一种微生物发酵法制备的海参胶原蛋白肽的方法技术

本发明专利技术涉及一种微生物发酵法制备的海参胶原蛋白肽的方法，将东海乌参浸泡打浆、酶解，过滤后接种发酵种子，发酵后进行冷冻干燥或喷雾干燥得到海参胶原蛋白肽。本发明专利技术的制备方法生产周期短，得率高，产品纯度高，具有显著的抗氧化性，可溶性好，吸收性高，无异味和苦味；使海参得到充分的高值化加工利用。

Method for preparing sea cucumber collagen peptide by microbial fermentation method

The invention relates to a method for microbial fermentation preparation of sea cucumber collagen peptide, the East China Sea and soaking pulping, enzymolysis, filtering after inoculating seed after fermentation, freeze drying or spray drying to obtain sea cucumber collagen peptide. The preparation method of the invention has short production cycle, high yield, high product purity, has significant antioxidant activity, soluble, high absorption, no odor and bitter taste; the sea cucumber high value fully processed by.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种胶原蛋白肽的制备，尤其涉及一种微生物发酵法制备的海参胶原蛋白肽的方法。
技术介绍
胶原多肽是胶原或明胶经蛋白酶等降解处理后制得的介于蛋白质和氨基酸之间的产物，一般将由2到10个氨基酸通过肽键形成的直链肽称为寡肽或小肽；由肽键结合起来的多于10个氨基酸的聚合体则称为多肽。近年来，很多学者对肽的消化吸收机制进行了研究，认为肽甚至相当量的蛋白质在动物体内可以被完整吸收并被机体利用，如口服疫苗和酶法治疗疾病。肽的转运系统和游离氨基酸相比转运速度更快。许多试验表明，肽的添加还可以提高氨基酸的吸收速度。此外肽还能促进蛋白质沉积率，因为肽能直接用于人体蛋白质的合成。长期食用经过添加胶原蛋白肽的食品有助于改善皮肤弹性，延缓衰老，增强免疫力，同时食用方便，适合于大众人群。海参是重要的海洋食物和药物资源。全世界有1000多种海参，其中40多种可供食用。近年来，我国海参养殖业发展极快，海参年产量已超过6万吨。因此，亟待进一步开发海参的高值化加工技术。海参体壁含有结构独特的活性物质如海参胶原蛋白、海参多糖、海参皂苷等。药理实验证明，海参具有抗肿瘤、提高免疫功能、降血脂、抗凝血、抗动脉粥样硬化等多种生理活性。目前，国内外对海参活性成分的研究和开发主要集中在海参多糖和海参皂苷等方面。海参胶原蛋白含量占海参体壁粗蛋白的60％以上，有关海参胶原蛋白类型和理化性质的研究已有报道(CompBiochemPhysiol，1995，112A：463-478；FoodChemistryandToxicology，2002，67(4)：1319-132；水产学报，2006，4：549-553)，中国专利技术专利CN101215315A也公开了一种在低温下(0-25℃)利用胃蛋白酶促溶提取海参胶原蛋白的方法。与胶原蛋白相比，胶原蛋白肽具有更易吸收和高生理活性等特点。有关海参多肽的研究已有报道，目前已公开的专利技术专利有CN1858222A和CN101191139A。这些研究中所述的海参多肽是一种至少包括海参皂苷、蛋白多肽和胶原多肽等活性物质的混合物。有关海参胶原蛋白活性肽尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术提供了一种提高纯度与提取率，去除苦腥味、提高口感、利于人体吸收的微生物发酵法制备的海参胶原蛋白肽的方法。本专利技术通过以下技术方案：一种微生物发酵法制备的海参胶原蛋白肽的方法，包括如下工艺步骤：a.选取富含胶原蛋白的东海乌参为原料，清水浸泡脱除盐分，洗净后浸入浸泡液50-60min，捞出沥干水分，使用打浆机进行打浆处理，加入35-40倍体积的纯净水后采用胶体磨进行研磨细化处理，得浆状物；b.将步骤a得到的浆状物加热至中心温度达到130-145℃，保持10min，冷却到20-25℃，加入蛋白酶进行酶解，过120目滤网，得到胶原蛋白滤液；c.在步骤b得到的胶原蛋白滤液中，按重量百分数0.5-3％加入葡萄糖或蔗糖，调节pH到6-7，得初始发酵液；d.将步骤c得到的初始发酵液放入空消发酵罐进行实消，空消和实消的条件均为121℃、20min，待罐温降至37℃，接入发酵种子，接种量是初始发酵液体积百分数的2-4.5％，接种混合液在37℃和100-300rpm搅拌转速的条件下密封发酵2-5天，发酵液滤去残渣，得发酵滤液；e.在步骤d得到的发酵滤液中加入15-20％海藻糖、0.3-0.8％麦芽糊精与3-5％甘油，-50℃预冻2-6h，然后在-70℃冷阱温度和＜150Pa真空度的条件下冷冻干燥12-20h，直接得到海参胶原蛋白肽；或者，步骤d得到的发酵滤液采用孔径为0.1-0.5μm的管式膜脱除大分子，然后采用截留分子量为3kDa的超滤膜截留分级，截留液采用纳滤膜浓缩脱盐，然后在175-185℃进风温度、75-85℃出风温度和0.35-0.45MPa喷雾压力的条件下喷雾干燥，得到海参胶原蛋白肽。作为优选，步骤a中浸泡液由以下重量份的原料组成：山楂20-25份、野菊花1-5份、广藿香30-40份、壳聚糖15-18份、海藻酸钠12-15份与水200-350份，东海乌参与浸泡液的质量比为1:10。作为优选，步骤d中发酵种子为就地堆肥地芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌或巨大芽孢杆菌。作为优选，发酵种子培养基的原料按以下重量份数计：3％大豆蛋白胨、5％富硒酵母、6％天冬酰胺、5.5％蛋氨酸、0.5％牛肉粉、0.5％葡萄糖、0.1％氯化钠、0.01％磷酸二氢钾，其余为蒸馏水，121℃高温灭菌20min，冷却后备用。作为优选，将就地堆肥地芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌或巨大芽孢杆菌接种于发酵种子培养基中，摇床180r/min，培养48h，发酵液中芽孢杆菌＞108cfu/mL。本专利技术的有益效果是：本专利技术的制备方法生产周期短，得率高，产品纯度高，具有显著的抗氧化性，可溶性好，吸收性高，无异味和苦味；使海参得到充分的高值化加工利用。具体实施方式为使本领域技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，但这些阐述并不对本专利技术做任何形式上的限定。除另有说明，否则本专利技术所用的所有科学和技术术语具有本专利技术所属和相关领域的一般技术人员通常所理解的含义。下面结合具体实施例对本专利技术做出进一步详细的阐述，但应当明白，实施例不应理解为对本专利技术保护范围的限制。实施例1一种微生物发酵法制备的海参胶原蛋白肽的方法，包括如下工艺步骤：a.选取富含胶原蛋白的东海乌参为原料，清水浸泡脱除盐分，洗净后浸入浸泡液50min，捞出沥干水分，使用打浆机进行打浆处理，加入35倍体积的纯净水后采用胶体磨进行研磨细化处理，得浆状物；浸泡液由以下重量份的原料组成：山楂20份、野菊花1份、广藿香30份、壳聚糖15份、海藻酸钠12份与水200份，东海乌参与浸泡液的质量比为1:10；b.将步骤a得到的浆状物加热至中心温度达到130℃，保持10min，冷却到20℃，加入蛋白酶进行酶解，过120目滤网，得到胶原蛋白滤液；c.在步骤b得到的胶原蛋白滤液中，按重量百分数0.5％加入葡萄糖，调节pH到6，得初始发酵液；d.将步骤c得到的初始发酵液放入空消发酵罐进行实消，空消和实消的条件均为121℃、20min，待罐温降至37℃，接入发酵种子，接种量是初始发酵液体积百分数的2％，接种混合液在37℃和100rpm搅拌转速的条件下密封发酵2天，发酵液滤去残渣，得发酵滤液；发酵种子为就地堆肥地芽孢杆菌；发酵种子培养基的原料按以下重量份数计：3％大豆蛋白胨、5％富硒酵母、6％天冬酰胺、5.5％蛋氨酸、0.5％牛肉粉、0.5％葡萄糖、0.1％氯化钠、0.01％磷酸二氢钾，其余为蒸馏水，121℃高温灭菌20min，冷却后备用；将就地堆肥地芽孢杆菌接种于发酵种子培养基中，摇床180r/min，培养48h，发酵液中芽孢杆菌＞108cfu/mL；e.在步骤d得到的发酵滤液中加入15％海藻糖、0.3％麦芽糊精与3％甘油，-50℃预冻2h，然后在-70℃冷阱温度和＜150Pa真空度的条件下冷冻干燥12h，直接得到海参胶原蛋白肽。实施例2一种微生物发酵法制备的海参胶原蛋白肽的方法，包括如下工艺步骤：a.选取富含胶原蛋白的东海乌参为原料，清水浸泡脱除盐分，洗净后浸入浸泡液55min，捞出沥干水分，使用打浆机进行打浆处理，加入38倍体积的纯净水后采用胶体磨进行研磨细化处理，得浆状物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微生物发酵法制备的海参胶原蛋白肽的方法，其特征在于，包括如下工艺步骤：a.选取富含胶原蛋白的东海乌参为原料，清水浸泡脱除盐分，洗净后浸入浸泡液50‑60min，捞出沥干水分，使用打浆机进行打浆处理，加入35‑40倍体积的纯净水后采用胶体磨进行研磨细化处理，得浆状物；b.将步骤a得到的浆状物加热至中心温度达到130‑145℃，保持10min，冷却到20‑25℃，加入蛋白酶进行酶解，过120目滤网，得到胶原蛋白滤液；c.在步骤b得到的胶原蛋白滤液中，按重量百分数0.5‑3％加入葡萄糖或蔗糖，调节pH到6‑7，得初始发酵液；d.将步骤c得到的初始发酵液放入空消发酵罐进行实消，空消和实消的条件均为121℃、20min，待罐温降至37℃，接入发酵种子，接种量是初始发酵液体积百分数的2‑4.5％，接种混合液在37℃和100‑300rpm搅拌转速的条件下密封发酵2‑5天，发酵液滤去残渣，得发酵滤液；e.在步骤d得到的发酵滤液中加入15‑20％海藻糖、0.3‑0.8％麦芽糊精与3‑5％甘油，‑50℃预冻2‑6h，然后在‑70℃冷阱温度和＜150Pa真空度的条件下冷冻干燥12‑20h，直接得到海参胶原蛋白肽；或者，步骤d得到的发酵滤液采用孔径为0.1‑0.5μm的管式膜脱除大分子，然后采用截留分子量为3kDa的超滤膜截留分级，截留液采用纳滤膜浓缩脱盐，然后在175‑185℃进风温度、75‑85℃出风温度和0.35‑0.45MPa喷雾压力的条件下喷雾干燥，得到海参胶原蛋白肽。...

【技术特征摘要】
1.一种微生物发酵法制备的海参胶原蛋白肽的方法，其特征在于，包括如下工艺步骤：a.选取富含胶原蛋白的东海乌参为原料，清水浸泡脱除盐分，洗净后浸入浸泡液50-60min，捞出沥干水分，使用打浆机进行打浆处理，加入35-40倍体积的纯净水后采用胶体磨进行研磨细化处理，得浆状物；b.将步骤a得到的浆状物加热至中心温度达到130-145℃，保持10min，冷却到20-25℃，加入蛋白酶进行酶解，过120目滤网，得到胶原蛋白滤液；c.在步骤b得到的胶原蛋白滤液中，按重量百分数0.5-3％加入葡萄糖或蔗糖，调节pH到6-7，得初始发酵液；d.将步骤c得到的初始发酵液放入空消发酵罐进行实消，空消和实消的条件均为121℃、20min，待罐温降至37℃，接入发酵种子，接种量是初始发酵液体积百分数的2-4.5％，接种混合液在37℃和100-300rpm搅拌转速的条件下密封发酵2-5天，发酵液滤去残渣，得发酵滤液；e.在步骤d得到的发酵滤液中加入15-20％海藻糖、0.3-0.8％麦芽糊精与3-5％甘油，-50℃预冻2-6h，然后在-70℃冷阱温度和＜150Pa真空度的条件下冷冻干燥12-20h，直接得到海参胶原蛋白肽；或者，步骤d得到的发酵滤液采用孔径为0.1-0.5μm的管式膜脱除大分子，然后采用截留分子量为3kD...

【专利技术属性】
技术研发人员：金火喜，徐红萍，杨立业，欧阳小琨，
申请(专利权)人：浙江海洋大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33