可释放的键和含有该键的组合物制造技术

描述了一种含有通过二硫代苄基键共价但可逆地连接到含胺配体上的亲水性聚合物的化合物。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种化合物，该化合物含有可断裂地连接到含胺配体上的亲水性聚合物如聚乙二醇，在优选实施方案中该含胺配体可以是含胺脂质、药物或蛋白质。在温和的硫解条件下该化合物能够离解，再生成其初始形式的含胺配体。
技术介绍
亲水性聚合物，如聚乙二醇(PEG)，已用于修饰各种底物如多肽、药物和脂质体，以降低底物的免疫原性和/或改善其血液循环寿命。例如，蛋白质肠胃外给药可以是致免疫的，并可能具有短药理学半衰期。而且蛋白质是较不溶于水的。所以，要使蛋白质在病人体内达到治疗有效量的血液水平是困难的。将PEG缀合到蛋白质上被认为是克服这些困难的一种途径。Davis等在美国专利4,179,337中公开了将PEG缀合到蛋白质如酶和胰岛素以形成具有较低免疫原性但仍保持相当程度的生理活性的PEG-蛋白质缀合物。Veronese等(Applied Biochem.和Biotech，11141-152(1985))公开了用氯甲酸苯酯活化聚乙二醇以修饰核糖核酸酶和超氧化物歧化酶。Katre等人在美国专利号4,766,106和4,917,888中公开了通过聚合物缀合而增溶蛋白质。PEG和其它聚合物缀合到重组蛋白质上以降低免疫原性和增大半衰期(Nitecki等人，美国专利号4,902,502；Enzon，Inc.，PCT/US90/02133)。Garman(美国专利号4,935,465)描述了用水溶性聚合物修饰的蛋白质，该聚合物通过一种可逆键合基团结合到该蛋白质上。但是，至今所述的PEG-蛋白质缀合物受损于许多缺陷。例如，用PEG修饰蛋白质经常钝化蛋白质从而使所得缀合物具有不良的生物活性。在现有技术中一般期望具有稳定结合到该蛋白质上的PEG以保持PEG提供的有益性能。某些蛋白质-PEG缀合物的另一问题在于分解该缀合物时可能会产生不良的产物。PEG还被描述用于改善脂质体的血液循环寿命(美国专利号5,103,556)。这里的PEG共价结合到该脂质的极性头基团上以掩蔽或屏蔽脂质体免受识别和通过网状内皮系统被除去。还描述了具有可释放的PEG链的脂质体，其中PEG链在受到适宜的刺激如pH的变化时从该脂质体中释放出来(PCT/US97/18813)。但是，从该脂质体中释放出PEG链受损于该缺陷，即分解产物是化学修饰的并可能具有不可预知的潜在的体内负作用。专利技术简述因此，本专利技术的一个目的在于提供一种化合物，其中一配体共价而可逆地连接到亲水性聚合物上。在断裂该键时再生其天然形式的配体。在另一方面，本专利技术包括具有以下一般结构的化合物 其中R1为含有用于连接到二硫代苄基部分的键的亲水性聚合物；R2选自H、烷基和芳基；R3选自O(C＝O)R4、S(C＝O)R4和O(C＝S)R4；R4包括含胺配体；而R5选自H、烷基和芳基；其中CH2-R3的取向选自邻位和对位。在一个实施方案中，R5为H而R2选自CH3、C2H5和C3H8。在另一实施方案中，R2和R5为烷基。在另一实施方案中，含胺配体R4选自多肽、含胺药物和含胺脂质。在一个实施方案中，含胺配体R4为含胺脂质，该脂质包括单烃尾或双烃尾。在一个优选的实施方案中，该脂质为具有双烃尾的磷脂。在另一实施方案中，该亲水性聚合物R1可选自聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯基甲基醚、聚甲基噁唑啉、聚乙基噁唑啉、聚羟基丙基噁唑啉、聚羟基丙基-甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺、聚二甲基-丙烯酰胺、聚羟基丙基甲基丙烯酸酯、聚羟基乙基丙烯酸酯、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、聚乙二醇、聚天冬酰胺、它们的共聚物，以及聚环氧乙烷-聚环氧丙烷。在一个优选的实施方案中，该亲水性聚合物R1为聚乙二醇。在另一个实施方案中，当R1为聚乙二醇时，R5为H而R2为CH3或C2H5。在另一实施方案中，该含胺配体R4为多肽。在另一实施方案中，该多肽可以是重组多肽。示范性的和优选的多肽包括细胞因子如干扰素、白介素、生长因子和酶。在另一方面，本专利技术包括一种组合物，它包含可通过与具有以下一般结构式的化合物的反应而得到的缀合物 其中R1为含有用于连接到二硫代苄基部分的键的亲水性聚合物；R2选自H、烷基和芳基；R3选自O(C＝O)R4、S(C＝O)R4和O(C＝S)R4；R4包括离去基团；而R5选自H、烷基和芳基；其中CH2-R3的取向选自邻位和对位。该组合物还包括药学上可接受的载体如盐水、缓冲剂等等。在这方面的另一实施方案中，R2选自CH3，C2H5和C3H8。在另一实施方案中，R3为O(C＝O)R4而R4为含羟基或含氧的离去基团。在另一实施方案中，该离去基团源于选自氯化物、对硝基苯酚、邻硝基苯酚、N-羟基-四氢邻苯二甲酰亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基戊二酰亚胺、N-羟基降冰片烯-2，3-二羧基亚胺、1-羟基苯并三唑、3-羟基吡啶、4-羟基吡啶、2-羟基吡啶、1-羟基-6-三氟甲基苯并三唑、咪唑、三唑、N-甲基-咪唑、五氟苯酚、三氟苯酚和三氯苯酚的化合物。在另一实施方案中，所要求的化合物与代替R4的含胺配体反应形成包括该含胺配体的缀合物。例如该含胺配体可以是磷脂。在一个优选的实施方案中，该亲水性聚合物R1为聚乙二醇，R5为H而R2为CH3或C2H5。在该实施方案的另一方面，含有该缀合物的组合物包括脂质体。该脂质体可以进一步包括截留治疗剂。在另一实施方案中，该含胺配体包括多肽。在另一方面，本专利技术包括含有脂质体的脂质体组合物，该脂质体包括亲水性聚合物链的表面包被，其中至少一部分亲水性聚合物链具有一般结构 其中R1为含有用于连接到二硫代苄基部分的键的亲水性聚合物；R2选自H、烷基和芳基；R3选自O(C＝O)R4、S(C＝O)R4和O(C＝S)R4；R4包括含胺配体；而R5选自H、烷基和芳基；其中CH2-R3的取向选自邻位和对位。该脂质体与具有通过脂族二硫键连接到脂质体上的亲水性聚合物链的脂质体相比，具有更长的血液循环寿命。在另一实施方案中，该脂质体进一步包括截留治疗剂。在另一方面，本专利技术包括一种改善具有可释放亲水性聚合物链的表面包被脂质体的血液循环寿命的方法。该方法包括制备具有约1％-约20％的具有以下通式结构的化合物的脂质体 其中R1、R2、R3和R5如以上所述，R4包括含胺脂质。在这方面的一个优选的实施方案中，R5为H而R2选自CH3、C2H5和C3H8。在另一实施方案中，该含胺脂质包括磷脂而R1为聚乙二醇。在这方面，该脂质体可以进一步包括截留治疗剂。结合附图阅读以下本专利技术的详细描述将更为全面地理解本专利技术的这些和其它目的及特征。附图的简要说明附图说明图1A显示了本专利技术的一个实施方案，其中二硫代苄基(DTB)连接甲氧基-聚乙二醇(mPEG)部分和含胺配体；图1B显示了图1A的化合物硫解断裂后的产物；图2说明了合成mPEG-DTB-胺-脂质的合成反应方案，其中该胺-配体为脂质二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)；图3说明了对二硫代苄基尿烷(DTB)-连接的mPEG-DSPE缀合物的硫解断裂机理；图4A-4B显示了根据本专利技术制备mPEG-DTB-DSPE化合物的合成反应方案，其中DTB键被烷基位阻；图5显示了根据本专利技术制备mPEG-DTB-配体化合物的另一合成反应方案；图6A为合成mPEG-DTB-脂质的合成反应方案，它通过硫解断裂产生阳离子脂质；图6B显示了图6A的化本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有以下一般结构的化合物： ＊＊＊ 其中Ｒ↑［１］为含有用于连接到二硫代苄基部分的键的亲水性聚合物；Ｒ↑［２］选自Ｈ、烷基和芳基；Ｒ↑［３］选自Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ｒ↑［４］、Ｓ（Ｃ＝Ｏ）Ｒ↑［４］和Ｏ（Ｃ＝Ｓ）Ｒ↑［４］；Ｒ↑［４］包括含胺配体；而Ｒ↑［５］选自Ｈ、烷基和芳基；其中ＣＨ↓［２］－Ｒ↑［３］的取向选自邻位和对位。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：S扎里普斯基，
申请(专利权)人：阿尔萨公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]