一种四溴双酚A衍生物TBBPA‑MHEE半抗原的合成方法及其用途技术

本发明专利技术提供了一种四溴双酚A衍生物TBBPA‑MHEE半抗原的合成方法及其用途，合成方法包括：(1)以TBBPA为原料与溴乙酸甲酯、2‑溴乙醇发生取代反应生成甲基‑2‑(2,6‑二溴‑4‑(2‑(3,5‑二溴‑4‑(2‑羟基乙氧基)苯基)丙‑2‑基)苯氧基)乙酸乙酯；(2)通过与氢氧化钠发生皂化反应，盐酸酸化，得到半抗原2‑(2,6‑二溴‑4‑(2‑(3,5‑二溴‑4‑(2‑羟基乙氧基)苯基)丙‑2‑基)苯氧基)乙酸。本发明专利技术经过反复试验成功的设计并合成了一种四溴双酚A衍生物TBBPA‑MHEE的半抗原，是一种新型的四溴双酚A衍生物TBBPA‑MHEE半抗原的合成方法，该方法简单、安全、可行。

A method for synthesizing four tetrabromobisphenol A derivatives TBBPA MHEE hapten and its use

The present invention provides a method for synthesizing four tetrabromobisphenol A derivatives TBBPA MHEE hapten synthesis method and use thereof, including: (1) using TBBPA as raw material and bromine methyl acetate, 2 bromide ethanol reaction of methyl 2 (2,6 (2 dibromo 4 (3,5 two 4 bromide (2 hydroxyethoxy) Ben Ji) 2 c base) phenoxy) ethyl acetate; (2) by saponification with sodium hydroxide, hydrochloric acid, semi antigen 2 (2,6 (2 dibromo 4 (3,5 4 (2 dibromo hydroxyethoxy) Ben Ji) 2 based C) Phenoxy Acetic Acid). The present invention after repeated tests and design successfully synthesized a hapten four tetrabromobisphenol A derivatives TBBPA MHEE, is a new synthesis method of four tetrabromobisphenol A derivatives TBBPA MHEE hapten, the method is simple, safe and feasible.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE半抗原
，尤其涉及一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE半抗原合成方法，指一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE其中一个苯环的侧链改造，使之具备耦合用羧基的合成方法，具体为一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE半抗原的合成方法及其用途。
技术介绍
免疫分析是基于抗原、抗体特异性反应的一种分析方法，已广泛应用于食品与环境中小分子污染物的分析检测。该方法具有灵敏度高、方便快捷、高通量、低成本等优势。而建立此方法的前提是相应抗体的研制。小分子化合物因其分子量小，缺乏免疫原性，在免疫动物时，很难诱导产生特异性细胞及体液免疫反应。为此，需要将小分子物质与大分子载体蛋白偶联，使其成为完全抗原。小分子化合物的抗体，是通过半抗原作为抗原决定簇免疫动物而获得，所以设计并合成合理的半抗原是制备亲和性好、灵敏度高的抗体的关键。其原则是设计合成与待测物结构类似的半抗原，并尽量保持与待测物共有的结构作为母核。对于半抗原结构的选择，如果待测物本身含有-NH2，-COOH，-OH，-SH等功能基团，可直接活化后联入载体蛋白，便可合成人工完全抗原。但大部分待测物分子并不含有功能基团，或功能基团对待测物的特异性和极性影响较大，因此，需要对小分子化合物进行结构改造，使其具有能共价结合到载体蛋白上的一种功能基团(如氨基、羧基、羟基和巯基等)。半抗原合成后，以核磁共振、质谱、红外光谱等技术对其进行结构鉴定，可判定其是否合成成功。
技术实现思路
本专利技术目的是克服现有技术的不足之处，以四溴双酚A为原料，通过取代、皂化、酸化等三步反应合成半抗原方法，以利于后期制备出对四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE添加型阻燃剂特异性强亲和力高的抗体。本专利技术实施例是这样实现的：一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE半抗原合成方法：(1)以TBBPA为原料与溴乙酸甲酯、2-溴乙醇发生取代反应生成甲基-2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸乙酯(d)；(2)通过与氢氧化钠发生皂化反应，盐酸酸化，得到半抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸(M3)。合成过程如下：具体步骤如下：步骤1、以TBBPA为原料与溴乙酸甲酯、2-溴乙醇发生取代反应生成甲基-2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸乙酯，合成步骤如下：在溶有TBBPA的DMF中加入K2CO3，于90℃下逐滴加入溴乙酸甲酯，持续搅拌；然后在反应液中逐滴加入2-溴乙醇反应；反应完毕后后，产物用水洗涤，用乙酸乙酯提取有机相，浓缩，纯化得到甲基-2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸乙酯；步骤2、通过与氢氧化钠发生皂化反应，盐酸酸化，得到半抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸，合成步骤如下：在甲基-2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸乙酯中加入体积比为1:1的甲醇/水混合溶剂、NaOH，进行反应，加入盐酸调pH至酸性，用二氯甲烷(DCM)提取产物，浓缩，纯化得到产物半抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸。步骤1中，所使用的DMF、TBBPA、K2CO3、溴乙酸甲酯、2-溴乙醇的用量比为：10mL:0.002mol:0.006mol:0.002mol:0.002mol；加入溴乙酸甲酯后持续搅拌的时间为12h，加入2-溴乙醇后的反应时间为4h。步骤2中，所使用的甲基-2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸乙酯、甲醇/水混合溶剂、NaOH的用量比为0.51g：10mL：0.12g；所使用的盐酸浓度为1mol/L，pH为4～5；用DCM提取产物的次数为3次。所制备的四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE半抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸用于制备四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE人工免疫抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸-BSA。有益效果：本专利技术的有益效果：本专利技术经过反复试验成功的设计并合成了一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE的半抗原，是一种新型的四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE半抗原的合成方法，该方法不仅简单、安全、可行，而且所得半抗原能与载体蛋白成功结合得到四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE的人工抗原，使用该免疫原免疫动物，获得了能特异性识别四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE的单克隆和多克隆抗体，抗体效价高，特异性强，可广泛用于四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE的免疫分析研究。附图说明图1是本专利技术实施例提供的产物2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸的核磁共振氢谱图(图A)和质谱图(图B)。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。(1)以TBBPA为原料与溴乙酸甲酯、2-溴乙醇发生取代反应生成甲基-2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸乙酯(d)；在10ml溶有TBBPA(1.08g，0.002mol)的DMF中加入K2CO3(0.828g，0.006mol)，于90℃下逐滴加入溴乙酸甲酯(0.306g，0.002mol)，持续搅拌12h。在反应液中逐滴加入2-溴乙醇(0.242g，0.002mol)反应4h。用水洗涤，用20mL乙酸乙酯提取有机相3次，浓缩，纯化得到d，产率32％。(2)通过与氢氧化钠发生皂化反应，盐酸酸化，得到半抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸(M3)。在0.51gd中加入10mL甲醇和水(1:1)的混合溶剂，NaOH(0.120g，0.003mol)，反应2h，加入1mol/LHCl调pH至4～5，用DCM提取产物3次，浓缩，纯化得到产物M3，产率80％。所制备的2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸的表征见图1，其中核磁共振氢谱图如下：1HNMR(CDCl3,400MHz)δ(ppm):1.62(s,6H),3.76(t,J＝5.6Hz,2H),3.96(t,J＝5.6Hz,2H),4.49(s,2H),4.91(s,1H),7.51(d,J＝8Hz,4H),13.10(s,1H)；质谱图结果如下：calculatedforC19H18Br4O5:645.96；found:644.88([M-H+])本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种四溴双酚A衍生物TBBPA‑MHEE半抗原的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1、在溶有TBBPA的DMF中加入K2CO3，于90℃下逐滴加入溴乙酸甲酯，持续搅拌；然后在反应液中逐滴加入2‑溴乙醇反应；反应完毕后后，产物用水洗涤，用乙酸乙酯提取有机相，浓缩，纯化得到甲基‑2‑(2,6‑二溴‑4‑(2‑(3,5‑二溴‑4‑(2‑羟基乙氧基)苯基)丙‑2‑基)苯氧基)乙酸乙酯；步骤2、在甲基‑2‑(2,6‑二溴‑4‑(2‑(3,5‑二溴‑4‑(2‑羟基乙氧基)苯基)丙‑2‑基)苯氧基)乙酸乙酯中加入体积比为1:1的甲醇/水混合溶剂、NaOH，进行反应，加入盐酸调pH至酸性，用二氯甲烷提取产物，浓缩，纯化得到产物半抗原2‑(2,6‑二溴‑4‑(2‑(3,5‑二溴‑4‑(2‑羟基乙氧基)苯基)丙‑2‑基)苯氧基)乙酸。

【技术特征摘要】
1.一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE半抗原的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1、在溶有TBBPA的DMF中加入K2CO3，于90℃下逐滴加入溴乙酸甲酯，持续搅拌；然后在反应液中逐滴加入2-溴乙醇反应；反应完毕后后，产物用水洗涤，用乙酸乙酯提取有机相，浓缩，纯化得到甲基-2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸乙酯；步骤2、在甲基-2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸乙酯中加入体积比为1:1的甲醇/水混合溶剂、NaOH，进行反应，加入盐酸调pH至酸性，用二氯甲烷提取产物，浓缩，纯化得到产物半抗原2-(2,6-二溴-4-(2-(3,5-二溴-4-(2-羟基乙氧基)苯基)丙-2-基)苯氧基)乙酸。2.根据权利要求1所述的一种四溴双酚A衍生物TBBPA-MHEE半抗原的合成方法，其特征在于，步骤1中，所使用的DMF、TBBPA、K2CO3、溴乙酸甲酯、2-溴乙醇的用量比为：10mL:0.002mol:0.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：张祯，梁亚如，曾昆，吴向阳，张萌，黄梦璐，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32