瓜蒌果实醇提物在制备防治膀胱癌药物或保健品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了瓜蒌果实醇提物在制备防治膀胱癌药物或保健品中的应用。实验证明瓜蒌果实醇提物能有效调控肿瘤生长相关基因，抑制肿瘤细胞生长。在裸鼠体内，瓜蒌果实醇提物有效抑制膀胱癌细胞裸鼠移植瘤的生长。能够减少化疗药物的毒副作用，为临床治疗膀胱癌干祖细胞生长提供新的靶向药物。而且瓜蒌价格低廉，取材方便。有望将瓜蒌果实醇提物作为有效成分制备防治膀胱癌药物或保健品。

Trichosanthes ethanol extract of fruit of application of preventing bladder cancer drugs or health products for the

The present invention discloses Trichosanthes ethanol extract of fruit was used to control bladder cancer drugs or health products for the. Experiments show that the ethanol extract of fruit of Fructus Trichosanthis can effectively control the growth of tumor related genes, inhibiting the growth of tumor cells. In vivo, Trichosanthes ethanol extract of fruit effectively inhibited bladder cancer cell growth in nude mice. It can reduce the toxic and side effects of chemotherapeutic drugs, and provide a new target for clinical treatment of bladder cancer stem cells. And Gualou low price, convenient. Is expected to Trichosanthes ethanol extract of fruit as an effective ingredient for preventing and curing bladder cancer drugs or health products.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中药提取物的用途，特别是涉及一种瓜蒌果实醇提物在制备防治膀胱癌药物或保健品中的应用。
技术介绍
世界范围内膀胱尿路上皮癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤，美国每年新增病例约74000例，死亡16000例[1]。其发病率居男性恶性肿瘤的第7位，女性第17位。在我国，膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，2009年城市地区发病率达8.11/10万(年龄标化率ASR:3.55/10万)，其中男性为12.00/10万(ASR:5.51/10万),2015预计发病率达80.5/10万[2，3]。膀胱移行细胞癌在我国是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，近年发病率呈稳步上升趋势。侵袭和转移为膀胱癌最主要死因[4]。30％肿瘤为侵袭性膀胱癌，另外，大约60％浅表性膀胱癌会复发，且20-30％会进展为肌层浸润肿瘤[5]。当肿瘤侵袭，长期存活率显著降低。局限性肿瘤的5年总生存率为71％而转移癌的5年生存率仅5％[6]。目前膀胱癌的主要治疗方法是外科手术治疗、放疗、化疗和生物治疗等。外科手术治疗是最有效的治疗手段。然而绝大多数患者就诊时就已经是中晚期，或者是晚期，错过了手术治疗的机会。放射治疗为一种局部治疗，其疗效是有限的，同时亦有剂量限制性、毒性问题。化疗可应用于几乎全部癌症患者，因此抗肿瘤药物治疗成为中晚期癌症患者的主要治疗手段。然而绝大多数化疗病人最终都死于肿瘤耐药和肿瘤转移。鉴于目前抗肿瘤药物对膀胱肿瘤疗效不理想，且具毒副作用的特点，开发新型抗膀胱肿瘤药物成为攻克膀胱癌的难点。其中研究和开发天然抗耐药肿瘤药物是目前抗肿瘤药物研发中的前沿和热点课题。瓜蒌来源于葫芦科植物栝楼TrichosantheskirilowiiMaxim(TKM)或双边栝楼TrichosanthesrosthorniiHarms.瓜蒌的干燥成熟果实，俗称栝楼、吊瓜，属于常用中药材，具有清热化痰、宽胸散结、润燥滑肠等功效，用于治疗肺热咳嗽、痰浊黄稠、胸痹心痛、结胸痞满、乳痈、肺痈、肠痈、大便秘结等病证[7]。瓜蒌能抑制多种肿瘤的生成，动物实验发现,瓜蒌对肉瘤比对腹水癌细胞作用强,瓜蒌在体外可直接抑制HeLa细胞,而对巨噬细胞则有促进和损伤双向作用[8]。瓜蒌果实乙醇提取物治疗膀胱肿瘤的作用目前还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供瓜蒌果实醇提物在制备防治膀胱癌药物或保健品中的应用。本专利技术的技术方案概述如下：瓜蒌果实醇提物在制备防治膀胱癌药物或保健品中的应用。所述瓜蒌果实醇提物用下述步骤提取：(1)取鲜瓜蒌果实在不锈钢压力容器中，在105-115℃，蒸20-40分钟；(2)抽真空脱气，均质,得混合物，以料液质量比为1:23-27的比例，将混合物与60-70℃、pH＝8.5-9.5的水混匀，放置2-5小时，搅匀，过滤，用与滤液等体积的体积浓度为80％的乙醇水溶液沉淀滤液，去除上清液，沉淀减压蒸发，静置5-7小时,再加沉淀等质量的无水乙醇，搅匀，减压浓缩回收乙醇得浸膏，干燥、研磨成粉末，即瓜蒌果实醇提物。本专利技术运用细胞生物学和分子生物学方法，证明瓜蒌果实醇提物能有效抑制人膀胱肿瘤细胞生长。瓜蒌果实醇提物能调控肿瘤生长相关基因，抑制肿瘤细胞生长。在裸鼠体内，瓜蒌果实醇提物有效抑制膀胱癌细胞裸鼠移植瘤的生长。一方面能够减少化疗药物的毒副作用，另一方面为临床治疗膀胱癌干祖细胞生长提供新的靶向药物。而且瓜蒌价格低廉，取材方便，毒副作用小。有望将瓜蒌果实醇提物作为有效成分制备防治膀胱癌药物或保健品。附图说明图1为瓜蒌果实醇提物有效抑制膀胱癌EJ细胞的生长。图2为瓜蒌果实醇提物抑制膀胱癌T24的生长。图3为瓜蒌果实醇提物抑制膀胱癌干祖细胞的生长。其中图3-1为为球细胞实验，瓜蒌果实醇提物抑制干细胞球的形成；图3-2计数球细胞实验球细胞数，为图3-1的统计学分析。图4为瓜蒌果实醇提物抑制膀胱癌细胞的侵袭生长。其中图4-1为细胞侵袭实验，证明瓜蒌果实醇提物抑制膀胱肿瘤细胞的侵袭生长；图4-2为对图4-1的统计学分析。图5为蛋白印迹实验显示瓜蒌果实醇提物对膀胱肿瘤生长相关基因PAK2和磷酸化STAT3蛋白表达的调控，其中图5-A为蛋白印迹实验证实PAK2基因过表达能够促进磷酸化SATA3蛋白的表达，图5-B为蛋白印迹实验证实瓜蒌果实醇提物能够抑制PAK2蛋白的表达和磷酸化STAT3的表达，进而抑制膀胱癌肿瘤细胞生长基因的表达。图6动物实验证实瓜蒌果实醇提物能够有效抑制膀胱癌肿瘤的生长。其中图6-1为瓜蒌果实醇提物抑制膀胱癌移植瘤生长，图6-2为瓜蒌果实醇提物抑制膀胱癌细胞裸鼠移植瘤生长。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例1瓜蒌果实醇提物的制备：(1)取鲜瓜蒌果实在不锈钢压力容器中，在110℃，蒸30分钟；(2)抽真空脱气，均质,得混合物，以料液质量比为1:25的比例，将混合物与65℃、pH＝8的水混匀，放置3小时，搅匀，过滤，用与滤液等体积的体积浓度为80％的乙醇水溶液沉淀滤液，去除上清液，沉淀减压蒸发，静置6小时,再加沉淀等质量的无水乙醇，搅匀，减压浓缩回收乙醇得浸膏，干燥、研磨成粉末，即瓜蒌果实醇提物。实施例2瓜蒌果实醇提物的制备：(1)取鲜瓜蒌果实在不锈钢压力容器中，在105℃，蒸40分钟；(2)抽真空脱气，均质,得混合物，以料液质量比为1:23的比例，将混合物与60℃、pH＝8.5的水混匀，放置5小时，搅匀，过滤，用与滤液等体积的体积浓度为80％的乙醇水溶液沉淀滤液，去除上清液，沉淀减压蒸发，静置7小时,再加沉淀等质量的无水乙醇，搅匀，减压浓缩回收乙醇得浸膏，干燥、研磨成粉末，即瓜蒌果实醇提物。实施例3瓜蒌果实醇提物的制备：(1)取鲜瓜蒌果实在不锈钢压力容器中，在115℃，蒸20分钟；(2)抽真空脱气，均质,得混合物，以料液质量比为1:27的比例，将混合物与70℃、pH＝9.5的水混匀，放置2小时，搅匀，过滤，用与滤液等体积的体积浓度为80％的乙醇水溶液沉淀滤液，去除上清液，沉淀减压蒸发，静置5小时,再加沉淀等质量的无水乙醇，搅匀，减压浓缩回收乙醇得浸膏，干燥、研磨成粉末，即瓜蒌果实醇提物。实施例4肿瘤细胞T24和EJ细胞购自中科院NTCC细胞库实施例1制备的瓜蒌果实醇提物抑制多种膀胱肿瘤细胞生长选用人膀胱癌常用细胞系T24和EJ,通过MTT法，发现瓜蒌果实醇提物有效抑制膀胱癌细胞的生长，尤其对EJ细胞的生长抑制作用(瓜蒌果实醇提物≥0.1mg/ml抑制效果显著，P<0.05)。见图1，图2。图1为瓜蒌果实醇提物有效抑制膀胱癌EJ细胞的生长。图2为瓜蒌果实醇提物抑制膀胱癌T24的生长。实施例5实施例1制备的瓜蒌果实醇提物抑制膀胱肿瘤细胞干/祖细胞生长选用人膀胱癌常用细胞系EJ,通过球实验法，发现瓜蒌果实醇提物能有效抑制膀胱癌干/祖细胞的生长，尤其对EJ细胞的生长抑制作用(瓜蒌果实醇提物≥0.25mg/ml抑制效果显著，P<0.05)。见图3-1。实施例6实施例1制备的瓜蒌果实醇提物抑制多种膀胱肿瘤细胞侵袭生长选用人膀胱癌常用细胞系EJ,通过细胞侵袭实验法，发现瓜蒌果实醇提物能有效抑制膀胱癌细胞的侵袭生长。见图4。实施例7实施例1制备的瓜蒌果实醇提物对膀胱肿瘤生长相关基因的调本文档来自技高网...

【技术保护点】
瓜蒌果实醇提物在制备防治膀胱癌药物或保健品中的应用。

【技术特征摘要】
1.瓜蒌果实醇提物在制备防治膀胱癌药物或保健品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征是所述瓜蒌果实醇提物用下述步骤提取：(1)取鲜瓜蒌果实在不锈钢压力容器中，在105-115℃，蒸20-40分钟；(2)抽真空脱气，均质,得混合物，以料液质量比为1:23-27的比例...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋宁，吴长利，谌馥佳，
申请(专利权)人：蒋宁，
类型：发明
国别省市：天津;12