麝香草酚的新应用制造技术

本发明专利技术属于饲料添加剂领域，尤其涉及麝香草酚的新应用。本发明专利技术提供了麝香草酚在溶解酵母细胞壁并提高酵母细胞壁多糖含量中的新用途，本发明专利技术还提供了一种饲料添加剂包括麝香草酚和酵母细胞，所述饲料添加剂的制备方法为麝香草酚与酵母细胞混合培养。该发明专利技术解决了现有去除饲料中黄曲霉毒素的方法中降低饲料营养价值，污染环境，方法单一，工序复杂，成本较高的技术缺陷的技术缺陷。所得的饲料添加剂能高效吸附饲料中的黄曲霉素，而且绿色无污染。同时，制备所述饲料添加剂的方法具有工艺简单、成本低廉的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于饲料添加剂领域，尤其涉及一种饲料添加剂及其制备方法。
技术介绍
谷物与饲料中霉菌毒素的污染是一个全球性问题。据报道，全球至少25％的饲料受到已知霉菌毒素的污染，霉菌毒素不仅会直接对动物造成毒害，还会通过食物链从动物转移到人体中。有些毒素在动物体内通过代谢会产生一些毒素相关化合物，而这些化合物也会经过食物链对人体产生伤害。霉菌毒素一直是困扰世界的难题，科研工作者曾用过物理、化学、生物的方法去除或钝化饲料中的霉菌毒素，目前通用的物理方法是吸附法，采用无机粘土矿物如膨润土、沸石以及铝硅酸盐等，这些粘土矿物质虽然能一定程度吸附饲料的霉菌毒素，但存在很多缺点，添加比例高，降低配合饲料的营养价值；无法进行生物降解，造成严重的环境污染，同时也会吸附矿物质、维生素等营养元素。目前，在饲料加工生产与使用中，采用的生物学方法是添加酵母细胞壁的方法来去除霉菌毒素，其中霉菌毒素大多为黄曲霉毒素。研究表明，酵母或酵母细胞壁成分具有吸附黄曲霉毒素的能力，其中β-葡聚糖、甘露聚糖是酵母细胞壁的活性成分之一，对黄曲霉毒素有一定的吸附能力。但是从酵母获得的酵母细胞壁含量较少，不能满足饲料加工生产的需求，同时，获得酵母细胞壁的方法工序繁多，成本较高，制约了其在饲料加工生产的应用。综上所述，传统的去除饲料黄曲霉毒素的方法中污染环境，降低饲料营养价值，方法单一，工序复杂，成本较高的技术缺陷。因此，寻找一种高效、环保、工艺简单、成本低廉的去除饲料中黄曲霉毒素的物质是本领域技术人员亟待解决的技术问题。
技术实现思路
麝香草酚(Thymol)，别名百里酚，是一种单萜酚，主要存在于唇形科百里香属植物中，是百里香属植物挥发油的主要成分；麝香草酚是从可食用植物中提取出来的，安全性高，资源丰富据研究表明麝香草酚对食品中常见的细菌、酵母菌和霉菌有一定抑菌作用；毒副作用小、安全性高的天然植物防腐剂。本专利技术发现在酵母细胞中添加麝香草酚，可以使酵母细胞壁自行裂解，提高酵母细胞壁中的β-葡聚糖、甘露聚糖含量。因此本专利技术提供了麝香草酚在溶解酵母细胞壁、提高酵母细胞壁多糖含量的新用途。本专利技术还提供了一种饲料添加剂，包括麝香草酚和酵母细胞。作为优选，所述麝香草酚与所述酵母细胞的质量比为(4～5)：(3000～4500)。进一步的，作为优选，所述麝香草酚的浓度为400-500μg/ml。本专利技术还提供了所述饲料添加剂的制备方法，麝香草酚与酵母细胞混合培养。作为优选，所述饲料添加剂的制备方法中所述酵母细胞由酵母的单克隆扩大培养得到。作为优选，所述饲料添加剂的制备方法中所述麝香草酚的浓度为400-500μg/ml，所述酵母细胞的浓度为300-450mg/ml。在一些实施例中，所述饲料添加剂的制备方法中所述麝香草酚的浓度为450μg/ml，所述酵母细胞的浓度为400mg/ml。作为优选，所述饲料添加剂的制备方法中所述培养为30℃，培养4-8小时。作为优选，所述饲料添加剂的制备方法中所述酵母为安琪酵母。本专利技术还提供了所述饲料添加剂在饲料的抗菌及吸附黄曲霉素中的应用。本专利技术的目的针对现有技术中仅使用酵母细胞壁吸附黄曲霉毒素的吸附效果差的不足，在酵母细胞中添加麝香草酚，不需破除酵母细胞壁，同时，还解决了普通的酵母细胞壁吸附黄曲霉毒素效果差的技术缺陷。在酵母细胞中添加麝香草酚，可以使酵母细胞壁自行裂解，提高酵母细胞壁中的β-葡聚糖、甘露聚糖含量，酵母细胞壁的多糖可以有效的吸附黄曲霉毒素、能有效降低饲料中的黄曲霉毒素，并且麝香草酚具有原料易得、价格低廉的特点。因此，本专利技术公开饲料添加剂是一种高效、环保的添加剂，所公开的饲料添加剂的制备方法具有工艺简单、成本低廉的优点。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。图1示饲料添加剂对黄曲霉素AFB1的吸附去毒能力，1为第一组，2为第二组(添加麝香草酚和酵母细胞组)；图2示麝香草酚诱导酵母细胞流式细胞术检测图，(A)为ECD通道的流式结果图，(B为)PB450通道的流式结果图；图3示麝香草酚诱导酵母细胞荧光显微镜检测图；图4示麝香草酚诱导酵母细胞聚丙烯酰胺凝胶电泳检测图，(A)为SDS-PAGE检测可溶性蛋白质含量的变化，(B)为酵母细胞经麝香草酚处理后可溶性蛋白的相对含量；图5示麝香草酚诱导酵母细胞β-葡聚糖含量测定图；图6示麝香草酚对酵母细胞壁吸附黄曲霉毒素AFB1的影响，(A)为TLC检测细胞壁吸附AFB1含量的变化，(B)为酵母细胞壁吸附AFB1相对值；图7示UV检测酵母细胞壁对麝香草酚的载药量的变化，其中T300为添加300μg/mL麝香草酚，T500为添加500μg/mL麝香草酚，Y+T300为添加酵母细胞+300μg/mL麝香草酚，Y+T500为添加酵母细胞+500μg/mL麝香草酚；图8示含有经麝香草酚处理的酵母细胞壁的平板上生长的黄曲霉菌丝受到抑制图。具体实施方式本专利技术提供了一种饲料添加剂及其制备方法，用于解决现有技术中的技术缺陷。下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。其中，黄曲霉毒素溶液为市售，用PBS(pH6.50.01M)稀释3倍得到B1溶液。本专利技术的实施例均运用SPSS12.0数据处理系统，采用Duncan's新复极差法(DMRT)进行显著性分析。图表数据的结果均是三次实验数据的平均值±SD。采用Origin8.5软件对实验数据分析处理。实施例1饲料添加剂对黄曲霉素AFB1的吸附去毒能力基础饲料配方为贻贝粉15％，豆饼15％，麦麸45％，大麦10％，玉米15％。该基础饲料中不含真菌毒素。取基础饲料，分两组。第一组在基础饲料中添加0.1mg/kg黄曲霉毒素B1(AFB1)后添加酵母细胞(终浓度为400mg/ml)，然后充分搅拌震荡4小时混合均匀。第二组在基础饲料中添加0.1mg/kg黄曲霉毒素B1(AFB1)后再添加麝香草酚和酵母细胞至麝香草酚终浓度为450μg/ml和酵母细胞终浓度为400mg/ml，然后充分搅拌震荡4小时混合均匀。然后分别检测两组饲料中AFB1含量，结果见图1。其中，AFB1含量测定步骤如下：吸取一定量黄曲霉培养滤液，加三倍氯仿萃取，萃取液于60℃用氮吹仪吹干，吹干物质在甲醇中溶解，过0.22μm微孔滤膜，然后用HPLC测定。色谱柱：COSMOSIL5C18-MS-IIPackedColumn(4.6mmI.D.×250mm)(上海泉岛公司)；柱温：22℃；进样量：10μL；检测波长：365nm；流动相：乙腈：甲醇：水(1:1:2，v/v/v)；流速：1mL/min。图1结果显示与第一组相比，第二组中的AFB1含量显著降低，说明450μg/ml的麝香草酚和终浓度为400mg/ml酵母细胞的添加剂能有效的吸附AFB1。另外，在基础饲料中添加黄曲霉毒素B1(AFB1)后再添加麝香草酚和酵母细胞至麝香草酚终浓度为400μg/ml和酵母细胞终浓度为300mg/ml，AFB1含量显著本文档来自技高网...

【技术保护点】
麝香草酚在溶解酵母细胞壁、提高酵母细胞多糖含量中的应用。

【技术特征摘要】
1.麝香草酚在溶解酵母细胞壁、提高酵母细胞多糖含量中的应用。2.一种饲料添加剂，其特征在于，包括麝香草酚和酵母细胞。3.根据权利要求2所述的饲料添加剂，其特征在于，所述麝香草酚与所述酵母细胞的质量比为(4～5)：(3000～4500)。4.根据权利要求2所述的饲料添加剂，其特征在于，所述麝香草酚的浓度为400-500μg/ml。5.一种饲料添加剂的制备方法，其特征在于，麝香草酚与酵母细胞混合培养。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述酵母...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡梁斌，李红波，周威，莫海珍，张浩，王淼焱，钱潘攀，
申请(专利权)人：河南科技学院，
类型：发明
国别省市：河南;41