娑罗子七叶皂苷的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种娑罗子七叶皂苷的制备方法和七叶皂苷钠的制备方法。所述娑罗子七叶皂苷的制备方法包括：(1)将娑罗子采用10～70vol％的乙醇水溶液作为溶剂进行提取，得到提取液；(2)将所述的提取液制备成上样样品；将所述的上样样品上反相色谱柱，依次采用8～25vol％的乙醇水溶液、35～80vol％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集35～80vol％的乙醇水溶液得到的洗脱液。本发明专利技术的制备方法能够有效除去杂质成分，同时七叶皂苷类成分的损失量很少，且无需另外的活性炭脱色操作即可实现脱色。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种娑罗子七叶皂苷的制备方法。
技术介绍
娑罗子是一味药材，可疏肝理气，和胃止痛，用于肝胃气滞，胸腹胀闷，胃脘疼痛。娑罗子的主要活性成分是七叶皂苷类成分，其属于三萜皂苷，具有消炎、抗渗出、恢复毛细血管通透性、提高静脉张力、改善血循环、扩张动脉、扩张冠脉、增加耐缺氧能力、促进脑功能恢复等作用。以娑罗子七叶皂苷为原料制备的上市药品有注射用七叶皂苷钠、复方七叶皂苷钠凝胶等。现有的娑罗子七叶皂苷多采用不同浓度的乙醇水溶液进行提取，得到娑罗子粗提物。该粗提物中除含有皂苷类成分外，还含有大量的其他类成分，例如黄酮类、黄酮苷类、鞣质、有机酸，此外还含有色素成分，致使粗提物的颜色较深。为了除去杂质，提高七叶皂苷的纯度，现有技术通常采用大孔树脂柱或离子交换柱洗脱的方法，首先用水做洗脱剂，除去一些水溶性杂质，再用不同浓度的乙醇洗脱得到皂苷部位，还可以采用活性炭或氧化铝进行脱色。例如，中国专利申请201210116934.2公开了一种七叶皂苷钠的制备方法，包括提取、纯化和烘干步骤，其中采用的提取溶剂为10vol％的乙醇溶液，纯化步骤采用的是大孔树脂柱，首先用纯化水洗脱，再用95vol％乙醇溶液洗脱，所得洗脱产物再经过95vol％乙醇溶液沉淀、抽滤、脱水，得到七叶皂苷钠。中国专利申请201410594483.2公开了一种七叶皂苷钠的制备方法，包括提取和纯化步骤，其中提取溶剂采用的是30vol％～70vol％的乙醇溶液，提取液离心后用截留分子量为1000～15000道尔顿的超滤膜过滤，滤液上大孔树脂柱，依次用纯水、20vol％～40vol％的乙醇溶液、50vol％～70vol％的乙醇溶液洗脱，收集50vol％～70vol％的乙醇溶液的洗脱液减压回收至无醇味，再过聚酰胺树脂柱，收集洗脱液，再以10vol％～30vol％的乙醇溶液洗脱，与上述洗脱液合并，浓缩，加水溶液，以氢氧化钠溶液调节pH至8～11，加入丙酮，析出沉淀，过滤，干燥，即得。非专利文献(高小宁等，娑罗子中七叶皂苷提取工艺研究，中药材，2008，31(3)，459～460)报道了一种娑罗子中七叶皂苷提取工艺，包括采用95vol％乙醇浸提、活性炭脱色、有机溶剂(乙酸乙酯、正丁醇、氯仿等)萃取的步骤。上述的娑罗子七叶皂苷的提取、纯化方法中，均采用大孔树脂柱进行分离纯化，皂苷类成分的损失率较大，且仍含有黄酮类、黄酮苷类及其他杂质。因此，需要一种能够有效除去杂质、且七叶皂苷损失小的娑罗子七叶皂苷的制备方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种娑罗子七叶皂苷的制备方法，该方法七叶皂苷的损失较小，且能够有效除去杂质。本专利技术的另一目的在于提供一种七叶皂苷钠的制备方法。本专利技术的目的是通过如下制备方法实现的：本专利技术提供一种娑罗子七叶皂苷的制备方法，其包括如下步骤：(1)将娑罗子采用10～70vol％的乙醇水溶液作为溶剂进行提取，得到提取液；(2)将所述的提取液制备成上样样品；将所述的上样样品上反相色谱柱，依次采用第一洗脱剂、第二洗脱剂进行梯度洗脱，并依次得到第一洗脱液和第二洗脱液；收集所述的第二洗脱液；其中，所述的第一洗脱剂为8～25vol％的乙醇水溶液，所述的第二洗脱剂为35～80vol％的乙醇水溶液。本专利技术中，优选地，步骤(2)中，所述的第一洗脱剂为8～15vol％的乙醇水溶液，第一洗脱剂的用量为柱体积的2～3倍。本专利技术中，优选地，步骤(2)中，所述的第二洗脱剂为45～60vol％的乙醇水溶液，洗脱剂的用量为柱体积的2～4倍。本专利技术中，优选地，所述的第一洗脱剂和第二洗脱剂的流速均为0.2～2ml/min。本专利技术中，优选地，步骤(2)中，所述的上样样品通过如下方法制备得到：将所述的提取液浓缩和干燥，得到提取物；将所述的提取物用浓度低于60vol％的乙醇水溶液或水溶解，得到所述的上样样品。本专利技术中，优选地，步骤(2)中，所述的上样样品中的七叶皂苷含量为5～45wt％。本专利技术中，优选地，步骤(2)中，所述的反相色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶、辛烷基硅烷键合硅胶或丁烷基硅烷键合硅胶作为填料，以15～95vol％的乙醇水溶液湿法上柱，再以蒸馏水洗至水系统，得到所述的反相色谱柱。本专利技术中，优选地，所述反相色谱柱的径高比为1:3～18。本专利技术中，优选地，所述的制备方法还包括如下步骤：(3)将所述的第二洗脱液浓缩和干燥；可选地，和(4)将步骤(2)结束后的反相色谱柱采用85～100vol％的乙醇水溶液冲洗，再用蒸馏水洗至水系统。本专利技术还提供一种七叶皂苷钠的制备方法，所述的制备方法包括上述的方法制备娑罗子七叶皂苷。相对于现有的娑罗子七叶皂苷的制备方法，本专利技术的制备方法能够有效除去黄酮类、黄酮苷类、色素类等杂质成分，获得高纯度的娑罗子七叶皂苷。同时，本专利技术的方法七叶皂苷类成分的损失量较少，且无需另外的活性炭脱色等操作即可实现脱色。附图说明图1示出了实施例2的上样样品高效液相色谱图。图2示出了实施例2的第一浓缩液高效液相色谱图。图3示出了实施例2的第二浓缩液高效液相色谱图。其中，1为七叶皂苷A的色谱峰，2为七叶皂苷B的色谱峰。具体实施方式本专利技术中，所述的娑罗子包括七叶树科植物七叶树AesculuschinensisBge.、浙江七叶树AesculuschinensisBge.var.chekiangensis(HuetFang)Fang或天师栗AesculuswilsoniiRehd.的干燥成熟种子。本专利技术中，所述的“100vol％的乙醇水溶液”是为了表述方便，其是指无水乙醇。本专利技术中，所述的将反相色谱柱蒸馏水洗至水系统，是指采用蒸馏水将反相色谱柱冲洗至色谱柱中的液相只有水，或仅含有微量的乙醇。本专利技术中，所述的反相色谱柱的高度，是指反相色谱柱中填料的高度；所述的反相色谱柱的柱体积，是指反相色谱柱中填料的体积。本专利技术中，所述的“七叶皂苷”、“七叶皂苷类化合物”、“七叶皂苷类成分”具有相同的含义，均是指娑罗子中含有的具有七叶皂苷母核的化合物。以下实验例中作为指标性成分的七叶皂苷A的结构式为：七叶皂苷B的结构式为：本专利技术的娑罗子七叶皂苷的制备方法包括：(1)娑罗子的提取步骤，和(2)纯化步骤。所述的纯化步骤采用反相色谱柱作为层析柱，采用不同浓度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，从而获得富集七叶皂苷类化合物的洗脱液。本专利技术的制备方法还可以包括：(3)将所述的富集七叶皂苷类化合物的洗脱液进行浓缩、干燥的步骤，从而得到固体的娑罗子七叶皂苷。此外，本专利技术的制备方法还可以包括：(4)纯化步骤完毕后冲洗色谱柱的步骤。本专利技术还提供七叶皂苷钠的制备方法。根据本专利技术的一个实施方式，所述的娑罗子七叶皂苷的制备方法，包括如下步骤：(1)将娑罗子采用25～50vol％的乙醇水溶液作为溶剂进行提取，得到提取液；(2)将所述的提取液浓缩，干燥，得到提取物；将所述提取物加入10～40vol％的乙醇水溶液或水制备成上样样品，所述上样样品中七叶皂苷的含量为25～45wt％；将所述的上样样品以50～100mg七叶皂苷/100g干填料的上样量上反相色谱柱，依次采用第一洗脱剂、第二洗脱剂进行梯度洗脱，并依次得到第一洗脱液和第二洗脱液；收集所述的第二洗脱液；其中，所述的反相色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶作为填料；所述的第一洗脱剂为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种娑罗子七叶皂苷的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：(1)将娑罗子采用10～70vol％的乙醇水溶液作为溶剂进行提取，得到提取液；(2)将所述的提取液制备成上样样品；将所述的上样样品上反相色谱柱，依次采用第一洗脱剂、第二洗脱剂进行梯度洗脱，并依次得到第一洗脱液和第二洗脱液；收集所述的第二洗脱液；其中，所述的第一洗脱剂为8～25vol％的乙醇水溶液，所述的第二洗脱剂为35～80vol％的乙醇水溶液。

【技术特征摘要】
1.一种娑罗子七叶皂苷的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：(1)将娑罗子采用10～70vol％的乙醇水溶液作为溶剂进行提取，得到提取液；(2)将所述的提取液制备成上样样品；将所述的上样样品上反相色谱柱，依次采用第一洗脱剂、第二洗脱剂进行梯度洗脱，并依次得到第一洗脱液和第二洗脱液；收集所述的第二洗脱液；其中，所述的第一洗脱剂为8～25vol％的乙醇水溶液，所述的第二洗脱剂为35～80vol％的乙醇水溶液。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的第一洗脱剂为8～15vol％的乙醇水溶液，第一洗脱剂的用量为柱体积的2～3倍。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的第二洗脱剂为45～60vol％的乙醇水溶液，洗脱剂的用量为柱体积的2～4倍。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的第一洗脱剂和第二洗脱剂的流速均为0.2～2ml/min。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的上样样品通过如下方...

【专利技术属性】
技术研发人员：李军，张倩，屠鹏飞，孙启泉，王金铃，赵云芳，张静，陈燕柑，
申请(专利权)人：北京中医药大学，
类型：发明
国别省市：北京;11