成RNA 单体。附图说明图1为CPP制备方法结构图 图2为尿苷单体合成流程图 图3为胞苷单体合成流程图 图4为腺苷单体合成流程图 图5为鸟苷单体合成流程图具体实施例方式2'-保护基CPP的制备方法3-氯丙酰氯与乙烯在刘易斯酸的作用下生产1, 5-二氯戊酮,再与3-氯 苯胺縮合形成N- (3-氯苯)-哌啶酮,后者再与甲醇縮合生成二甲基-N- (3-氯苯)-哌啶縮酮,最后再在减压加热条件下脱掉一分子甲醇生成所要的 1-(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPP);RNA合成单体的制备尿苷单体3 , ,5 '-氢氧基用Marcwicz保护基进行保护,然后在酸 性条件下引入2 , -CPP保护基,随后脱去Marcwicz保护基,5 ,-氢氧 基用1,4-二甲氧基三苯甲烷氯(DMTrCl)进行保护,最后在3'-位用磷酸化 试剂进行亚磷酰胺化,制得尿苷单体。胞苷单体、腺苷单体、鸟苷单体制备将胞苷/腺苷/鸟苷的碱基先用苯 甲酰基保护,后继步骤与鸟苷相同。权利要求1、一种RNA单体的合成方法,其特征在于独特的2’-保护基为出发点,RNA合成单体结构不同于以往的RNA合成单体。合成方法包括如下步骤A.制备2’-保护基1-(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPP);B.尿苷单体合成;C.胞苷单体合成;D.腺苷单体合成;E.鸟苷单体合成。2、 根据权利要求1所述的RNA单体合成方法获得的RNA单体,其特征在于, 合成及纯化获得的RNA寡核苷酸纯度可达97%以上,纯化回收率可达55% 以上。全文摘要本专利技术公开了一种合成RNA单体的方法。该方法中所采用的RNA合成单体以其独特的2’-保护基为出发点,RNA合成单体结构不同于以往的RNA合成单体。其特点在于该保护基在酸性脱保护条件下稳定,在碱性脱保护条件下也很稳定。在固相合成完成后,在把5’-DMT保护基脱掉而2’-保护基仍在链上的情况下可以进行高压液相纯化,一级纯化后的产品可以在适当的条件下将2’-保护基完全脱下来,进一步纯化后即可与另一条互补链退火成双链。由此合成及纯化获得的RNA寡核苷酸纯度可达97%以上,纯化回收率可达55%以上。文档编号C07H21/00GK101289486SQ200710039568公开日2008年10月22日 申请日期2007年4月18日 优先权日2007年4月18日专利技术者曹跃琼 申请人:上海吉凯基因化学技术有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种RNA单体的合成方法,其特征在于独特的2’-保护基为出发点,RNA合成单体结构不同于以往的RNA合成单体。合成方法包括如下步骤:    A.制备2’-保护基1-(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPP);    B.尿苷单体合成;    C.胞苷单体合成;    D.腺苷单体合成;    E.鸟苷单体合成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:曹跃琼
申请(专利权)人:上海吉凯基因化学技术有限公司
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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